Электрофорез процедура: Физиотерпия на дому: электрофорез — Вирилис

Лечение внутритканевой электростимуляцией дает отличные результаты, избавляя от хронического болевого синдрома, позволяя расширить двигательный режим и, что самое главное, повышается качество Вашей жизни!

Показания:
Остеохондроз позвоночника и артрозы суставов – проблема, которая знакома очень многим людям, причем как пожилого возраста, так и молодым людям.
Деформации позвоночника, остеохондроз позвоночника, последствия травм позвоночника и суставов – все это может в значительной мере снижать качество жизни пациентов.

Электрофорез – это метод введения в организм лекарственных веществ при помощи постоянного тока через кожу. При этом лекарство поступает непосредственно в больной орган, не оказывая отрицательного воздействия на весь организм.

В коже создается депо (скопление) и, постепенно рассасываясь, лекарство поступает в организм и оказывает лечебное действие: улучшается тканевой обмен, кровобращение, рассасывание, уменьшаются боли, снимается спазм.

Показания: лечение практически всех заболеваний в санаторно-курортных условиях.

Лекарственный электрофорез
Это процедура, предполагающая введение лекарств в организм через кожу или слизистую оболочку с помощью тока. Основана методика на разнице в заряженности самого препарата и электрода. Положительно заряженные лекарства вводят с отрицательного электрода и наоборот. Тогда они проникают в межклеточные щели, в устья сальных и потовых желез.
Электроды, обернутые в пропитанную лекарственным раствором марлю, будут накладываться в непосредственной близости к больному органу: на шейно-воротниковую зону, спину, нижние отделы живота, поясничную область.

Показана процедура при:
— Заболеваниях позвоночника: остеохондрозе, болезни Бехтерева
— Вибрационной болезни
— Гипертонической болезни
— Патологиях головного мозга: перенесенных инсультах, арахноидитах, черепно-мозговых травмах, менингоэнцефалитах
— Болезнях периферических нервов: невритах тройничного, затылочного, языкоглоточного нервов
— Гипоталамических синдромах
— Атеросклерозе мозговых сосудов
— Болезни Рейно
— Суставных патологиях
— Выраженных рубцах, особенно если они мешают движению в конечностях
— Заболеваниях женских половых органов

Сам лекарственный электрофорез уменьшает болевой синдром и возбудимость периферических нервов, улучшает питание тканей, оказывает противовоспалительное действие. Это действие дополняется непосредственными свойствами самого препарата.

СМТ терапия
Это процедура, при которой воздействие на человека производится переменными токами синусоидальной формы высокой частоты.

В основе метода – тройное воздействие на организм:
— Высокочастотными токами малой силы – на все слои кожи
— Синусоидальными токами – на весь организм
— Высокочастотной вибрации – на большую глубину мягких тканей в месте воздействия

СМТ-терапия показана при болезнях:
— Дыхательной системы: острых (пневмония) и хронических (бронхит, бронхиальная астма)
— Периферических нервов и мышц: невралгиях, миозитах, радикулитах, мышечной атрофии
— Суставов и позвоночника: травмы, воспаление околосуставной клетчатки, остеохондроз, болезнь Бехтерева, спондилез
— Пищеварительной системы: язвенная болезнь, хронические запоры, гастриты, дискинезия желчевыводящих путей
— Мочеполовой системы: цистит, простатит, ухудшение потенции
— ЛОР-органов: аденоидит, синуситы

СМТ-терапия уменьшает периферические отеки, улучшает состояние кожи и волос, снижает степень боли, улучшает местный тканевой метаболизм.
Под влиянием тока вырабатываются вещества, улучшающие сердечный и мозговой кровоток, а также гормоны радости – эндорфины.

ДДТ терапия«ДДТ» — сокращенно «диадинамотерапия». Она, как и гальванотерапия, предполагает воздействие токами небольшой частоты, но они поступают к телу пучками импульсов, имеющих разную частоту и чередующихся в разных последовательностях, в пределах 50-100 Герц.

Показана ДДТ-терапия при наличии таких заболеваний, как:
— Болезни и травмы позвоночника и суставов
— Мигрень
— Гипертоническая болезнь
— Радикулиты
— Болевые синдромы хронического характера
— Воспаления нервных стволов
— Эпилепсия
— Бронхиальная астма

Терапия диадинамическими токами оказывает различные полезные виды воздействия. Она улучшает местное кровообращение, уменьшает выраженность боли, улучшает питание тканей, на которые накладываются электроды, а также тонизирует мышцы.

При проведении процедуры нужно выбрать режим: непрерывный двухтактный или однотактный, ток с ритмом синкопе, режим с подачей постоянных токов короткими импульсами. Так программируется разное время, на которое будет снижена боль.

Дарсонвализация
При процедуре дарсонвализации лечебное действие оказывает электрический ток высокой частоты и напряжения, импульсной подачи.

Дарсонвализация показана при:
— Выпадении волос
— Длительно не заживающих ранах и послеоперационных и травматических рубцах
— Гипертрофических и келоидных рубцах
— Мигрени
— Остеохондрозе
— Угревой болезни
— Варикозном расширении вен
— Расширении сосудов геморроидального сплетения
— Начальной стадии образования морщин
— Некоторых урологических и гинекологических заболеваниях

Эффекты дарсонвализации: это улучшение местного кровообращения и скорости передачи импульсов с нерва на нерв и с нерва на мышцу, активизация деления клеток волосяных луковиц, нормализация тонуса сосудов. Высокочастотные токи дезинфицируют кожу, повышают иммунитет, увеличивают болевой порог нервных рецепторов.

Электросон
При этой процедуре постоянный ток успокаивающе действует на головной мозг. В результате человек должен засыпать: не всегда сразу, иногда – во второй половине сеанса, иногда – после ее окончания.

Электросон показан в комплексе лечения:
— Энуреза
— Тиков
— Заикания
— Хронических болевых синдромов, в том числе фантомных
— Повышенного артериального давления, когда «верхние» цифры – не выше 180 мм рт.ст.
— ИБС
— Ревматоидного артрита
— Последствий перенесенной черепно-мозговой травмы

Во время процедуры производится воздействие на медиаторы в головном мозге, что оказывает восстанавливающее действие на весь организм, уменьшает хронические боли, улучшает центральное управление сосудистым тонусом, работой эндокринными органами. Активизируется кровоснабжение мозга, что приводит к улучшению мыслительных функций, запоминания; уменьшается усталость и сонливость.
Точно доказано, что электросон снижает уровень холестерина и улучшает работу всех внутренних органов.

Гальванотерапия
Гальванотерапией называется лечение заболеваний с помощью электрического тока, причем имеющего невысокое напряжение и малую силу.

Гальванический ток, проходя через ткани, в которых содержится насыщенная электролитами жидкость (клеточная, межклеточная, содержащаяся в сосудах), вызывает в них:
— Расширение сосудов
— Покраснение кожи
— Снижение болевой чувствительности
— Ускорение регенерации не только кожи, но и мышц, периферических нервов, слизистых оболочек
— Улучшение доставки кислорода и питательных веществ к тканям
— Изменение обмена молекул, влияющих на реакции в головном мозге (медиаторов)
— Улучшается работа себоцитов кожи
— Активация работы местной иммунной системы

В санатории «Чувашиякурорт» проводятся 2 вида гальванотерапии: лекарственный электрофорез и электросон.

Лекарственный электрофорез

Лекарственный электрофорез

Лекарственный электрофорез — это метод аппаратной физиотерапии, который заключается в введения лекарственного вещества при помощи электрических импульсов через электроды. Благодаря методу медикаменты вводятся в зону поражения в нужной концентрации, имеют пролонгированное действие, при этом весь организм не насыщается ими и лекарства не вызывают побочных реакций.

Показания:

1. Заболевания дыхательной системы и органов слуха:

• насморк
• синусит
• фарингит
• тонзиллит
• пневмония
• бронхит
• бронхиальная астма

2. Болезни органов зрения:

• блефарит
• кератит
• иридоциклит
• увеит

3. Стоматологические заболевания:

• гингивит
• пародонтит
• стоматит

4. Патологии пищеварительной системы:

• язвенная болезнь
• гастрит
• холецистит
• панкреатит
• колит

5. Сердечно-сосудистые патологии:

• варикозная болезнь
• атеросклероз
• стенокардия
• гипертоническая болезнь
• гипотония

6. Заболевания мочеполовой системы:

• цистит
• пиелонефрит
• эндометрит
• цервицит
• вагинит тоническая болезнь
• гипотония

7. Заболевания нервной системы:

• невриты
• невралгии
• параличи
• неврозы
• травмы спинного и головного мозга

8. Дерматологические поражения:

• фурункулы
• карбункулы
• акне
• себорея
• дерматит
• ожоги

9. Заболевания опорно-двигательного аппарата:

• артрит
• артроз
• остеохондроз
• переломы

Противопоказания:

• острая стадия любого заболевания
• онкозаболевания
• повышенная температура тела
• проблемы со свертываемостью крови
• туберкулез в активной форме
• тяжелые психические заболевания
• наличие кардиостимулятора
• нарушение целостности тканей в месте наложения лекарственных прокладок
• непереносимость электрического тока или используемых лекарств
• сердечно-сосудистая недостаточность тяжелой степени
• беременность, кормление грудью
• наличие металлических зубных протезов при использовании на лице
• использование при менструации при воздействии на область малого таза

Процедуры назначаются после консультации с врачом физиотерапевтом. Курс составляет 6-12 процедур, проводятся ежедневно. Продолжительность процедур от 6 до 30 минут. Повторный курс при необходимости назначается через 2-6 месяцев.

Электрофорез в Самаре в частной клинике Косма

Электрофорез – один из распространенных методов физиотерапевтического лечения. Этот способ позволяет доставить лекарственные вещества в организм человека через кожу или слизистую оболочку с помощью электрического тока малого напряжения. При этом виде лечения используется минимальная доза препаратов, достигается не только локальный эффект, но и системный, так как воздействие электрического тока на кожу или слизистую оболочку стимулирует кровообращение. При проведении процедуры электрофореза используются два электрода и препарат в виде раствора, которым пропитывают салфетку (тампон). На кожу (или слизистую оболочку) пациента накладывают салфетки с электродами и пропускают электрический ток малого напряжения. При этом создается электрическое поле, заставляющее ионы лекарственного средства проникать внутрь тела в зоне воздействия.

Время одной процедуры – от 5 до 30 минут. Курс лечения от 5 до 10 процедур, которые проводятся ежедневно или через день. Точная длительность и периодичность определяется врачом в зависимости от формы и течения заболевания.

ПРЕИМУЩЕСТВА МЕТОДА

Быстрота воздействия

Эффект депо

Меньшая доза лекарства

Нетравматичный, подходит для детей

Польза электротоков 

Проверенный метод 

ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА

Метод успешно применяется в составе комплексной терапии для лечения заболеваний многих систем организма у детей и взрослых: нервной, мочеполовой, дыхательной, сердечно-сосудистой, желудочно-кишечного тракта, ЛОР-органов, опорно-двигательного аппарата. Также проводится электрофорез шейного отдела и с эуфиллином. 

Применяются лекарства с обезболивающим, противовоспалительным, седативным, регенерирующим и другими эффектами.

ПРЕИМУЩЕСТВА ЭЛЕКТРОФОРЕЗА В СЕМЕЙНОЙ КЛИНИКЕ «КОСМА»

— Проводится по направлению врачей клиники «КОСМА».

— Врачебный контроль – учет показаний и противопоказаний при назначении процедур врачом нашей клиники.

— Квалифицированные медицинские сестры, имеющие сертификат по физиотерапии и опыт практической работы.

— Сертифицированное медицинское оборудование для проведения электрофореза.

— Комфортный кабинет с игрушками для детей.

— Запись на точное время, без ожидания в очереди.

— Возможность проведения процедуры как со своим лекарством, так и с лекарством клиники по действующему прайс-листу.

— Удобный график работы филиалов

Электрофорез в Белгороде. Физиотерапия. ОРМЕД белгород| Поликлиника Мед Кон

Использование свойств гальванического тока лежит в основе большинства физиотерапевтических мероприятий. К числу наиболее эффективных лечебных и профилактических назначений относится электрофорез — классический метод воздействия на болевой очаг лекарственными средствами. При этом доставку лечебных веществ к тканям и органам обеспечивают ионы электрического тока.

Лекарственный электрофорез — процедура востребованная и любимая пациентами Поликлиники «МедКон» в Белгороде. Ведущие неврологи Центра отмечают, что регулярное физиотерапевтическое воздействие не только улучшает общее самочувствие больных, но и в разы сокращает сроки полного выздоровления.

Суть метода электрофореза

Под электрофорезом в медицине подразумевают электротерапевтический метод доставки в глубинные слои кожи лекарственных веществ в ионизированной форме.

Если через водный раствор какого-либо лекарства пропустить электричество, то под действием различных видов тока фармакологические препараты расщепляются на ионы — частицы с электрическим зарядом и высоким уровнем биодоступности. Дальнейшее распространение ионов происходит в межклеточном пространстве, через сальные или потовые железы.

Затем ионы лекарственного вещества проникают в кровоток, всасываются лимфотоком и через незначительное время достигают наиболее глубоких слоев тканей внутренних органов.

Характерная отличительная особенность электрофореза — эффект пролонгированного действия. Часть лекарственного средства, используемого во время сеанса, поступает в кровоток, тогда как основной объем задерживается в подкожной клетчатке и расходуется постепенно. Поэтому лечебное действие процедуры продолжается и на следующий день, а достигнутый эффект сохраняется еще в течение нескольких дней.

Особенности воздействия электрофореза на пациентов

Общий объем лекарств, которые попадают в организм во время электрофореза, составляет всего 10% от предусмотренной дозы, но лечебный результат превышает эффективность таких традиционных методов воздействия, как внутривенное, внутримышечное или пероральное введение препаратов.

Применение электрофореза обеспечивает комплексное терапевтическое действие на организм больного:

• замедляются воспалительные процессы;
• усиливается вывод жидкостей из тканей, устраняются отеки;
• уходит боль;
• мышцы расслабляются, снижается их тонус;
• происходит расширение сосудов и капилляров;
• успокаивающий эффект, нормализуется реакция нервной системы;
• повышается межклеточная микроциркуляция;
• улучшаются обменные процессы и вывод токсинов;
• запускаются процессы восстановления поврежденных тканей;
• стимулируется выработка биологических веществ, необходимых для полноценной жизнедеятельности организма — витаминов, гормонов, различных микроэлементов;
• активизируется иммунная система.

Применение электрофореза не провоцирует раздражение кишечника, не вызывает аллергии и не имеет побочных реакций.

Показания к применению электрофореза

Чаще всего, медики Центра «МедКон» назначают электрофорез в комплексе с дополнительными терапевтическими мерами и процедурами. Оптимальные результаты лечения достигаются при использовании внутритканевой электростимуляции и квантовой лазерной терапии.

Основные показания к посещению процедуры:

• патологии, связанные с поражением позвоночника и суставов;
• болезни мышечного и связочного аппарата;
• болезни сердечно-сосудистой системы;
• гипертония и гипотония;
• заболевания ЛОР-органов;
• вялотекущие формы хронических гинекологических заболеваний;
• болезни органов дыхания;
• воспалительные процессы мочеполовой системы;
• рубцы;
• ожоги;
• болезни кожи.

Также электрофорез успешно применяется в косметологических целях — для устранения морщин, борьбы с целлюлитом и общего омоложения.

Посещение нашего физиотерапевтического кабинета — простой, приятный и достаточно быстрый путь к здоровью всего организма. На смену болезням всегда приходит здоровье и новые силы, если вы — пациент Поликлиники «МедКон.

Физиотерапия

Физиотерапия | Прием врача: консультации и манипуляции | Частная клиника «Династия»

Транскраниальная микрополяризация (ТКМ)

Транскраниальная микрополяризация

Процедуру назначают:

Процедура длится:

Во время процедуры можно:

Эффект от микрополяризации имеет продленное воздействие и в полной мере проявится через 1-2 месяца!
Разрешена младенцам с 3 месяцев, что говорит о безопасности методики!

Показания к проведению микрополяризации:

• задержка моторного развития (дети до года с задержками моторного развития — ребенок не переворачивается, не садится, не встает)
• органическое поражение ЦНС в резидуальной стадии заболевания, в том числе детский церебральный паралич
• черепно-мозговые травмы (в том числе размозжения мозга) и сосудистые заболевания головного мозга в острый период, начиная с 1-2 дней после мозговой катастрофы, а также их последствия (синдром «вегетативный статус», гемипарезы, парапарезы, атаксия, афазия, алалия и др.)
• задержки нервно-психического развития и проблемы обучения (сложность усвоения материала, быстрая утомляемость)
• расстройства и задержки речевого развития у детей (ОНР, дизартрии, алалии, афазии, аграфии)
• психоэмоциональные, невротические, психосоматические расстройства (тики, навязчивые движения, энурез/психогенный энкопрез)
• эписиндром
• сосудистые проблемы
• нарушения слуховых функций
• нарушения зрительных функций
• снижение внимания
• нарушения памяти
• гипеактивность
• переутомление
• спортсмены в период активных тренировок

— определение, цель и этапы

Электрофорез в геле — это процедура, используемая для разделения биологических молекул по размеру. Разделение этих молекул достигается помещением их в гель с небольшими порами и созданием электрического поля поперек геля. Молекулы будут двигаться быстрее или медленнее в зависимости от их размера и электрического заряда.

Обзор гель-электрофореза

Процесс гель-электрофореза работает, потому что отрицательно заряженные молекулы удаляются от отрицательного полюса электрического тока, а молекулы меньшего размера будут двигаться быстрее, чем молекулы большего размера.Таким образом, разделение по размерам достигается в пуле молекул, проходящих через гель. Гель работает аналогично сите, разделяя частицы по размеру. Электрофорез перемещает частицы, используя свой собственный электрический заряд, через сито.

Когда исследователи пытаются различить, например, разные сегменты ДНК, процесс прост. Образцы загружаются в каналы в начале геля. Каждая молекула ДНК имеет одинаковый заряд (-1), потому что ДНК образована одними и теми же 4 нуклеотидами и всегда несет слегка отрицательный заряд независимо от ее размера. Следовательно, каждая молекула ДНК будет иметь одинаковую силу, протягивая ее через гель.

Однако размер каждой молекулы препятствует ее прохождению через гель. Большие молекулы ударяются о части гелевой матрицы и замедляются. Небольшие молекулы ДНК могут скользить между различными компонентами гелевой матрицы и быстро переходить на другую сторону геля. По прошествии определенного времени можно увидеть агрегацию окрашенных молекул ДНК в различных областях геля в зависимости от того, как далеко они переместились во время гель-электрофореза. Это позволяет исследователям идентифицировать сегменты и сравнивать ДНК разных организмов.

Для чего используется гель-электрофорез?

Цель гель-электрофореза — визуализировать, идентифицировать и различать молекулы , которые были обработаны с помощью предыдущего метода, такого как ПЦР, ферментативное расщепление или экспериментальные условия. Часто смеси нуклеиновых кислот или белков, собранные в предыдущем эксперименте / методе, подвергают гель-электрофорезу для определения идентичности или различения молекул.

Этапы гель-электрофореза

Общие этапы стандартного протокола гель-электрофореза ДНК:

1. Подготовка образцов для анализа

ДНК выделяется и предварительно обрабатывается (например, ПЦР, ферментативное расщепление) и готовится в растворе с некоторым основным синим красителем, чтобы помочь визуализировать движение образца через гель.

2. Готовят раствор агарозного геля TAE.

Буфер TAE обеспечивает источник ионов для создания электрического поля во время электрофореза.Отношение веса к объему агарозы в буфере TAE используется для приготовления раствора. Например, если требуется 1% гель агарозы, 1 г агарозы добавляют к 100 мл TAE. Используемый процент агарозы определяется ожидаемым размером ДНК. Если кто-то смотрит на разделение пула полос ДНК меньшего размера (<500 п.н.), готовится гель с более высоким процентным содержанием агарозы (> 1%). Более высокий процент агарозы создает более плотное сито для увеличения разделения небольших различий в длине ДНК.Раствор агароза-ТАЕ нагревают до растворения агарозы.

3. Отливка геля

Раствор TAE агарозы выливают в лоток для отливки , который после охлаждения и затвердевания гелевого раствора создает пластину геля с рядом лунок наверху.

4. Установка камеры для электрофореза

Твердый гель помещают в камеру, заполненную буфером TAE. Гель располагается так, чтобы лунки камеры были ближе всего к отрицательному электроду камеры.

5. Загрузка геля

Лунки гелевой камеры загружаются образцами ДНК, и обычно лестница ДНК также загружается в качестве эталона для размеров.

6. Электрофорез

Отрицательный и положительный выводы подключены к камере и к источнику питания, на котором устанавливается напряжение. Включение источника питания создает электрическое поле , и отрицательно заряженные образцы ДНК начнут мигрировать через гель и от отрицательного электрода к положительному.

7. Остановка электрофореза и визуализация ДНК

После того, как синий краситель в образцах ДНК прошел через гель достаточно далеко, питание отключают, гель удаляют и помещают в раствор бромистого этидия. Бромид этидия внедряется между ДНК и виден в ультрафиолетовом свете. Иногда бромид этидия добавляют непосредственно в раствор агарозного геля на этапе 2. Гель, окрашенный бромидом этидия, затем подвергается воздействию УФ-излучения и делается снимок. полос ДНК визуализируются с каждой дорожки, соответствующей лунке камеры. Также визуализируется загруженная лестница ДНК и можно оценить длину полос ДНК. Пример приведен на рисунке ниже.

Типы гель-электрофореза

Существует два типа гель-электрофореза: нативный и денатурирующий. Электрофорез в нативном геле обычно пытается сохранить РНК или белок в его нативной структуре, пропуская их через гель.Денатурирующий гель-электрофорез пытается восстановить РНК или белок до его наиболее линейной структуры до или во время гель-электрофореза.

Денатурация РНК или белка достигается добавлением восстанавливающего агента к образцу, гелю и / или буферу. Восстанавливающий агент разделяет связи в молекуле РНК или белка и тем самым уменьшает ее вторичную структуру. Вторичная структура белка или РНК будет нелинейным образом влиять на скорость его миграции через гель. Однако денатурированная линейная форма РНК или белка будет мигрировать пропорционально своему линейному размеру (парам оснований или килодальтонам). Денатурирующий гель-электрофорез часто более точен для определения размера, тогда как нативный гель-электрофорез обычно используется для идентификации более крупных белковых комплексов.

Примеры гель-электрофореза

• TAE-электрофорез в агарозном геле чаще всего используется для ДНК.
• TBE и денатурирующий PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле) являются общими для разделения РНК.
• SDS PAGE — это денатурирующий гель-электрофорез, обычно используемый для идентификации и разделения белков.

Викторина

Процесс электрофореза | Sciencing

Определение

Электрофорез — это процесс разделения определенных больших молекул, чтобы их было легче исследовать. Само слово происходит от греческого «электро», относящегося к электрическому току, который добавляет энергию электронам атомов молекулы, и «форез», относящегося к движению частиц.Электрофорез используется в основном с коллоидными или макромолекулярными частицами — большими частицами, состоящими из более чем одной простой структуры молекулы, например, белков или сложных нуклеиновых кислот.

Процесс

Эти молекулы разделяются электрическим током, который обычно проходит через гель. Этот гель, часто на основе диоксида кремния, используется для суспендирования частиц и удержания заряда. К гелю прикреплены два электрода, и создаваемый ими ток используется для притяжения молекул к одной части геля, отталкивая их с другой стороны.Гель создает силу трения, которая не позволяет всем молекулам двигаться через него одновременно, но более крупные молекулы, как правило, могут преодолеть трение и в любом случае разделиться. Движение молекул через гель создает слои различных типов молекул.

Использование

В электрофорезе действует ряд различных факторов, и каждый из них важен для определения типа исследуемых молекул. Насколько быстро они движутся, насколько силен электрический ток, точное качество геля, форма молекул, размер молекул, температура раствора и другие факторы — все это говорит ученым, на какие молекулы они смотрят. .

Чтобы молекулы удерживались на своих местах, они окрашиваются в различные полосы по всему гелю, что делает его похожим на серию цветных полос. Этот процесс — один из наиболее важных шагов в анализе ДНК, позволяющий ученым выделить белки ДНК и внимательно изучить их, чтобы определить их конкретные характеристики.

Принцип и метод электрофореза в полиакриламидном геле (SDS-PAGE)

SDS-PAGE — это аналитический метод разделения белков на основе их молекулярной массы.

Принцип

Когда белки разделяются электрофорезом через гелевую матрицу, более мелкие белки мигрируют быстрее из-за меньшего сопротивления со стороны гелевой матрицы. Другие факторы, влияющие на скорость миграции через гелевую матрицу, включают структуру и заряд белков.

В SDS-PAGE использование додецилсульфата натрия (SDS, также известного как лаурилсульфат натрия) и полиакриламидного геля в значительной степени устраняет влияние структуры и заряда, а белки разделяются исключительно на основе длины полипептидной цепи.

SDS представляет собой детергент с сильным денатурирующим белок эффектом и связывается с основной цепью белка при постоянном молярном соотношении. В присутствии SDS и восстановителя, который расщепляет дисульфидные связи, важные для правильного сворачивания, белки разворачиваются в линейные цепи с отрицательным зарядом, пропорциональным длине полипептидной цепи.

Полимеризованный акриламид (полиакриламид) образует сетчатую матрицу, подходящую для разделения белков типичного размера. Прочность геля позволяет легко обращаться с ним.Электрофорез в полиакриламидном геле белков, обработанных SDS, позволяет исследователям легко, недорого и относительно точно разделять белки в зависимости от их длины.

Процедура

Определение, принцип, процесс, протокол и приложения

«Электрофорез — это распространенный метод генетической лаборатории, используемый для разделения заряженных частиц, таких как ДНК или РНК, в зависимости от их размера».

ДНК не имеет цвета и запаха, поэтому мы ее не видим.Если мы не можем его найти, как мы можем его проанализировать и обработать? Трудно, правда! Но что, если мы каким-то образом раскрасим нашу ДНК или фрагменты ДНК, используя ее отрицательный заряд, чтобы работать в электрическом поле?

Мы можем видеть ДНК, не похожую на типичную спирально-спиральную структуру, но мы можем наблюдать ее как резкую полосу. Вот для чего нужен электрофорез в агарозном геле. Проще говоря, это помогает видеть и анализировать ДНК.

Рисование и бег позволяют визуализировать ДНК и определять размер ДНК соответственно.И поэтому он выполняет две из наших задач; проверяет наличие отсутствия и определяет размер фрагмента.

В начале 19 века, Johann Wilhelm Hittorf et al. заявил, что

« Под влиянием электрического поля более мелкие органические ионы могут перемещаться через водный раствор, что также помогает при измерении свойств и поведения ионов».

Это было первое сообщение об электрофорезе.

Спустя несколько лет, Арне Тизелиус , шведский биохимик впервые опубликовал в 1937 году статью о полном процессе и апертурах электрофореза. В 1948 году он получил Нобелевскую премию.

Технически электрофорез разделяет заряженные частицы (например, ДНК) на геле и определяет их размер.

Настоящая методика имеет множество применений в генетических исследованиях. Фактически, это единственный метод, который требуется почти в каждом генетическом эксперименте.Каждый эксперимент вроде

• гДНК выделение,
• амплификация ПЦР,
• обнаружение мутаций,
• рестрикционное расщепление,
• клонирование гена,
• секвенирование ДНК,
• амплификация гена

Необходим электрофорез в агарозном геле для оценки результатов. Если у вас есть в этом хороший опыт, поверьте мне, вы можете лучше всех проявить себя в своих исследованиях, проектах, докторантуре и даже в диагностике. Однако, в отличие от ПЦР, большинство этапов гель-электрофореза выполняется вручную.

Итак, у него есть несколько фантастических приложений, а также ограничения, которые мы собираемся здесь обсудить.

В этом сообщении блога я объясню каждый момент, связанный с электрофорезом в агарозном геле, такой как определение, принцип, процесс, протокол, приложения и оптимизации. Это, несомненно, повысит ценность ваших знаний в области генетики.

Следите за обновлениями.

Процесс разделения и характеристики молекул на основе их размера и заряда известен как электрофорез.

« Под действием постоянного электрического тока заряженная частица может перемещаться в жидкой или текучей среде, весь процесс известен как электрофорез».

Короче говоря, электрофорез — это процесс идентификации, разделения и характеристики биологических молекул, таких как ДНК, РНК или белки.

• Для идентификации биомолекул, таких как ДНК, РНК или белки.
• Для определения размера биомолекул.
• Для запуска биомолекул под действием электрического тока.
• Для оценки размеров биомолекул

Обычно электрофорез бывает двух видов: вертикальный гель-электрофорез и горизонтальный гель-электрофорез.

Вертикальный гель-электрофорез анализирует образцы в перевернутом виде и прерывисто. Обычно он используется для разделения белков.PAGE-электрофорез в полиакриламидном геле — это тип вертикального гель-электрофореза, в котором используется полиакриламид, а не агароза.

Горизонтальный гель-электрофорез анализирует образцы непрерывно, параллельно поверхности и разделяя ДНК. Вместо полиакриламида используется гель агарозы.

С другой стороны, горизонтальный гель-электрофорез проще, надежен и дает лучшие результаты, но он не может разделять фрагменты с меньшими различиями. Обычно для разделения более мелких разностных фрагментов надежнее PAGE.

Например, для разделения фрагментов ДНК длиной от 5 до 10 п.н. необходим ПААГ, а не агарозный гель. Напротив, для разделения фрагментов длиной от 100 до 1000 п.н. можно использовать агарозный гель. Мы будем обсуждать только электрофорез ДНК в агарозном геле и не будем здесь обсуждать ПААГ.

Настоящая методика имеет другое название — Submarine Gel Electrophoresis , поскольку весь гель остается полностью покрытым текущим буфером.

Химические вещества:

Порошок агарозы, буфер TAE или TBE, бромид этидия и краситель бромфеноловый синий.

Оснащение:

Устройство для литья под гель, камера для электрофореза, источник напряжения, лоток для геля, гребенка, печь, ультрафиолетовый трансиллюминатор.

Прочие коммунальные услуги:

Пипетки, наконечники, колба, весы.

Продолжительность:

от 70 минут до 90 минут.

Гипотетическое изображение оборудования для электрофореза в агарозном геле показано ниже,

Как мы уже сказали, принцип зависит от заряда частиц.

Отрицательно заряженные молекулы ДНК перемещаются к положительному заряду под действием постоянного тока, поэтому разделение зависит от массы и заряда ДНК. Молекулы ДНК вынуждены перемещаться через поры геля агарозы. Скорость миграции зависит от,

• Сила поля
• Гидрофобность ДНК
• Ионная сила буфера
• Размер и форма ДНК
• Температура буфера

Три важных фактора, влияющих на миграцию ДНК ставка,

Если концентрация агарозы ниже, ДНК может мигрировать легко и быстрее, и наоборот.

Суперспиральная ДНК мигрирует быстрее, чем линейная ДНК и кольцевая ДНК.

Суперспиральная форма ДНК более компактна, чем другие формы, что вызывает быструю миграцию.

Более крупные фрагменты ДНК работают медленнее, а более мелкие фрагменты ДНК — быстрее. Более короткие ампликоны ПЦР мигрируют быстрее, чем гДНК.

• Агароза
• Прибор для электрофореза в агарозном геле
• Буфер для электрофореза в агарозном геле
• Краска для загрузки геля ДНК
• EtBr
• Powerpack

Агароза — полисахарид, извлекаемый из морских водорослей. Длинная цепь (полимер) агаробиозы создает сахар агарозы. Удаление агаропектина из агарозы образует агарозу.

Линейный полисахарид агарозы состоит из мономерного звена D-галактозы и 3, дисахарида 6-ангидро-L-галактопиранозы.

Агароза растворяется в воде при кипячении. Когда мы кипятим, он растворяется в буфере и после охлаждения образует водородные связи (сшивание), что приводит к полимеризации.Образуя водородные связи между соседними молекулами, он создает трехмерную матрицу пор.

Высшая сшиваемость; уменьшить размер пор и наоборот.

Размер пор зависит от концентрации агарозы в геле. Поры создают в геле канал, по которому может мигрировать ДНК.

Температура плавления агарозы близка к температуре кипения (~ 95 ° C), тогда как температура гелеобразования составляет ~ 37 ° C — 43 ° C.По мере увеличения концентрации агарозы размер пор уменьшается. Для различных типов ДНК концентрация агарозы приведена в таблице ниже,

Если концентрация геля и размер фрагмента ДНК не совпадают, мы не сможем получить хорошие результаты.Например, более крупный фрагмент ДНК не может мигрировать в высококонцентрированном геле. Он производит мазок ДНК.

Мы не можем получить четкую, различимую полосу ДНК.

Молекулы меньшего размера перемещаются быстрее, чем молекулы большего размера, поэтому наблюдаются различные структуры полос ДНК в зависимости от их размера.

Оборудование для электрофореза в агарозном геле оснащено камерой для электрофореза, гелем для заливки, гребенкой для геля, электродами и зажимами (помечены на рисунке выше).

Камера для гель-электрофореза изготовлена ​​из высококачественного акрила. Буфер для электрофореза в агарозном геле заполняют камеру для электрофореза.

Заливка для геля — важный компонент, который используется для заливки геля. Зажим помогает при установке лотка для геля плотно прилегать к роликовому устройству, чтобы гель не вытек.

После того, как гель осядет, зажимы удаляют и лоток для геля переносят в камеру для агарозы (которая заполнена буфером для электрофореза в агарозном геле).

Гелевые гребешки делают лунки в агарозе, в которые будут загружены наши образцы ДНК. Камера для гель-электрофореза имеет положительный электрод на одном конце и отрицательный на другом конце.

Размещение гребня показано на рисунке ниже,

Буфер работает как жидкая среда для хорошей миграции ДНК в гель. TAE (трис-ацетат EDTA) и TBE (трис-борат EDTA) — две распространенные и широко используемые буферные системы.

Буфер

Одним из основных преимуществ буфера для электрофореза является его способность поддерживать pH среды.

Борат, присутствующий в буфере TBE, может реагировать с глицерином красителя для загрузки геля ДНК, поэтому не TBE, а буфер TAE обычно является первым выбором для проведения электрофореза.

Приготовление 10-кратного буфера TAE (для 250 мл)

• 400 мМ Трис
• 200 мМ уксусная кислота
• 10 мМ ЭДТА
• Добавьте D / W, чтобы получить конечный объем 250 мл

Примечание: используйте только один тип буфера как для приготовления геля, так и для заполнения резервуара.

Если вы хотите узнать больше о буферах для электрофореза в агарозном геле, прочтите нашу предыдущую статью. Статья доминирует в поиске Google и входит в топ-3 результатов поисковой выдачи Google. Прочтите здесь: Буфер для электрофореза в агарозном геле.

ДНК содержит бромфеноловый синий и глицерин. Он отслеживает миграцию ДНК в геле во время бега. Во время этого процесса краситель опережает ДНК, так что мы можем измерить расстояние, пройденное ДНК в геле.

Кроме того, глицерин, присутствующий в красителе для загрузки геля ДНК, обеспечивает плотность ДНК, которая заставляет ДНК оседать на дне лунки.

Состав 1X загрузка красителя,

• 0,042% (вес / объем) порошок бромфенолового синего
• 2,5% фиколл
• 0,042% (вес / объем) ксилолцианол FF (необязательно)
• Окончательный макияж с D / W

Если вы хотите узнать больше о Краска для загрузки геля ДНК, пожалуйста, прочтите нашу предыдущую статью: Краска для загрузки геля ДНК.Эта статья также составляет серьезную конкуренцию другим статьям с высокими рейтингами.

Бромид этидия — флуоресцентный краситель, используемый для мечения ДНК. ДНК не имеет собственного цвета, EtBr интеркалирует с основаниями ДНК и дает флуоресцентный цвет в УФ-свете.

Внимание: опасность мутагенного воздействия !!

EtBr обладает мутагенным действием. Перед работой наденьте перчатки, колпачок для рта и защитное стекло от УФ-излучения.

Мы рассмотрели целую статью о том, как EtBr интеркалирует с ДНК, о свойствах EtBr, о том, как использовать EtBr и о его важности.Прочтите статью здесь: Роль EtBr в электрофорезе в агарозном геле.

Оба электрода прикреплены к блоку питания. Мы можем запускать ДНК при напряжении 50, 100 или 120 В в зависимости от типа образца ДНК. Блок питания важен для обеспечения электрического тока во время процесса.

Весь процесс можно разделить на шесть этапов:

• Подготовка геля
• Отливка геля
• Загрузка образца
• Запуск геля
• Визуализация геля
• Интерпретация результатов или очистка ДНК.

1. Подготовка геля агарозы:

Для разделения фрагментов ПЦР рекомендуется 2% гель агарозы. Чтобы приготовить 2% гель агарозы, взвесьте 2,0 грамма порошка агарозы и поместите его в колбу.

Добавьте в колбу 100 мл 1X буфера TAE (или TBE) и хорошо встряхните, пока порошок агарозы не смешается с буфером.

Чтобы подготовить 10-кратный исходный буфер и 1-кратный рабочий буфер, прочтите нашу предыдущую статью: Буфер для электрофореза в агарозном геле.

Теперь нагрейте смесь в духовке при температуре 95ºC до полного растворения агарозы в буфере (или от 3 до 5 минут). Когда он достигает температуры кипения, раствор становится прозрачным, что указывает на то, что порошок агарозы правильно растворяется в буфере.

Осторожно: горячая поверхность !!

Следует соблюдать осторожность при нагревании геля в микроволновой печи. Если возможно, перед этим пройдите необходимое обучение.

Осторожно достаньте колбу из духовки и поставьте на некоторое время, пока она не станет доступной для прикосновения.

Теперь добавьте 0,5 мкг / мл EtBr и хорошо встряхните, чтобы перемешать как следует (осторожно встряхните, чтобы не образовывались пузырьки).

2. Отливка геля:

Поместите лоток для геля на роликовую платформу и затяните ее с помощью зажимов. Поместите гребешок для геля на поддон для геля.

Вылейте гель в кастрюлю для геля и подождите, пока он не затвердеет.

Поместите его в прохладную среду, или вы также можете поместить его в мороз, чтобы быстрее осесть.

Заполните камеру для электрофореза буфером для гель-электрофореза и осторожно поместите лоток для геля в камеру.

Теперь заполните оставшийся буфер, пока он не покроет весь гель.

3. Загрузка образца:

Возьмите образцы ДНК, разместите их в хронологическом порядке и добавьте в них BPB или смешайте его на парафильме. Подробнее о том, как добавить краситель для загрузки геля ДНК в ДНК, читайте в нашей предыдущей статье, ссылка дана где-то в статье.

Теперь осторожно возьмите 10 мкл образца и вылейте его в лунку. Помните, не разбивайте гель при загрузке образца.

Загрузите каждый образец по порядку. Наконец, загрузите лестницу ДНК. Вы также можете загрузить маркер ДНК или лестницу в первую позицию.

4. Запуск геля:

Подключите электроды к блоку питания и запустите гель при 100 В в течение 45–60 минут. Запускайте образцы до тех пор, пока ДНК не покроет расстояние 75% к положительному узлу.

Красный — положительный узел, черный — отрицательный.

После завершения цикла осторожно удалите гель.

5. Визуализация геля:

Запускайте гель до тех пор, пока бромфеноловый синий (краситель для загрузки геля ДНК) не достигнет края геля. Выключите источник питания, осторожно удалите гель из камеры для электрофореза и слейте буфер.

Примечание: EtBr делает ДНК видимой.

Теперь осторожно поместите гель на платформу УФ-трансиллюминатора и закройте провод трансиллюминатора.

Помните !! не забудьте надеть перчатки и защитные очки, ультрафиолетовый трансиллюминатор излучает ультрафиолетовый свет, который может нанести вред клеткам нашей кожи.

• Тестирование ДНК,
• Проверка качества ДНК
• Картирование генома,
• Различение гомозиготных и гетерозиготных
• Находит аллель или аллельные вариации
• Отбор с помощью маркеров — RFLP, AFLP и RAPD Гель-электрофорез:

  Я уже упоминал протокол электрофореза в агарозном геле.Это мой стандартный протокол, и вы можете использовать его для своих экспериментов.

  1. По возможности используйте буфер TAE. Борат в TBE может создать серьезную проблему.
  2. Запустите гель на соответствующем входе тока, работая с большей или меньшей скоростью, создайте мазок ДНК или диффузию ДНК в геле, соответственно. Делайте в соответствии с протоколом или рекомендациями производителя.
  3. Используйте 0,8% гель для геномной ДНК и 1,8% гель для фрагментов ПЦР.
  4. Не использовать буфер повторно.
  5. Выбросьте гель после использования, не используйте его повторно.
  6. Запуск ДНК при более высоком напряжении, нагревание и гель и деградация ДНК.
  7. Не используйте гель, если видны пузырьки.
  8. Не переливать образец, если лунки разбиты.

  Лично я предпочитаю порошок агарозы Seakem, который экономичен и дает прекрасный результат.

  Меры предосторожности:

  При проведении электрофореза в агарозном геле необходимо соблюдать некоторые меры предосторожности:

  • Порошок агарозы опасен, поэтому всегда надевайте перчатки, маски и очки при приготовлении геля агарозы.
  • При кипячении агарозы надевайте жаростойкие перчатки (термостойкие). Не используйте пластиковые перчатки, это может обжечь руку.
  • EtBr является канцерогенным и мутагенным, поэтому примите необходимые меры перед обращением с ним.

  Можем ли мы сделать прибор для электрофореза в нашей лаборатории? подумайте об этом и дайте мне знать в поле для комментариев.

  Резюме:
  • Гель-электрофорез разделяет ДНК на основе ее заряда и размера.
  • Увеличение концентрации геля уменьшает размер пор и наоборот.
  • Более крупные фрагменты работают медленнее, а более мелкие фрагменты — быстрее.
  • Когда включается ток, ДНК начинает двигаться к положительному узлу.
  • EtBr интеркалирует с ДНК и излучает флуоресценцию в УФ-свете.
  • BPB опережает ДНК, следит за миграцией.
  • Лестница ДНК помогает определить размер фрагментов ДНК.
  • Электрофорез в агарозном геле, часто известный как горизонтальный гель-электрофорез, используется для разделения нуклеиновых кислот (ДНК / РНК) в диапазоне от 50 пар оснований до ~ 15 килобайт.
  Заключение:

  Электрофорез в агарозном геле — это вспомогательный метод, помогающий определять ДНК. Электрофорез в агарозном геле до сих пор является непревзойденным и незаменимым методом. Однако сейчас доступны некоторые другие быстрые и более точные варианты, но они стоят очень дорого.

  Каждый шаг имеет для нас разный тип риска и разные настройки. Это трудоемкий, но точный процесс. Если вы новичок в этой области, вам следует изучить эту технику для успешной исследовательской карьеры.

  Хотя процесс сложен, как только вы его изучите, вам понравится это делать.

  Часто задаваемые вопросы

  Для чего нужен электрофорез в агарозном геле?

  Цель электрофореза в агарозном геле — разделить заряженные частицы, такие как ДНК, на основе их размера. Он определяет размер биомолекулы.

  Какая польза от агарозы в электрофорезе в агарозном геле?

  Порошок агарозы, используемый в процессе электрофореза в агарозном геле, обеспечивает матрицу, через которую проходит ДНК или РНК под действием электрического тока.Поры полисахаридов агарозы пропускают ДНК.

  Почему мы используем электрофорез в агарозном геле?

  Для разделения биомолекул, таких как ДНК, РНК или белок, в зависимости от их размера и заряда, мы используем метод гель-электрофореза.

  Из чего состоит агароза?

  Агароза — это тип полисахарида, состоящий из полимеров агаробиозы.

  Каковы этапы электрофореза в агарозном геле?

  Несколько шагов техники: подготовка геля, заливка геля, загрузка образца, запуск геля, визуализация геля и результаты и интерпретация.

  Источники:

  Ли PY, Costumbrado J, Hsu CY, Kim YH. Электрофорез в агарозном геле для разделения фрагментов ДНК. J Vis Exp . 2012; (62): 3923. Опубликовано 20 апреля 2012 г. doi: 10.3791 / 3923

  Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE) | Методы PulseNet | PulseNet

  Что такое PFGE?

  Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE) — это лабораторный метод, используемый учеными для получения отпечатка ДНК бактериального изолята.Бактериальный изолят — это группа бактерий одного типа. PulseNet исследует бактериальные изоляты от больных людей, зараженных продуктов и мест, где они производятся.

  Использует ли PulseNet другие методы снятия отпечатков пальцев?

  PFGE — это текущий «золотой стандарт» метод снятия отпечатков пальцев, используемый в PulseNet. Однако PulseNet переходит на использование полногеномного секвенирования (WGS). Для некоторых организмов PulseNet также использует анализ тандемных повторов с несколькими локусами переменных (MLVA), чтобы помочь в расследовании вспышек.

  Как работает PFGE?

  1. Ученый берет бактериальные клетки с чашки с агаром.
  2. Ученый смешивает бактериальные клетки с расплавленной агарозой и выливает их в форму для пробок.
  3. Бактериальные клетки вскрываются с помощью биохимических веществ или лизируются, так что ДНК остается свободной в пробках агарозы.
  4. Ученый загружает желатиновую пробку ДНК в гель и помещает ее в электрическое поле, которое разделяет фрагменты ДНК в соответствии с их размером.
  5. Гель окрашен, так что ДНК можно увидеть в ультрафиолетовом (УФ) свете.Цифровая камера делает снимок геля и сохраняет изображение в компьютере.

  Фрагменты ДНК производят отпечаток ДНК с определенным рисунком. На рисунке показан пример геля агарозы, где каждая полоса представляет собой отпечаток ДНК или узор. PFGE отличается от обычного электрофореза ДНК, потому что PFGE может разделять очень большие фрагменты для создания отпечатка пальца путем постоянного изменения направления электрического поля.

  После создания отпечатка ДНК лаборатория общественного здравоохранения анализирует образец отпечатка пальца с помощью программы, известной как BioNumerics *.После анализа лаборатория загружает свой образец в национальную базу данных, где менеджеры баз данных PulseNet Central исследуют образец, чтобы определить, является ли он причиной вспышки или является частью продолжающейся вспышки. Если это так, эти менеджеры баз данных будут работать с микробиологами и эпидемиологами общественного здравоохранения для дальнейшего расследования вспышки.

  Преимущества PFGE

  • Высокое соответствие с эпидемиологической зависимостью
  • Может применяться в качестве универсального универсального метода определения подтипов для многих различных бактерий с выбором только рестрикционного фермента и условий электрофореза, оптимизированных для каждого вида
  • Стабильные и воспроизводимые образцы рестрикции ДНК
  • Более разборчивый, чем такие методы, как риботипирование или множественное типирование последовательностей, внешний значок для многих бактерий

  Начало страницы

  Ограничения PFGE

  • Трудоемко
  • Не делает различий между ВСЕМИ неродственными изолятами
  • Модели рестрикции ДНК могут незначительно отличаться в зависимости от технического специалиста
  • Невозможно оптимизировать разделение всех частей геля одновременно
  • Полосы одного размера не могут происходить из одной и той же части хромосомы
  • Изменение в одном сайте ограничения может привести к более чем одному изменению диапазона
  • «Родство» следует использовать как ориентир, а не как истинную филогенетическую меру
  • Некоторые штаммы не могут быть типированы PFGE
  • Не различает изоляты в той степени, которая может быть достигнута с помощью полногеномного секвенирования (WGS).

  * Упоминание или изображение любой компании или продукта не означает их одобрение со стороны CDC или HHS.

  Начало страницы

  Процедуры электрофореза

  Helena рада предоставить процедурные вставки в пакет в цифровом формате, доступном для редактирования пользователем. Загрузив эти процедуры, ваше учреждение берет на себя ответственность за их изменение и использование. Полные спецификации и требования содержатся в файле READ ME, прилагаемом к загрузке. Для загрузки просто нажмите на желаемую ссылку ниже. Вам будет предложено выбрать место для сохранения загруженного файла на локальный диск.

  Если вам нужна вставка с процедурой, которой нет здесь, позвоните по телефону 1-800-231-5663.

  Процедуры электрофореза

  Сенсорная система SPIFE

  SPIFE Touch Acid Hemoglobin Procedure, Pro 230 Rev 3 (Text) (Pdf)
  SPIFE Touch Alkaline Hemoglobin Procedure, Pro 229 Rev 5 (Text) (Pdf)
  SPIFE Touch Alkaline Phosphatase (ALP) Isoenzyme Procedure, Pro 233 Rev 2 ( Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch Vis с холестерином, Pro 232 Rev 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch CK Vis с изоферментом, Pro 234 Rev 2 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch IgG IEF, Pro 237 Rev 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch IgG IEF-20, Pro 236 Rev 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch ImmunoFix, Pro 220 Ред. 5 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch ImmunoFix-15, Pro 222 Rev 4 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch Ultra ImmunoFix, Pro 221 Rev 2 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch Ultra ImmunoFix-15, Pro 223 Rev 2 (Текст) (Pdf)
  SPIFE Touch LD Изоферментная процедура, Pro 235 Rev 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch Lipoprotein, Pro 247 Rev 3 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Touch SPE, Pro 227 Rev 3 (Текст) (Pdf) 9 0133 SPIFE Touch Split Beta SPE — 20, 40, 60 Процедура, Pro 225 Ред. 3 (Текст) (Pdf)
  SPIFE Touch Split Beta SPE — 80, процедура 100, Pro 226 Ред. 3 (Текст) (Pdf)
  SPIFE Touch SPE Процедура Hi Res-20, Pro 228 Rev 2 (Text) (Pdf)
  

  QuickGel для SPIFE Touch System

  QuickGel Touch Acid Hemoglobin Procedure, Pro 241 Rev 3 (Text) (Pdf)
  QuickGel Touch Alkaline Hemoglobin Procedure, Pro 242 Rev 3 (Text) (Pdf)
  Процедура QuickGel Touch для определения холестерина, Pro 245 Rev 2 (текст) (Pdf)
  QuickGel Touch CK Vis Isoenzyme Procedure, Pro 244 Rev 1 (Text) (Pdf)
  QuickGel Touch ImmunoFix Procedure, Pro 240 Rev 2 (Text) (Pdf)
  QuickGel Touch LD Isoenzyme Procedure, Pro 243 Rev 1 (Text) (Pdf )
  Процедура QuickGel Touch Lipoprotein, Pro 246 Rev 2 (Текст) (Pdf)
  Процедура QuickGel Touch SPE, Pro 238 Rev 3 (Текст) (Pdf)
  Процедура QuickGel Touch Split Beta SPE, Pro 239 Rev 3 (Текст) (Pdf )
  

  SPIFE 3000

  SPIFE Acid Hemoglobin Procedure, Pro 176 Rev 8 (Text) (Pdf)
  SPIFE Alkaline Hemoglobin Procedure, Pro 170 Rev 11 (Text) (Pdf)
  SPIFE Alkaline Phosphatase (ALP) Isoenzyme Procedure, Pro 202 Rev 2 (Text) ( Pdf)
  SPIFE Vis Cholesterol Procedure, Pro 185 Rev 5 (Text) (Pdf)
  SPIFE CK Vis Isoenzyme Procedure, Pro 99 Rev 4 (Text) (Pdf)
  SPIFE IgG IEF Procedure, Pro 73 Rev 4 (Text) (Pdf )
  Процедура SPIFE IgG IEF-20, Pro 32 Rev 5 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 3000 ImmunoFix, Pro 199 Rev 6 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE ImmunoFix-15, Pro 200 Rev 7 (Текст) ( Pdf)
  Процедура SPIFE Ultra ImmunoFix, Pro 127 Rev 3 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE Ultra ImmunoFix-15, Pro 126 Rev 3 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE IFE Pentavalent Kit, Pro 131 Rev 1 (Текст) (Pdf)
  SPIFE LD Isoenzyme Procedure, Pro 89 Rev 2 (Text) (Pdf)
  SPIFE Lipoprotein Procedure, Pro 108 Rev 4 (Text) (Pdf)
  SPIFE SPE Procedure, Pro 128 Rev 2 (Text) (Pdf)
  SPIFE Sp lit Beta SPE (20, 40, 60) Процедура, Pro 137 Ред. 4 (Текст) (Pdf)
  SPIFE Split Beta SPE (80, 100) Процедура, Pro 138 Ред. 4 (Текст) (Pdf)
  SPIFE Моча / белок спинномозговой жидкости Процедура, Pro 27 Rev 1 (текст) (Pdf)
  SPIFE SPE Hi Res-20 Procedure, Pro 203 Rev 5 (Text) (Pdf)
  

  SPIFE 3000 с пластиковыми аппликаторами

  Процедура применения кислотного гемоглобина SPIFE 3000 для пластиковых лезвий, Pro 249 Rev 2 (текст) (Pdf)
  Процедура применения изофермента щелочной фосфатазы (ЩФ) SPIFE 3000 для пластиковых лезвий, Pro 251 Rev 1 (текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 3000 Vis для определения холестерина Пластиковые лезвия, Pro 252 Rev 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 3000 CK Vis с изоферментом, Pro 253 Rev 1 (Текст) (PdF)
  Процедура SPIFE 3000 Immunofix для аппликаторов пластмасс, Pro 255 Rev 2 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 3000 ImmunoFix-15 для пластиковых аппликаторов, Pro 256 Rev 2 (текст) (Pdf)
  SPIFE 3000 Ultra ImmunoFix — 6/9 Процедура для пластиковых аппликаторов, Pro 263 Rev 1 (текст) (Pdf)
  SPIFE 3000 Ultra ImmunoFix -15 Процедура для пластиковых аппликаторов, Pro 264 Ред. 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура изофермента SPIFE 3000 LD для пластиковых лезвий, Pro.258 Ред. 1 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 3000 для липопротеинов для пластиковых лезвий, Pro 257 Rev 2 (Текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 3000 SPE для пластиковых аппликаторов, Pro 260 Ред. 2 (Текст) (Pdf)
  SPIFE 3000 Процедура Split Beta SPE — 20, 40, 60 для аппликаторов пластмасс, Pro 261 Rev 2 (текст) (Pdf)
  SPIFE 3000 Split Beta SPE — 80, 100 Процедура для аппликаторов пластмасс, Pro 262 Rev 2 (текст) (Pdf)
  SPIFE 3000 SPE Hi Res-20 Процедура для аппликаторов пластмасс, Pro 259 Ред. 2 (Текст) (Pdf)
  

  QuickGel для SPIFE 3000 / QuickGel Chamber

  QuickGel Acid Hemoglobin Procedure, Pro 191 Rev 8 (Text) (Pdf)
  QuickGel Alkaline Hemoglobin Procedure, Pro 171 Rev 9 (Text) (Pdf)
  QuickGel Cholesterol Procedure, Pro 49 Rev 4 (Text) (Pdf)
  QuickGel CK Vis Isoenzyme Procedure, Pro 134 Rev 4 (Text) (Pdf)
  QuickGel ImmunoFix Procedure, Pro 123 Rev 4 (Text) (Pdf)
  QuickGel LD Isoenzyme Procedure, Pro 77 Rev 3 (Text) (Pdf)
  QuickGel Lipoprotein Procedure, Pro 179 Rev 4 (Текст) (Pdf)
  Процедура QuickGel SPE, Pro 140 Rev 4 (Текст) (Pdf)
  Процедура QuickGel Split Beta SPE, Pro 139 Rev 3 (Текст) (Pdf)
  Комплект аппликатора для лезвий QuickGel-18 / 20 Процедура, Pro 224 Ред. 4 (Текст) (Pdf)
  

  SPIFE 4000

  Процедура определения кислотного гемоглобина SPIFE 4000, Pro 212 Rev 4 (текст) (Pdf)
  Процедура определения щелочного гемоглобина SPIFE 4000, Pro 217 Rev 5 (текст) (Pdf)
  Процедура SPIFE 4000 ImmunoFix, Pro 201 Rev 6 (текст) (Pdf)
  SPIFE 4000 Split Beta SPE Procedure, Pro 18 Rev 8 (Text) (Pdf)
  

  TITAN GEL Agarose Assays

  TITAN GEL Щелочная фосфатаза (HR) Процедура, Pro 124 Rev 2 (Pdf)
  TITAN GEL Процедура с высоким разрешением протеина, Pro 52 Rev 9 (Текст) (Pdf)
  TITAN GEL Процедура иммуноэлектрофореза, Pro 76 Rev 6 (Текст) (Pdf )
  Процедура TITAN GEL ImmunoFix, Pro 75 Rev 12 (Pdf)
  Процедура TITAN GEL IFE-Plus, Pro 109 Rev 7 (Pdf)
  Процедура с использованием сывороточного геля TITAN GEL, Pro 51 Rev 7 (Pdf)
  

  Целлюлоза Titan III Ацетатные анализы

  Процедура изофермента щелочной фосфатазы, Pro 5 Rev 6 (Text) (Pdf)
  Процедура электрофореза гемоглобина, Pro 15 Rev 7 (Text) (Pdf)
  Процедура электрофореза липопротеинов, Pro 3 Rev 8 (Text) (Pdf)
  Электрофорез сывороточного белка Процедура, Pro 1 Rev 6 (Текст) (Pdf)
  

  Анализ агарозы Titan IV

  Методика электрофореза цитратного гемоглобина Titan IV, Pro 17 Rev 6 (Текст) (Pdf)
  Процедура иммуноэлектрофореза Titan IV, Pro 22 Rev 4 (Текст) (Pdf)
  

  Методы электрофореза белков | Bio-Rad Laboratories

  Blue Native PAGE (BN-PAGE)
  BN-PAGE используется для разделения и характеристики больших белковых комплексов в их природных и активных формах.Первоначально описанный Schagger и von Jagow (1987), этот метод основан на солюбилизации белковых комплексов мягкими нейтральными детергентами и связывании отрицательно заряженного красителя Coomassie (Brilliant) Blue G-250 с их поверхностями. Это обеспечивает высокое отношение заряда к массе, которое позволяет белковым комплексам мигрировать к аноду, как это происходит в SDS-PAGE. Кумасси синий, однако, не денатурирует и не диссоциирует белковые комплексы, как это делает SDS.

  Зимограмма PAGE
  Зимограмма PAGE используется для обнаружения и характеристики коллагеназ и других протеаз в геле.Гели отливают из желатина или казеина, который действует как субстрат для ферментов, которые выделяются в геле в невосстанавливающих условиях. Белки обрабатывают денатурирующим SDS для разделения по молекулярной массе. После ренатурирования ферментов и последующего расщепления субстрата гели зимограммы окрашивают красителем Кумасси (бриллиантовый) синий R-250, который окрашивает субстрат, оставляя прозрачные области вокруг активных протеаз.

  Изоэлектрическая фокусировка (IEF)
  IEF сочетает использование электрического поля с градиентом pH для разделения белков в соответствии с их изоэлектрической точкой (pI).Когда белок движется через градиент pH, его чистый заряд изменяется в зависимости от pH, с которым он сталкивается. Под действием электрического поля белок в градиенте pH перемещается в позицию, пока его чистый заряд не станет нулевым (подробнее см. В разделе «Двумерный электрофорез»).

  Двумерный электрофорез
  Последовательное применение различных методов электрофореза дает многомерное разделение. Наиболее распространенный двухмерный метод (O’Farrell, 1975) включает образцы белков сначала для денатурирования IEF на геле для пробирок или гелевой полоски IPG (для разделения по pI), а затем — для SDS-PAGE для дальнейшего разделения по молекулярной массе.Двухмерные методы с высоким разрешением позволяют разделить тысячи полипептидов в одном пластинчатом геле.