Флюорограмма при беременности: Особенности проведения флюорографии во время беременности

При постановке на диспансерный учёт по беременности у всех женщин берут анализ крови на группу и резус принадлежность. При Rh (-) отрицательной крови у беременной женщины, обязательно необходимо сделать анализ крови на группу и резус-принадлежность мужу, так как при положительном резусе у мужчины и отрицательном у женщины может возникнуть резус-конфликт матери и плода. Вследствие этого за беременность берется трижды анализ крови на АТ: при постановке на учёт, во втором триместре (18-20 нед), в 28 недель. При Rh (-) отрицательной крови без наличия АТ в 28-30 недель вводится Антирезусный иммуноглобулин человека для профилактики резус-конфликта, за счёт средств самой женщины в амбулаторных условиях. Также после родов, в течение 72 часов, такой препарат будет вводится повторно, при наличии показаний, за счёт средств медицинского учереждения.

Постановка на диспансерный учёт по беременности.

При первых подозрениях на беременность, женщине необходимо как можно скорее записаться на приём к врачу акушеру-гинекологу для уточнения диагноза и срока беременности. После первичного осмотра врач сделает заключение, расскажет о том, как протекает физиологическая беременность, как правильно питаться, какие «сигналы тревоги» могут возникнуть и как себя вести при этом, и конечно же назначит дату постановки на учёт.

Встать на диспансерный учёт по беременности нужно до 12 недель (ранняя явка). Это необходимо для того, чтобы вовремя провести 1 УЗИ скрининг и подобрать правильную дальнейшую тактику ведения беременности.

При постановке на учёт при себе необходимо иметь:

• Документы и их ксерокопии в 2х экземплярах! (паспорт 1 страница и прописка, полис, СНИЛС, прикрепление к медицинскому учереждению)
• Простынь, бахилы или носочки (для гинекологического осмотра)
• Флюорографию мужа, и всех членов семьи старше 15 лет, с которыми проживает беременная женщина (ксерокопия в 2х экземплярах!)
• Анализы крови мужа на Сифилис и ВИЧ (ксерокопия результатов в 2х экземплярах!)
• Флюорография женщины ДО БЕРЕМЕННОСТИ, при наличии (ксерокопии в 2х экземплярах!). Если таковой нет, ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ ФЛЮОРОГРАФИЮ НЕ ПРОВОДЯТ!!!
• А также медицинские заключения по ранее выявленной соматической или гинекологической патологии, если такая имеется (ксерокопии заключений в 2х экземплярах!). Это поможет врачу в планировании дальнейшего ведения беременности.

В дату постановки на учёт необходимо сначала обратится в регистратуру для проверки документов и выдачи Карты по беременности, затем нужно пройти в кабинет доктора к назначенному времени.

Для удобства приёма беременных женщин и быстроты работы медицинских сотрудников важно добросовестно отнестись и выполнить все вышеперечисленные пункты!

Внешняя маркировка гликопротеинов из микроворсинок плаценты человека в первом триместре

Гликопротеины щеточной каймы плаценты человека в первом триместре были исследованы с использованием двух методов внешней маркировки: (1) последовательное переваривание нейраминидазой и галактозоксидазой с последующим восстановлением NaB3h5, который 3H-метит концевые остатки галактозы и галактозамина; и (2) последовательная обработка периодатом и NaB3h5, который 3H-метит концевые остатки сиаловой кислоты.Процедуры маркировки проводились на неповрежденной ткани, чтобы результаты более точно соответствовали топографии щеточной каймы in vivo. Выделяли микроворсинки, подвергали электрофорезу в додецилсульфате натрия / полиакриламидном геле и определяли [3H] гликопротеины с помощью флюорографии. Сканирование денситометром флюорограмм [3H] -галактопротеинов показало, что в восстанавливающих условиях 90% связанной с белком радиоактивности было включено в два гликопротеина. Основной [3H] -галактопротеин ранних микроворсинок плаценты имел расчетную молекулярную массу 92 кДа (десиалилированный) и мигрировал в виде диффузной полосы.Минорный гликопротеин 180 кДа был помечен менее последовательно. В отсутствие бета-меркаптоэтанола изменения кажущейся молекулярной массы любого компонента не обнаружено, что позволяет предположить, что компонент 180 кДа не был димером гликопротеина 92 кДа. Оставшиеся 10% радиоактивности были равномерно распределены между несколькими второстепенными компонентами мембраны. Сканирование денситометром флюорограмм [3H] сиалопротеинов показало, что либо в восстанавливающих, либо в невосстанавливающих условиях 90% 3H предпочтительно включается в область 92-110 кДа геля.Хотя четких полос не было видно, область с более высокой молекулярной массой в этой области всегда была наиболее сильно помечена. Минорный гликопротеин 180 кДа также был помечен 3H. Структура гликопротеинов щеточной каймы [3H] из плаценты первого триместра заметно отличалась от структуры микроворсинок терминальной плаценты и плазматических мембран фибробластов плаценты, которые были помечены 3H с помощью идентичных методов внешней маркировки. Эти результаты показывают, что: (1) гликопротеиновые детерминанты топографии щеточной каймы меняются во время беременности; (2) внутри плаценты основная детерминанта 92 кДа (десиалилированная), которая ранее не описывалась, является уникальной для трофобластических клеток.

% PDF-1.3 % 453 0 объект > эндобдж xref 453 91 0000000016 00000 н. 0000002171 00000 н. 0000002274 00000 н. 0000002778 00000 н. 0000002992 00000 н. 0000003488 00000 н. 0000003592 00000 н. 0000003864 00000 н. 0000004968 00000 н. 0000004990 00000 н. 0000005308 00000 п. 0000005329 00000 н. 0000005431 00000 н. 0000005454 00000 н. 0000007351 00000 п. 0000007374 00000 н. 0000009169 00000 п. 0000009192 00000 н. 0000011092 00000 п. 0000011115 00000 п. 0000013031 00000 н. 0000013300 00000 п. 0000013584 00000 п. 0000013607 00000 п. 0000015680 00000 п. 0000015701 00000 п. 0000015722 00000 п. 0000015745 00000 п. 0000017632 00000 п. 0000017655 00000 п. 0000019515 00000 п. 0000019538 00000 п. 0000021368 00000 п. 0000021390 00000 н. 0000022569 00000 п. 0000022590 00000 п. 0000022882 00000 п. 0000022905 00000 п. 0000024450 00000 п. 0000024473 00000 п. 0000026878 00000 п. 0000026900 00000 п. 0000027809 00000 п. 0000027832 00000 н. 0000030182 00000 п. 0000030205 00000 п. 0000031475 00000 п. 0000031498 00000 п. 0000037136 00000 п. 0000037159 00000 п. 0000041856 00000 п. 0000041879 00000 п. 0000046736 00000 п. 0000046759 00000 п. 0000051714 00000 п. 0000051737 00000 п. 0000056859 00000 п. 0000056882 00000 п. 0000061548 00000 п. 0000061571 00000 п. 0000067006 00000 п. 0000067029 00000 п. 0000072566 00000 п. 0000072589 00000 п. 0000077291 00000 п. 0000077314 00000 п. 0000081355 00000 п. 0000081378 00000 п. 0000086966 00000 п. 0000086989 00000 п. 0000091073 00000 п. 0000091096 00000 п. 0000096081 00000 п. 0000096104 00000 п. 0000102089 00000 н. 0000102112 00000 н. 0000108167 00000 н. 0000108190 00000 п. 0000112800 00000 н. 0000112823 00000 н. 0000119127 00000 н. 0000119150 00000 н. 0000126003 00000 н. 0000126026 00000 н. 0000132395 00000 н. 0000132418 00000 н. 0000138337 00000 н. 0000138360 00000 н. 0000141907 00000 н. 0000002338 00000 п. 0000002756 00000 н. трейлер ] >> startxref 0 %% EOF 454 0 объект > эндобдж 455 0 объект > эндобдж 542 0 объект > транслировать Hb«e`Tb`g«f @

Frontiers | Вакцинация против желтой лихорадки на модели мышей связана с непрерывной беременностью и жизнеспособными новорожденными, за исключением случаев, когда она вводится в период имплантации

Введение

Желтая лихорадка (ЖЛ) — это острая вирусная инфекция, связанная с гепатитом, желтухой, кровотечением и почечной недостаточностью, и она может прогрессировать до смерти (Monath, 2008; Staples and Monath, 2011).Острый фебрильный синдром и геморрагические явления являются наиболее яркими проявлениями этого заболевания. Вакцинация и стратегические программы борьбы с основными переносчиками инфекции — гематофагами из родов Aedes, Haemogogos и Sabethes — были успешно реализованы во многих странах, даже несмотря на то, что число инфицированных во всем мире увеличилось за последние два десятилетия ( Monath, 2013; Monath, Vasconcelos, 2015). Крупные вспышки были зарегистрированы в Африке, а также в Южной и Центральной Америке, главным образом в лесных районах, зараженных переносчиками инфекции (Staples and Monath, 2011).

В Бразилии вспышек YF в городах не происходило с 1940-х годов, когда был ликвидирован городской цикл передачи. Однако в 1997 году вирусные инфекции YF были обнаружены в Северной и Центральной Бразилии, а новая вспышка была зарегистрирована в 2008 году в южных и юго-восточных регионах страны (Monath and Vasconcelos, 2015; Wagoner et al., 2018). В 2017 году вирус YF (YFV) был обнаружен у приматов, кроме человека, а случаи заболевания людей были зарегистрированы в местах, где охват вакцинацией был низким (Leal et al., 2016; Fernandes et al., 2017), ситуация, возможно, усугублялась нерешительностью общества в отношении вакцин.

YF представляют собой одноцепочечные РНК-вирусы семейства Flaviviridae. Прямой цитопатический эффект вируса и мощный иммунный ответ хозяина связаны с секрецией TGF-b, TNF-a и IFN-g, которые, как полагают, играют роль в проявлениях и тяжести заболевания (Quaresma et al. ., 2006a, b, 2013; Woodson et al., 2011; Engelmann et al., 2014). Транскриптомный анализ висцеротропного YF на модели макака-резус также показал, что инфекция YF коррелирует с изменениями в экспрессии генов цитокинов до появления клинических симптомов, предполагая, что эти иммунные факторы (цитокины) могут влиять на исход заболевания (Engelmann et al., 2014). Результаты исследований in vitro и показали, что воздействие инфекции на эндотелиальные клетки также может вносить вклад в патогенез YF (Khaiboullina et al., 2005; Quaresma et al., 2006a). Инокуляция флавивирусов обезьянам указывает на то, что первоначальным местом репликации является место прививки в коже, за которым следуют лимфатические узлы, где происходит дополнительная репликация (Marchette et al., 1973; Monath and Barrett, 2003; Dean et al., 2005). . Вирус попадает в кровоток через лимфатическую систему и распространяется на основные органы, такие как печень (Monath and Vasconcelos, 2015).В печени вирус поражает клетки Купфера и гепатоциты, вызывая тяжелый некроз (Monath and Barrett, 2003).

Вакцинный вирус YF представляет собой живой аттенуированный вирус, который получают путем культивирования вируса штамма 17D в живых куриных эмбрионах, и он может индуцировать нейтрализующие антитела и ответы Т-лимфоцитов. Вакцина отличается от YFV потерей висцеротропизма, несмотря на ее репликативную активность в культуре клеток, и заменой 20 аминокислот в белке оболочки (Lee and Lobigs, 2008; Monath et al., 2013). У обезьян вакцина YF 17D вызывает временную низкую виремию (Monath and Barrett, 2003), сопровождаемую врожденными иммунными ответами с детектируемыми уровнями цитокинов и передачей сигналов, опосредованной толл-подобными рецепторами (Monath and Vasconcelos, 2015). Нейтрализующие антитела являются основными медиаторами защитного иммунитета против флавивирусов (Monath et al., 2013).

После однократного введения вакцины YF 17D 80–90% людей становятся серопозитивными к 10-му дню (Monath and Barrett, 2003).Небольшое количество побочных эффектов было связано с вакцинацией людей и обезьян, от тяжелого энцефалита и печеночной недостаточности до неврологических симптомов доброкачественного прогноза (Monath and Barrett, 2003; Martins et al., 2015).

У беременных Nishioka et al. (1998) обнаружили, что относительный риск самопроизвольных абортов после вакцинации составляет 2,29. В другом исследовании, проведенном на женщинах, которые случайно получили вакцину против YF во время беременности, сообщалось о показателях абортов, мертворождений и пороков развития, аналогичных показателям населения в целом (Nasidi et al., 1993; Роберт и др., 1999; Сузано и др., 2006; D’Acremont et al., 2008). Тем не менее, из-за теоретического риска передачи инфекции от матери к плоду, связанной с восприимчивостью печени и нейронов плода к вирусу YF 17D, существует общая рекомендация избегать введения вакцины во время беременности, за исключением случаев, когда это оправдано эпидемиологически (Hagmann et al., 2017). Однако отсутствие вакцинации во время беременности представляет собой риск для матери и плода, тем самым повышая риск заражения местных комаров.Поэтому крайне важно распространять знания и осведомленность о гестационной вакцинации.

Небольшое количество вирусов передается от матери к плоду, что свидетельствует об эффективности гемохориального барьера против этих инфекций (Marinho et al., 2017). Однако механизмы, с помощью которых вирусы преодолевают плацентарный барьер, все еще не определены. Недавние исследования показывают, что с этой эффективностью могут быть связаны материнский иммунитет, срок беременности, коинфекции и многие другие факторы (Marinho et al., 2017).

В этом исследовании мы использовали модель на мышах для анализа эффекта вакцинации против YF во время беременности и для определения потенциально чувствительных фаз, которые могут поставить под угрозу здоровье эмбриона / плода. Это исследование рассматривало показатели рождаемости / смертности, а также морфологию и локализацию вируса YF 17D в плодах, плаценте и тканях матери после вакцинации с помощью иммуногистохимических реакций и полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Материалы и методы

Животные

Взрослых самок мышей (мышей CD-1, возраст 3 месяца) помещали в клетки на ночь с самцами (1: 1), и на следующее утро было подтверждено успешное спаривание.Наличие вагинальной пробки указывало на 0,5 дня беременности (gd). Все процедуры по уходу за животными и экспериментальные процедуры проводились в соответствии с Бразильским научным сообществом лабораторных животных (COBEA) и были одобрены Комитетом по этике исследований на животных (CEEA) Института биомедицинских наук Университета Сан-Паулу, Бразилия.

Вакцинация

Протокол вакцинации проводился в Отделении клеточной биологии и биологии развития Института биомедицинских наук Университета Сан-Паулу под контролем Департамента иммунизации Центра эпидемиологического надзора штата Сан-Паулу.Вакцина против YF (17DD, части 00PVFA028Z; 066VFA061Z; и 082VFB006Z) была получена от Фонда Освальдо Круза (Bio-Manguinhos, Рио-де-Жанейро, Бразилия). Вакцину восстанавливали 5 мл физиологического раствора и вводили подкожно в дозе 2,0 log ₁₀ БОЕ в конечном объеме 0,1 мл. В контрольной группе вакцину заменили стерильным физиологическим раствором (PBS, Gibco BRL, Grand Island, NY, США).

Экспериментальный образец

Эксперименты были разделены на два этапа.На первом этапе вакцинация проводилась на разных сроках беременности (0,5, 5,5 и 11,5 дней беременности [gd]) для оценки гестационных параметров ( n = 5–10 беременных самок / экспериментальная или контрольная группа). 0,5 день беременности — это период, когда зигота находится в просвете маточной трубы; 5.5 день беременности представляет собой начало имплантации, когда гигантские клетки трофобласта, окружающие бластоцисту, вступают в прямой контакт с материнской кровью; и день 11.5 беременности — обычное время для созревания плаценты (Adamson et al., 2002; Cross, 2005; Watson and Cross, 2005; Hu and Cross, 2009; Croy et al., 2014).

На втором этапе иммунолокализация вирусного антигена и сигналы вирусной активности были проанализированы в периоды, когда вакцинация вызвала соответствующие изменения (gd5.5, n = 15 беременных женщин / экспериментальные группы и n = 10 / контрольные группы).

Сбор образцов для оценки гестации

Вакцинированных и контрольных животных анестезировали гидрохлоридом ксилазина (Rompun 2% ^® , Байер, Сан-Паулу, Бразилия) и кетамином (1: 1, об. / Об., Кеталар, Байер, Сан-Паулу, Бразилия) на gd18.5. Рога матки препарировали под стереоскопическим микроскопом и обнажали места имплантации плодов и их плаценты. Плоды были подвергнуты эвтаназии в камере CO ₂ . Подсчитывали и взвешивали плаценты, резорбцию, а также живые и мертвые плоды. Общее количество участков имплантации и ранней реабсорбции эмбрионов оценивали путем инкубации рогов матки в 10% сульфиде аммония в течение 10 минут после удаления плодов, плаценты и поздней резорбции (Салевский, 1964).

Индекс рождаемости (BI) и коэффициент смертности (MR) были рассчитаны соответственно следующим образом:

BI = Общее количество мест имплантации мертворожденных и резорбций Общее количество мест имплантации

MR = Общее количество участков имплантации живых плодов Общее число имплантационных мест × 100

Результаты были выражены как среднее значение ± стандартное отклонение, и тест Стьюдента t использовался для определения значимых различий по сравнению с возрастными контрольными группами.Уровень вероятности менее 5% считался значимым. Статистический анализ проводился с помощью программы Statistical Package for Social Science for Windows.

Сбор и обработка проб для морфологического анализа

Под глубоким наркозом были получены фрагменты материнской печени и рогов матки. Затем вскрывали плаценту, плод (живые плоды подвергали эвтаназии путем ингаляции CO ₂ ) и материал, полученный в результате резорбции. Ткани фиксировали в 10% забуференном формалине и обычно обрабатывали для заделки в Histosec ^® (Merck KGaA, Дармштадт, Германия).Срезы либо окрашивали гематоксилином и эозином, либо обрабатывали для иммунореакции и анализа световой микроскопии.

Срезы материнской печени, плаценты и плода контрольных женщин ( n = 5) и вакцинированных матерей с живыми ( n = 5) и мертвыми (мертворожденные, n = 5) плодами, полученными от разных матерей, были оценивается с помощью иммуногистохимических (IH) анализов. По крайней мере, три среза каждой плаценты (три плаценты на животное) и материнской печени и плода были получены от каждого экспериментального животного для анализа.Депарафинизированные и гидратированные срезы инкубировали в растворе лимонной кислоты (10 мМ, pH 6,0) в течение 3 минут при 60 ° C, а затем блокировали в течение 15 минут в 3% перекиси водорода в дистиллированной воде. Срезы инкубировали в течение 1 ч в M.O.M. реагент, блокирующий мышиный IgG (Vector Lab, Burlingame, CA, США). Затем образцы иммуноокрашивали, используя поликлональные мышиные антитела против вируса YF (Отдел медицинской биологии, Отдел вирусологии, Институт Адольфо Лутца, Сан-Паулу, Бразилия), разведенные в соотношении 1: 2000 в TBS, содержащем 1% бычьего сывороточного альбумина, в течение 30 минут. мин при 37 ° C, затем 18 ч при 4 ° C.Меченый полимер-HRP антимышиный (EnVision + System HRP [DAB], Dako Cytomation) использовали в качестве вторичного антитела в течение 1 часа при комнатной температуре. Развитие окраски получали путем инкубации с раствором субстрата-хромогена DAB (0,05% 3,3′-диаминобензидин в перекиси водорода, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, United Ststes) в течение 5 мин. Срезы контрастировали гематоксилином Майера и исследовали с помощью светового микроскопа Axioskop 2 (Carl Zeiss, Оберкохен, Германия). Изображения были сняты с помощью Axio Vision 4.7 (Carl Zeiss, Оберкохен, Германия). Отрицательный контроль осуществляли путем исключения первичного антитела и / или путем замены этого антитела неиммунной сывороткой. Чувствительность реакции проверяли с использованием иммунореактивных образцов печени пациента с диагнозом YF, у которого была известная экспрессия вирусного антигена (положительный контроль).

Обнаружение вирусной РНК с помощью ОТ-ПЦР

фрагментов гена белка оболочки вируса YF были обнаружены с помощью ПЦР в материнской печени, плаценте, мозге плода и печени живых плодов и мертворожденных вакцинированных матерей на gd5.5 и в плаценте и печени матерей, вакцинированных gd0.5 и 11.5. Положительные контрольные реакции проводили с использованием образцов вакцины YF. Тотальную РНК выделяли с помощью TRIzol (Invitrogen ^TM , Карлсбад, Калифорния, США) и снова суспендировали в стерильной дистиллированной воде согласно Chomizynski и Sacchi (1987). Все реагенты были приобретены у Sigma Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США), если не указано иное. Концентрацию и чистоту РНК определяли спектрофотометрическим измерением оптической плотности при 260 нм, а чистоту определяли при соотношении А260 / А280.Целостность РНК проверяли с помощью электрофореза в 1% агарозном геле с 0,4 моль / л трис-ацетата и 0,001 моль / л буфера EDTA. Вирусная РНК была преобразована в кДНК с использованием 5,0 мкг РНК, 5,0 мкл специфического антисмыслового праймера (5′-GCT TTT CCA TAC CCA ATG AA-3 ‘(MG922934.1), 2,0 мкл смеси dNTPs, 0,75 мкл обратной транскриптазы M-MLV (Invitrogen ^TM ), 6,0 мкл 5х реакционного буфера и 3,0 мкл DTT 0,1 М. Смесь инкубировали при 37 ° C в течение 90 минут и при 95 ° C в течение 5 минут для инактивации обратной транскриптазы.Вирусную кДНК (6,0 мкл) амплифицировали с помощью ПЦР с использованием 2,5 мкл 10 × буфера для ПЦР (Biotools B&M Labs SA, Мадрид, Испания), 2,0 мкл MgCl ₂ (50 мМ), 1,0 мкл смеси dNTP, 0,5 мкл ДМСО. 4%, 0,75 мкл ДНК-полимеразы (1 ед. / Мкл, Biotools B&M Labs SA, Мадрид, Испания) и 5,0 мкл (10 пмоль / мкл) каждого из прямого и обратного праймеров ( 1 : 5′-TAC CCT GGA GCA AGA CAA GT-3 ‘; 2 : 5′-GCT TTT CCA TAC CCA ATG AA-3′). ПЦР выполняли в Bio-Rad Gene Cycler ^TM (Bio-Rad Laboratories, Портленд, Мэн, США).Условия цикла включали денатурацию при 94 ° C в течение 5 минут, 35 циклов ПЦР при 94 ° C в течение 1 минуты, 58 ° C в течение 2 минут, 72 ° C в течение 3 минут и последний этап для окончательного удлинения при 72 ° C в течение 10 минут. мин в термоциклере. ПЦР выполняли с использованием продуктов обратной транскрипции из РНК вакцины в качестве матрицы. Продукты ПЦР анализировали с помощью электрофореза в 1% агарозном геле с использованием маркера молекулярной массы ДНК (100 пар оснований, DNA Ladder, Ludwig Biotec, Nova Alvorada, Brazil) в качестве ссылки. Гель подвергали воздействию экрана молекулярной визуализации (G: Box Chemil-R, Syngene, Frederick, MD, США) для компьютерной документации геля (программа Scion image, Scion Corp., Фредерик, Мэриленд, США). Идентичность продуктов, амплифицированных 482 п.о., была подтверждена анализом последовательности (автоматический анализ последовательности, MegaBACE 1000, GE Healthcare, Бакингемшир, Великобритания) в Центре исследований генома человека при Университете Сан-Паулу (Бразилия). Флюорограммы анализировали с помощью программы Cimarron 3.12 base-caller. Поиск в базе данных последовательностей был выполнен с использованием сетевой службы BLAST Национального центра биотехнологической информации.

Результаты

Вакцинация от gd0.5 и 11,5 не повлияли на среднее количество мест имплантации и резорбцию плода на беременную женщину по сравнению с контролем (таблица 1). В группе, получившей вакцинацию на gd5.5, среднее количество дегенерированных плодов и мертворожденных, а также количество потерь эмбриона / плода значительно увеличились (с 0,13 в контрольной группе до 1,37 в вакцинированной группе, p = 0,01; и с 0,38). в контроле до 3,5 у вакцинированных животных, p = 0,002, соответственно), что приводит к повышению уровня смертности (с 5.От 1% в контрольной группе до 33,1% в вакцинированной группе, p = 0,001) по сравнению с фиктивными контролями, как показано в Таблице 1.

Таблица 1. Влияние вакцинации против желтой лихорадки, введенной в 0,5, 5,5 и 11,5 дни беременности, на параметры гестации.

Прибавка в весе плода была значительно ниже только при введении вакцины беременным животным на gd5.5 ( p = 0,004; Таблица 2). Масса плаценты существенно не изменилась ни в одной вакцинированной группе по сравнению с контрольной группой.Эти данные указывают на предрасположенность к вакцинации против YF во время беременности, оправдывая последующие экспериментальные процедуры только на 5,5-й день беременности.

Таблица 2. Влияние вакцинации против желтой лихорадки, введенной в 0,5, 5,5 или 11,5 дней беременности, на вес плаценты и плода.

Плоды макроскопически были разделены на живые плоды, мертворожденные (отсутствие сердцебиения, но без видимой дегенерации и, следовательно, считающиеся поздно умершими плодами), рано умершие плоды (с явной задержкой развития и дегенеративными сигналами) и постимплантационные резорбции ( место имплантации без видимых структур плода) (Рисунок 1).Последующие анализы проводились на живых плодах и мертворожденных.

Рис. 1. Макроскопические особенности плода на gd18.5. Образцы от вакцинированных беременных мышей демонстрируют различное внутриутробное развитие, как показано на примере (A), явно нормальных (живых и мертворожденных) плодов, (B) ранних мертвых плодов и (C, D) резорбции (черные и белые стрелки. ).

В материнской печени, а также в печени живых плодов вакцинированных самок на gd5.5, вирусный антиген иммунолокализовался редко (рисунки 2A, B, a, b). Для реакций IH иммунная метка не была обнаружена в невакцинированной группе (не показана) в отрицательном контроле, что было выполнено путем исключения первичного антитела (на фиг. 2G – I отсутствует ). Биопсии печени человека с диагнозом YF использовались в качестве положительного контроля для реакций IH (рис. 2J).

Рисунок 2. Иммунолокализация антигена желтой лихорадки (YF) после вакцинации на gd 5.5. (A – C) В печени матери и плода иммунореактивные области встречаются редко (A, a) . Печень одной вакцинированной беременной женщины (Б, б) . Печень живого плода (В, в) . Печень мертворожденного. Реакционная способность обозначена коричневым цветом (стрелки) (D – F) . Иммунолокализация антигена YF у мертворожденных показывает реактивность к вирусной вакцине в нервных клетках периферической области развивающегося пищеварительного тракта (D), и в нервах (E), , окружающих один артериальный сосуд (v).Сильная реактивность также наблюдается в мозге (F, f) . Фигуры (G – I) представляют собой отрицательный контроль реакции, в которой первичное антитело было заменено неиммунной сывороткой. На Фигуре (J) показан положительный контроль реакции IH (печень пациента с YF). Штанги в (A) = 150 мкм, в (a, b , E) = 100 мкм, в (B, C, H, I) = 200 мкм, в (c, F) = 60 мкм, в (D) = 350 мкм, в (f) = 50 мкм, в (G) = 600 мкм, в (J) = 75 мкм.

В отличие от живых плодов, реактивность к YFV у мертворожденных была интенсивной и распределялась в клетках нескольких органов (Рисунки 2C – F). Реактивность наблюдалась в печени (Рисунки 2C, c), нервной ткани в развивающемся кишечнике (Рисунок 2D), клетках, окружающих артериальные сосуды (Рисунок 2E), и в мозге плода (Рисунки 2F, f).

Гистологический анализ плаценты контрольных и жизнеспособных плодов вакцинированных животных показал типичные морфологические особенности. У живых плодов иммунореакции выявили присутствие вирусного антигена в клетках трофобласта зоны соединения (гигантские клетки трофобласта, рис. 3A) и клетках спонгиотрофобласта (рис. 3C), и лишь изредка в клетках лабиринтных слоев (рис. 3D). .

Рисунок 3. Иммунолокализация антигена YF после вакцинации на gd5.5. Плаценты живых плодов (A – D) и мертворожденных (E – J) . Реакции имеют коричневатый цвет. Вирусный антиген виден в зоне соединения гигантских клеток трофобласта (A, g), и (C , стрелка) в клетках области спонгиотрофобласта (S). Несколько клеток (D , стрелки) реагировали с антителом против вируса YF (YFV) в лабиринтной области.У мертворожденных иммунореакция в спонгиотрофобласте (S) интенсивна, в гигантских клетках (E, g) , в клетках спонгиотрофобластов (F , стрелка) и в клетках гликогена (G, gl) (H, I) . Реактивность также видна в лабиринте (L, наконечники стрелок). Фигуры (B, J) представляют собой отрицательный контроль реакции. Штанги в (A, D, E) = 120 мкм, в (B) = 100 мкм, в (C, G, J) = 80 мкм, в (F) = 60 мкм, дюйм (H) = 240 мкм, в (I) = 25 мкм.

В целом, плаценты мертворожденных имели общие характеристики по сравнению с плацентами контролируемого возраста от вакцинированных и контрольных живых плодов. Случайные морфологические изменения, обнаруженные в этой группе, включали разброс кластеров гликогеновых клеток в сторону лабиринтной зоны. Вирусный антиген был обнаружен в гигантских клетках трофобласта (рис. 3E), клетках спонгиотрофобластов (рис. 3F) и клетках гликогена (рис. 3G). Реактивность была сильнее в лабиринтной области (рис. 3H, I) в разных типах клеток.Отрицательный контроль IH не показал никакой реакции в этих тканях (Фигуры 3B, J).

Вакцина против YF была также обнаружена с помощью ОТ-ПЦР с использованием пары консенсусных праймеров YFV. Анализ RT-PCR ампликонов, продуцируемых YFV, как показано на фиг. 4A, B, в материнской печени, плаценте, мозге плода и печени у мертворожденных. У живых плодов только следы ампликонов были обнаружены в части образцов (в тканях 2 плодов из 7 проанализированных). Амплификации ДНК не наблюдали ни в отрицательном контроле, ни в образцах после вакцинации на gd0.5 и 11,5 (не показаны). Идентичность YFV была подтверждена секвенированием продуктов ПЦР, полученных из образцов мозга мертворожденных ( n = 3). Последовательность была выровнена со штаммом YFV 17DD-Brazil, и наблюдалась 100% идентичность (фиг. 4C).

Рисунок 4. Экспрессия гена капсидного белка вируса YF (465 п.н.) в материнской печени и тканях жизнеспособных плодов (A) и мертворожденных (B) . Печень матери (мл), плацента (Pl), мозг плода (fB), печень (fL), (Vv) вакцина против вируса YF (положительный контроль).Первая полоса каждого геля соответствует массе ДНК, в которой выделены 500 пар оснований (стрелки). (C) Секвенирование экспериментального продукта ПЦР, полученного из мозга мертворожденных. Обратите внимание на совпадение и 100% идентичность со штаммом вируса желтой лихорадки 17DD-Brazil.

Обсуждение

Мы исследовали эффект вакцинации против YFV на трех разных сроках беременности у мышей и нашли четкие доказательства изменений исходов беременности и инфицирования плода только тогда, когда вакцина вводилась в период имплантации эмбриона (gd 5.5). Вакцинация в этот конкретный день беременности привела к увеличению потерь эмбрионов / плода и задержке роста живых плодов. Вакцинный вирус лишь изредка обнаруживался в печени живых плодов, но постоянно обнаруживался в тканях мертворожденных. Иммунолокализация вакцинного вируса была обнаружена в плаценте как живых плодов, так и мертворожденных, но была более интенсивной в образцах мертворожденных плодов. Присутствие вируса в плаценте и органах плода у мертворожденных указывало на то, что мог произойти вертикальный пассаж вакцинного вируса.Напротив, у живых плодов присутствие вируса только в плаценте предполагает, что взаимодействие матери и плода может играть защитную роль. Однако различия в судьбе особей, принадлежащих к одному помету, до конца не изучены.

Генетический фон каждой особи может быть фактором, который следует учитывать, поскольку линия, используемая здесь, является беспородной мышью. Было высказано предположение, что у людей модуляция восприимчивости к вирусу может происходить в результате генетической изменчивости, особенно в локусах, кодирующих медиаторы врожденного иммунитета (Blake and Garcia-Blanco, 2014).Кроме того, мыши обычно обладают врожденной устойчивостью к вызванной флавивирусом смертности / заболеваемости из-за аутосомно-доминантного аллеля Flvr . При заражении мыши обнаруживают низкие уровни вирусных титров в тканях, что связано с низким уровнем смертности (Nathanson and Brinton, 2007). Хотя это может быть одним из факторов, способствующих этому, есть также свидетельства того, что трансплацентарный перенос флавивируса является случайным процессом (Yuan and Allen, 2011; Björnberg et al., 2014).Стохастические модели были разработаны для объяснения динамики вирусной инфекции / передачи, которая включает случайные переходы между инфекцией, скрытой инфекцией или отсутствием инфекции в клетках, тканях и организмах (Tuckwell and Le Corfec, 1998; Yuan and Allen, 2011; Björnberg et al., 2014).

Ключевой вопрос в этом исследовании — почему изменения произошли только после введения вакцины на gd5.5. Правдоподобным объяснением может быть незрелость клеток, составляющих материнско-плодный барьер на этой стадии беременности.5.5 день беременности знаменует начало процесса имплантации. В это время гигантские клетки трофобласта принимают инвазивный фенотип, тем самым открывая субпросветные капилляры эндометрия и устанавливая первый контакт с материнской кровью (Bevilacqua and Abrahamsohn, 1988, 1989). Этот процесс длится еще несколько дней, пока эмбрион полностью не поселится в тканях матки. Затем плацента запускает процесс созревания, который характеризуется дифференцировкой клеток трофобласта с приобретением защитных, эндокринных, иммунорегуляторных и питательных свойств (Adamson et al., 2002; Крест, 2005; Ху и Кросс, 2009).

Данные предыдущего исследования на людях показали, что вакцинация приводит к виремии со второго по шестой день после введения (Reinhardt et al., 1998). В этом контексте возможно, что в наших экспериментах материнская виремия произошла на стадии незрелости трофобласта вскоре после имплантации. Это может способствовать доступу вируса к эмбриональным тканям, усиливая реакции, которые не обнаруживаются при введении вакцины на более поздних сроках беременности.Таким образом, на gd5.5 и в последующие несколько дней гигантские клетки трофобласта могут быть недостаточно зрелыми или дифференцированными, чтобы действовать как барьер для вирусного пассажа. Исходя из этого, вакцинация на более поздних стадиях беременности (gd11.5) может быть связана с полной плацентарной дифференцировкой и способностью к эффективной активации противовирусных механизмов. Напротив, отсутствие контакта между материнской кровью и эмбрионом на ранних стадиях развития, когда матери были привиты gd0.5, может быть критическим фактором, который предотвратил неблагоприятные исходы для плода в этой группе.В обоих случаях наши результаты за эти периоды согласуются с результатами исследований вакцинации людей.

Несоответствие с данными вакцинации людей, однако, произошло, когда прививка вакцины была проведена специально во время имплантации эмбриона (5,5 день беременности), что привело к ранним и поздним потерям (мертворождения).

Исследования, посвященные оценке вакцинации против YF на ранних стадиях беременности, также показали тенденцию к увеличению вероятности нескольких неблагоприятных событий (выкидыши, преждевременные роды и низкий вес при рождении), когда женщины случайно получили вакцину в рамках программ массовой вакцинации (Tsai, 1993, 2006; Nishioka и другие., 1998). Однако вредное влияние на исход беременности и развитие плода было рассмотрено в рамках ожидаемых популяционных индексов (Nasidi et al., 1993; Robert et al., 1999; Suzano et al., 2006; D’Acremont et al., 2008). . Как упоминалось ранее, одним из возможных объяснений этого несоответствия может быть организация материнско-плодного барьера на ранних стадиях, поскольку наличие видоспецифических функциональных и структурных аспектов (Georgiades et al., 2002) может определять переход вируса к эмбриональный организм грызунов, но не человека.Кроме того, расхождение отчасти может быть связано с невозможностью определить, на какой стадии беременности была введена вакцина. Потери при имплантации у людей трудно обнаружить, и, следовательно, о них обычно не сообщают и не учитывают для статистического анализа, представленного в литературе.

Частота задержки роста и мертворождений у матерей, вакцинированных gd5.5, может быть основана на нескольких механизмах, отдельно или совместно. Доступ вирусов и их ложение в развивающуюся плаценту мыши могут быть основным фактором.Хотя морфологически мы не наблюдали каких-либо повреждений плаценты или дефектов созревания плаценты, иммунореактивность к вакцинному вирусу в зонах спонгиотрофобласта и лабиринта (также обнаруживаемая с помощью ПЦР) может представлять ранний доступ (gd5.5) и дальнейшую колонизацию, ведущую к разной степени. нарушения функции плаценты.

Иммунолокализация вируса, дифференцированная от тканей плаценты и плода со случайными реакциями антител (у живых плодов) до областей с высокой реактивностью антител (у мертворожденных), что позволяет предположить, что степень инфицирования плаценты / плода может быть связана со смертью плода.

Другая возможность — нарушение метаболизма плода, когда плацентарный барьер не может предотвратить прохождение вируса. Инфекция YF характеризуется вирусным висцеротропизмом, при котором печень и нервная система могут быть агрессивно инфицированы, как сообщалось у людей, умерших от инфекции после вакцинации (Monath, 2008; Martins et al., 2015; Monath and Vasconcelos, 2015 ). Наши результаты иммунолокализации и ПЦР также выявили присутствие вакцинного вируса и активность в нервных тканях мертворожденных плодов, которые, возможно, способствовали нарушению этой системы и гибели плода как прямой цитопатический эффект.

Иммунная среда плода и матери также может быть важным фактором в определении инфекции плода, когда вакцинация проводилась на gd5.5. Существует хорошо организованная сеть про- и противовоспалительных цитокинов, локально продуцируемых для модуляции сложного процесса имплантации (Dey et al., 2004; Chaouat et al., 2007). С другой стороны, вакцинация против YF также вызывает провоспалительный ответ, где TNF-α, среди других цитокинов, по-видимому, является ключевым фактором (Monath and Vasconcelos, 2015).Это может привести к чрезмерной иммунной реакции с высвобождением провоспалительных цитокинов и других медиаторов врожденной иммунной системы в кровообращение плода, что приводит к таким последствиям, как ранняя гибель эмбрионов и низкий вес при рождении у выживших плодов (Chaouat et al., 2007; Chattopadhyay et al., 2010; Kurtis et al., 2011). Недавние данные также показали, что беременные самки крыс, инфицированные вирусом Зика, демонстрировали устойчивый воспалительный ответ, включая критические цитокины и хемокины, независимо от реакции матери на вирус (Khaiboullina et al., 2019). Аналогичный ответ наблюдается и при инфицировании вирусом Зика беременных макак-резусов (Hirsch et al., 2018). С этой точки зрения, множество иммунных факторов, вызванных вирусными инфекциями, также могло быть причиной гестационных результатов, полученных в этом исследовании, — вопрос, который заслуживает дальнейших исследований.

Это исследование не дает точных ответов на вопрос, почему это не происходит с такой же частотой у людей. Большая хрупкость трофобластического барьера на ранних сроках беременности у мышей также может быть важным фактором.Через 14 дней после вакцинации у людей были обнаружены защитные нейтрализующие антитела (Kohler et al., 2012), которые были переданы эмбриону / плоду на протяжении всего срока беременности человека, ограничивая рост вируса и его пагубные последствия. Однако в этом исследовании короткий гестационный период, связанный с интервалом между вакцинацией и умерщвлением мышей (от gd5,5 до gd18,5), может быть недостаточным для передачи соответствующего защитного IgG в организм плода.

Таким образом, наши результаты показали, что вакцинация мышей не изменяет гестационные параметры при введении на ранних или средних сроках беременности.Неблагоприятные исходы, такие как ограничение роста плода и повышенная смертность, могли наблюдаться только в том случае, если вакцинация проводилась в период имплантации эмбриона. Локализация вирусных частиц в плаценте и плодах указывает на то, что вирус вакцины против YF мог пересечь плацентарный барьер в результате случайного процесса. У живых плодов присутствие вируса было ограниченным или отсутствовало, тогда как у мертворожденных иммунореактивность и вирусная нагрузка были высокими в плаценте и органах плода.Гетерогенность ответов предполагает, что стадия имплантации эмбриона представляет собой окно восприимчивости, в котором вакцинация и связанный с ней иммунный ответ могут влиять на течение беременности.

Заключение

Вирус вакцины против желтой лихорадки преодолевает плацентарный барьер только при введении во время имплантации эмбриона, вызывая задержку роста плода и повышая уровень его смертности.

Заявление о доступности данных

Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике исследований на животных (CEEA) Института биомедицинских наук Университета Сан-Паулу, Бразилия (№ 126/37 book2) — Институт биомедицинских наук — USP.

Авторские взносы

FS и EB написали черновик рукописи. EB и HS разработали исследование. Все авторы, кроме HS, участвовали в сборе данных. Анализ данных был проведен FS и FM, которые ручаются за результаты.

Финансирование

для FM и FC была предоставлена ​​Координацией совершенствования высшего образования (CAPES) и Национальным советом по исследованиям и технологическому развитию (CNPq), соответственно. Фонд поддержки исследований в штате Сан-Паулу (Фапесп) оказал поддержку содержанию животных. Департамент здравоохранения штата Сан-Паулу любезно предоставил вакцины.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Авторы благодарят Розангела Аугусто Оливейра, Хелори Ванни Домингос и Бруна Гальвес за прекрасную техническую помощь, профессора Шарлотту Марианну Харси за помощь с дозами вакцины против YF и Кристину Таками Канамура за щедрый доступ к лабораторным помещениям.

Сноски

Список литературы

Адамсон, С. Л., Лу, Ю., Уайтли, К. Дж., Холмярд, Д., Хембергер, М., Пфаррер, К. и др.(2002). Взаимодействие между клетками трофобласта и кровообращением матери и плода в плаценте мыши. Dev. Биол. 250, 358–373. DOI: 10.1006 / dbio.2002.0773

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Bevilacqua, E., and Abrahamsohn, P.A. (1988). Ультраструктура трансформации гигантских клеток трофобласта на инвазивном этапе имплантации эмбриона мыши. J. Morphol. 198, 341–345.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Bevilacqua, E., и Абрахамсон, П. А. (1989). Инвазия трофобластов при имплантации эмбриона мыши. Arch. Биол. Med. Exp. 22, 107–118.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Бьорнберг, Дж. Э., Бриттон, Т., Броман, Э. И., и Натан, Э. (2014). Стохастическая модель роста вируса в клеточной популяции. J. Applied Prob. 51, 599–612. DOI: 10.1239 / jap / 1409932661

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чаттопадхай, А., Робинсон, Н., Сандху, Дж. К., Финли, Б. Б., Сад, С., и Кришнан, Л. (2010). Salmonella enterica Воспаление плаценты, вызванное сероваром typhimurium, а не бактериальная нагрузка, коррелирует с патологией и смертельным исходом у матери. Заражение. Иммун. 78, 2292–2301. DOI: 10.1128 / IAI.01186-09

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Chomizynski, P., and Sacchi, N. (1987). Одностадийный метод выделения РНК путем хлороформной экстракции кислого тиоцианата гуанидиния и фенола. Анал. Biochem. 162, 156–159. DOI: 10.1006 / abio.1987.9999

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кросс, Дж. К. (2005). Как сделать плаценту: механизмы дифференцировки клеток трофобласта у мышей: обзор. Плацента 26, S3 – S9.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Крой, Б. А., Ямада, А. Т., Де Майо, Ф. Дж., И Адамсон, С. Л. (2014). Руководство по исследованию беременности мышей. Амстердам: Эльзевир.

Google Scholar

D’Acremont, V., Tremblay, S., and Genton, B. (2008). Влияние вакцин, вводимых во время беременности, на потомство женщин, обращающихся в туристическую клинику: продольное исследование. J. Travel. Med. 15, 77–81. DOI: 10.1111 / j.1708-8305.2007.00175.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дин, К. Х., Аларкон, Дж. Б., Уотерстон, А. М., Дрейпер, К., Гиракху, Ф., Монат, Т. П. и др. (2005). Кожная доставка живой аттенуированной химерной флавивирусной вакцины против японского энцефалита (ChimeriVax) -JE) приматам, не являющимся человеком. Хум. Вакцина. 1, 106–111. DOI: 10.4161 / hv.1.3.1797

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дей, С.К., Лим, Х., Дас, С.К., Риз, Дж., Париа, Б.С., Дайкоку, Т. и др. (2004). Молекулярные сигналы к имплантации. Endocr. Ред. 25, 341–373. DOI: 10.1210 / er.2003-0020

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Энгельманн, Ф., Джоссет, Л., Гирке, Т., Парк, Б., и Бэррон, А. (2014). Патофизиологический и транскриптомический анализ висцеротропной желтой лихорадки на модели макаки-резус. PLoS Negl. Троп. Дис. 8: e3295. DOI: 10.1371 / journal.pntd.0003295

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фернандес, Н., Кунья, М., Герра, Дж., Рессио, Р. А., Сиркейра, К. С., Иглезиас, С. Д. А. и др. (2017). Вспышка желтой лихорадки среди нечеловеческих приматов. Эспириту-Санту, Бразилия. Emerg. Заразить. Дис. 23, 2038–2041. DOI: 10.3201 / eid2312.170685

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Георгиадес, П., Фергюсон-Смит, А.С., и Бертон, Дж. Дж. (2002). Сравнительная анатомия развития дефинитивной плаценты мыши и человека. Плацента 23, 3–19. DOI: 10.1053 / plac.2001.0738

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хагманн, С. Х. Ф., Рао, С. Р., Ла Рок, Р. К., Эрскин, С., Джентес, Э. С., Уокер, А. Т. и др. (2017). Характеристики путешествий и медицинское обслуживание перед поездкой беременных или кормящих женщин из США, готовящихся к поездке за границу. Акушерство. Гинеколь. 130, 1357–1365. DOI: 10.1097 / AOG.0000000000002360

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хирш, А. Дж., Робертс, В. Х. Дж., Григсби, П. Л., Хейз, Н., Шабель, М. К., Ван, X. и др. (2018). Инфекция вируса Зика у беременных макак-резус вызывает дисфункцию плаценты и иммунопатологию. Nat. Commun. 9: 263. DOI: 10.1038 / s41467-017-02499-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хайбуллина, С.Ф., Лопес, П., де Карвалью, Т. Г., Реал, А. Л. С. В., Соуза, Д. Г., Коста, В. В. и др. (2019). Иммунный ответ хозяина на ZIKV в модели интравагинальной инфекции у иммунокомпетентных эмбриональных мышей. Вирусы 11: 558. DOI: 10.3390 / v11060558

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хайбуллина С. Ф., Ризванов А. А., Холбрук М. Р. и Джор С. С. (2005). Штаммы вируса желтой лихорадки Asibi и 17D-204 инфицируют эндотелиальные клетки пуповины человека и вызывают новые изменения в экспрессии генов. Вирусология 342, 167–176. DOI: 10.1016 / j.virol.2005.07.035

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Kohler, S., Bethke, N., Böthe, M., Sommerick, S., Frentsch, M., Romagnani, C., et al. (2012). Ранние клеточные признаки защитного иммунитета, вызванного вакцинацией живыми вирусами. Europ. J. Immunol. 42, 2363–2373. DOI: 10.1002 / eji.201142306

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Куртис, Дж.Д., Хигаши, А., Ву, Х. В., Гундоган, Ф., Макдональд, Э. А., Шарма, С. и др. (2011). Японский шистосомоз у матери связан с воспалением матери, плаценты и плода. Заражение. Иммун. 79, 1254–1261. DOI: 10.1128 / IAI.01072-10

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Леал С. Г., Романо А. П., Морено Р. В., Мело К. Б., Васконселос П. Ф. и Кастро М. Б. (2016). Частота гистопатологических изменений у обезьян-ревунов (Alouatta sp.) естественно инфицированы вирусом желтой лихорадки в Бразилии. Rev. Soc. Бюстгальтеры. Med. Троп. 49, 29–33. DOI: 10.1590 / 0037-8682-0363-2015

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, Э., и Лобигс, М. (2008). E Детерминанты домена III белка вакцинного штамма 17D вируса желтой лихорадки усиливают связывание с гликозаминогликанами, препятствуют распространению вируса и ослабляют вирулентность. J. Virol. 82, 6024–6033. DOI: 10.1128 / JVI.02509-07

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Маршетт, Н.Дж., Холстед, С. Б., Фолклер, Р., Стенхаус, А., и Нэш, Д. (1973). Исследования патогенеза инфекции денге у обезьян. 3. Последовательное распространение вируса при первичных и гетерологичных инфекциях. J. Infect. Дис. 128, 23–30. DOI: 10.1093 / infdis / 128.1.23

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мариньо П. С., Кунья А. Дж., Амим Джуниор Дж. И Прата-Барбоса А. (2017). Обзор избранных арбовирусов во время беременности. Matern.Health Neonatol. Перинатол. 3:17. DOI: 10.1186 / s40748-017-0054-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мартинс, Р., Фернандес, М. Л., и Хомма, А. (2015). Серьезные побочные эффекты, связанные с вакциной против желтой лихорадки. Хум. Вакцин. Immunother. 11, 2183–2187. DOI: 10.1080 / 21645515.2015.1022700

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Монат Т. П., Гершман М., Стейплс Э. Дж. И Барретт А.Д. Т. (2013). «Вакцина против желтой лихорадки», в Vaccines , 6-е изд., Ред. С. А. Плоткин, В. А. Оренштейн и П. А. Оффит (Филадельфия, Пенсильвания: Сондерс), 870–896.

Google Scholar

Насиди А., Монат Т. П., Вандерберг Дж., Томори О., Калошер К. Х., Хунртген X. и др. (1993). Вакцинация против желтой лихорадки и беременность: четырехлетнее проспективное исследование. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 87, 337–339. DOI: 10.1016 / 0035-9203 (93) -k

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Натансон, Н., и Бринтон, М.А. (2007). «Восприимчивость хозяина к вирусным заболеваниям», в Вирусный патогенез и иммунитет , 2-е изд., Ред. Н. Натансон, Р. Ахмед, К. А. Бирон, М. Бринтон, Ф. Гонсалес-Скарано, Д. Е. Гриффин и др. (Лондон: Academic Press :), 174–183.

Google Scholar

Нисиока, С., Нуньес-Араужо, Ф. Р., Пирес, В. П., Сильва, Ф. А., и Коста, Х. Л. (1998). Вакцинация против желтой лихорадки во время беременности и самопроизвольного аборта: исследование случай-контроль. Trop. Med.Int. Здравоохранение 3, 29–33. DOI: 10.1046 / j.1365-3156.1998.00164.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Куарежма, Дж. А., Баррос, В. Л., Пальяри, К., Фернандес, Е. Р., Гуэдес, Ф., Такакура, К. Ф. и др. (2006a). Возвращаясь к печени при желтой лихорадке человека: индуцированный вирусом апоптоз гепатоцитов, связанный с TGF-β. TNF-α и активность NK-клеток. Вирусология 345, 22–30. DOI: 10.1016 / j.virol.2005.09.058

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Куарежма, Дж.А., Дуарте, М. И. С., и Васконселос, П. Ф. С. (2006b). Мидзональные поражения при желтой лихорадке: специфическая картина поражения печени, вызванная прямым действием вируса и воспалительной реакцией in situ. Med. Гипотезы 67, 618–621. DOI: 10.1016 / j.mehy.2006.01.060

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Куарежма, Дж. А., Пальяри, К., Медейрос, Д. Б. А., Дуарте, М. И. С. и Васконселос, П. Ф. С. (2013). Иммунитет и иммунный ответ, патология и патологические изменения: прогресс и проблемы в иммунопатологии желтой лихорадки. Rev. Med. Virol. 23, 305–318. DOI: 10.1002 / RMV.1752

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рейнхардт Б., Джасперт Р., Нидриг М., Костнер К. и Лаге-Штер Дж. (1998). Развитие вирусемии и гуморальных и клеточных параметров иммунной активации после вакцинации штаммом вируса желтой лихорадки 17D: модель инфекции флавивируса человека. J. Med. Virol. 56, 159–167. DOI: 10.1002 / (sici) 1096-9071 (199810) 56: 2 <159 :: help-jmv10> 3.0.co; 2-б

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Роберт Э., Виал Т., Шефер К., Арнон Дж. И Реуверс М. (1999). Воздействие вакцины против желтой лихорадки на ранних сроках беременности. Vaccine 17, 283–285. DOI: 10.1016 / s0264-410x (98) 00051-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Салевский, Э. (1964). Färbemethode zum makroskopschen nachweis von implantationsstellen am uterus der ratte. Arch. Exp. Дорожка. Pharm. 247: 367. DOI: 10.1007 / bf02308461

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стейплз, Э. Дж., И Монат, Т. П. (2011). «Желтая лихорадка» в журнале «Тропические инфекционные болезни : принципы, возбудители и практика» , 3-е изд., Ред. Р. Л. Геррант, Д. Х. Уокер и П. Ф. Веллер (Филадельфия, Пенсильвания: Сондерс), 492–503.

Google Scholar

Сузано К. Э. С., Амарал Э., Сато Х. К. и Папайордану П. М. (2006). Последствия иммунизации против желтой лихорадки (17DD), непреднамеренно использованной на ранних сроках беременности во время массовой кампании в Бразилии. Vaccine 24, 1421–1426. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2005.09.033

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Цай, Т. Ф. (2006). Врожденные арбовирусные инфекции: что-то новое, что-то старое. Педиатрия 117, 537–545.

Google Scholar

Вудсон, С. Э., Фрейберг, А. Н., и Холбрук, М. Р. (2011). Дифференциальные цитокиновые ответы от первичных клеток Купфера человека после инфицирования вирусом желтой лихорадки дикого типа или вакцинного штамма. Вирусология 412, 188–195. DOI: 10.1016 / j.virol.2011.01.012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

% PDF-1.5 % 1 0 объект > / OCGs [8 0 R] >> / Страницы 2 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 31 0 объект > / Шрифт >>> / Поля [] >> эндобдж 35 0 объект > поток 2021-10-10T02: 58: 14-07: 002006-09-27T14: 21: 09-07: 002021-10-10T02: 58: 14-07: 00uuid: b244e228-02b3-470a-8c88-946af9c02b46uuid: 575e464c- 1dd2-11b2-0a00-8100e887acffapplication / pdf конечный поток эндобдж 2 0 obj > эндобдж 24 0 объект > / QITE_pageid> / Resources> / Font> / T1_1> / T1_2> / T1_3 39 0 R >> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / Properties> / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 17 0 объект > / QITE_pageid> / Resources> / Font> / T1_1> / T1_2> / T1_3> / T1_4 39 0 R >> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / Properties> / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 5 0 obj > / QITE_pageid> / Resources> / Font> / T1_1> / T1_2> / T1_3> / T1_4 39 0 R >> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC] / Properties> / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 36 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 44 0 объект [51 0 R 52 0 R 53 0 R 54 0 R 55 0 R] эндобдж 45 0 объект > поток q 540.0594177 0 0 68.6011963 35.9702911 675.3988037 см / Im0 Do Q BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 85,56995 576,99985 тм (1981; 41: 3639-3641.) Tj / T1_1 1 Тс -5.55699 0 Тд (Рак Res \ 240) Tj / T1_0 1 Тс 0 1 ТД (\ 240) Tj 0 1.00001 TD (Кеничи Танака, Йоко Набешима, Хироаки Такахаши и др.) Tj / T1_2 1 Тс 0 1 ТД (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс 18 0 0 18 30 616,99997 тм (Гестационная линия клеток хориокарциномы человека \ (GCH-1 \)) Tj 18.88693 1 тд (-Микроглобулин в) Tj -0,33333 Ц -0,556 0 Тд (2) Tj / T1_4 1 Тс 0 Ц -0,549 0 Тд (б) Tj / T1_3 1 Тс -17.78193 0 тд (Отсутствие эффективной РНК-мессенджера для) Tj ET 30 522 552 35 рэ 0 0 мес. S BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 529.99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -7,55696 1 тд (Обновленная версия) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 141 521,99994 тм (\ 240) Tj / T1_0 1 Тс 26.12495 1 тд () Tj 0 0 1 рг -26.12495 0 Тд (http://cancerres.aacrjournals.org/content/41/9_Part_1/3639)Tj 0 г 0 1.00001 TD (См. Самую последнюю версию этой статьи по адресу:) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 30 501,99997 тм (\ 240) Tj 0 1 ТД (\ 240) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 30 481.99997 Тм (\ 240) Tj Т * (\ 240) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 30 461,99997 тм (\ 240) Tj Т * (\ 240) Tj ET 30 347 552 115 рэ 0 0 мес. S BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 429.99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -5.66901 1 тд (Оповещения по электронной почте) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 295,4996 442 тм (относится к этой статье или журналу.) Tj 0 0 1 рг -15.44996 0 Тд (Зарегистрируйтесь, чтобы получать бесплатные уведомления по электронной почте) Tj ET BT 0 г / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 396.99994 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -6.38997 1 тд (Подписки) Tj 0,556 1,00001 тд (Отпечатки и) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 141399.99994 Тм (\ 240) Tj 13.46496 1 тд (.) Tj 0 0 1 рг -6.85098 0 Тд ([email protected]) Tj 0 г -6.61398 0 Тд (Отделение) Tj 0 1.00001 TD (Чтобы заказать перепечатку статьи или подписаться на журнал, свяжитесь с нами \ t Публикации AACR) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120,94 202 374,99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -5.66901 1 тд (Разрешения) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 141 346,99988 тм (\ 240) Tj 0 1 ТД (Сайт Rightlink.) Tj 0 1.00001 TD (Нажмите «Запросить разрешения», чтобы перейти на страницу защиты авторских прав \ раннс Центр \ (CCC \)) Tj 26.12495 1 тд (.) Tj 0 0 1 рг -26.12495 0 Тд (http://cancerres.aacrjournals.org/content/41/9_Part_1/3639)Tj 0 г 0 1 ТД (Чтобы запросить разрешение на повторное использование всей или части этой статьи, используйте это li \ nk) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 9 0 0 9 283,24257 1,99997 тм (Исследования) Tj -1,34302 1 тд (10 октября 2021 г. \ 251 1981 Американская ассоциация рака) Tj 0 0 1 рг -12.11496 0 Тд (Canceres.aacrjournals.org) Tj 0 г -8.11398 0 Td (Скачано с) Tj ET конечный поток эндобдж 50 0 объект > / Filter / FlateDecode / Height 196 / Length 86651 / Name / X / Subtype / Image / Type / XObject / Width 1543 >> stream HMUI ~ ( EDS IV) вызывается мутацией в гене COL3A1, что приводит к нарушению проколлагена III типа.Диагноз подтверждается демонстрацией синтеза аномальных молекул проколлагена III типа из культивированных фибробластов дермы или путем выявления мутации в гене COL3A1.

Авторы сообщают о случае EDS IV, вызванного новой точечной мутацией в гене COL3A1 у 16-летней женщины. Рецидивирующее кровохарканье и образование полости в легком свидетельствовали о поражении легких. Однако внегрудные проявления EDS IV в большинстве своем отсутствовали.

Насколько известно авторам, все ранее описанные пациенты с синдромом Элерса-Данлоса IV с респираторным заболеванием имели характерные находки или истории болезни с синдромом Элерса-Данлоса IV.В данном случае возникло подозрение на рыхлость соединительной ткани из-за разрыва ткани, наблюдаемого в биопсийном образце легкого, и диагноз был поставлен, исходя из этого ключевого открытия.

Синдром Элерса-Данлоса тип IV (EDS IV), сосудистый тип, является наиболее тяжелой формой синдромов Элерса-Данлоса 1. Он характеризуется четырьмя диагностическими критериями: легкое образование синяков, тонкая прозрачная кожа, характерные черты лица и летальный исход. разрыв артерий, матки или кишечника, который обычно возникает в молодом возрасте 2, 3.Диагноз часто ставится после катастрофического осложнения или при патологоанатомическом исследовании 4.

Сообщалось о нескольких случаях EDS IV с респираторными проявлениями 5–9. Все эти случаи, насколько известно авторам, сопровождались такими клиническими признаками, как характерные черты лица, полупрозрачная кожа, чрезмерные синяки или семейный анамнез. Здесь описывается случай 16-летней женщины с EDS IV, для которой было трудно поставить правильный диагноз из-за небольшого количества внегрудных исследований.

История болезни

16-летняя женщина, которая имела хорошее здоровье, была направлена ​​из другой больницы из-за рецидивирующего кровохарканья. Ее лицо и кожа были нормальными. Ее родители и брат тоже были здоровы. За 6 месяцев до госпитализации у нее было периодическое кровохарканье примерно раз в месяц, но не было никакой связи с менструацией, и временное онемение правой стороны ее тела было сопутствующим симптомом.

Гематологические исследования показали легкую анемию (концентрация гемоглобина 11.4 г · дл ^-1 ), а исследования коагуляции, включая время кровотечения, были нормальными. Рентгенография грудной клетки и компьютерная томография показали полостное поражение в правом легком (рис. 1⇓), но через месяц поражение спонтанно исчезло (рис. 2⇓). Неврологические обследования, включая магнитно-резонансную томографию головного мозга и электроэнцефалографию, не выявили никаких отклонений. Была проведена легочная артериография для выявления каких-либо аномалий в легочных сосудах, но результаты были отрицательными.

Компьютерная томография грудной клетки за 1 месяц до госпитализации. В правой нижней доле имеется полостное поражение с толстой стенкой. В левой нижней доле выявляется нечеткое помутнение с ретикулярным рисунком, совместимое с легочным гемосидерозом.

Компьютерная томография грудной клетки при поступлении. Полостное поражение в правой нижней доле устранено. Небольшое узловое уплотнение присутствует в области, соответствующей полостному поражению.

В дальнейшем выполнена клиновидная артериография правой А ⁹ . Сразу после этой процедуры развились гемоторакс и массивное кровохарканье, которые лечили с помощью дренажа грудной клетки и переливания крови. Гемоторакс вызвал остаточную гематому и сопутствующий ателектаз в правой нижней доле. Дифференциальный диагноз включал травму, новообразование, аутоиммунные заболевания, гематологические нарушения и заболевания коллагеновых сосудов. Через две недели была проведена торакотомия для удаления гематомы и проведения открытой биопсии легкого.

Биопсия легкого выявила выраженное диффузное кровотечение, гемосидероз и фиброз с костной метаплазией. В областях фиброза эластичная ткань была разорвана и уже исчезла (рис. 3⇓). Признаков васкулита или бронхоэктазов не было.

Биоптат легкого пациента, показывающий разрыв и исчезновение эластичной ткани в субплевральном рубце (стрелка). Также видны разрушение плевры с вторичным организующим плевритом и вторичный плевральный эластоз (стрелки).Эластичное окрашивание. Внутренняя шкала = 0,5 мм.

Эти данные указывают на хрупкость легочной ткани. На основании этого было заподозрено заболевание соединительной ткани, и после получения информированного согласия было проведено биохимическое исследование биопсии кожной ткани.

Анализ синтеза коллагена с использованием дермальных фибробластов выполняли, как описано ранее 10. Продукция нормального проколлагена III типа заметно снизилась (рис. 4⇓). Затем был проведен генетический анализ путем изучения кодирующей последовательности матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) культивируемых дермальных фибробластов, как описано 11.Мутация миссенс-основания была обнаружена в гетерозиготном гене COL3A1, который преобразовал кодон глицина GGT в положении аминокислоты 727 в кодон GAT, который кодирует аспартат. На основании этих данных был поставлен диагноз EDS IV. Мутация в этом месте ранее не сообщалась как причина этого расстройства 12. К сожалению, из-за этических норм учреждения авторов, подтверждение генетического статуса родителей пациента не могло быть выполнено.

Флюорограммы электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS) проколлагена, полученного из фибробластов кожи пациента (P) и нормального добровольца того же возраста и пола (N). Оба фибробласта культивировали в соответствующей среде. После обработки образцов коллагена 0,1% пепсином их разделяли с помощью электрофора в SDS / 5% полиакриламидном геле в присутствии (восстановление +) или в отсутствие (восстановление -) 2-меркаптоэтанола. Хотя фибробласты пациента продуцировали проколлаген I типа в количестве, равном количеству нормальных контрольных фибробластов, синтез проколлагена III типа из фибробластов пациента значительно снизился.

Послеоперационное течение пациента протекало без осложнений. Пять месяцев спустя у нее снова случился гемоторакс, но ее состояние улучшилось благодаря использованию только консервативных методов лечения.

Обсуждение

Поражение дыхательной системы не является обычным для EDS IV, но пневмоторакс, если он присутствует, является наиболее частым респираторным осложнением 6. Также описаны кровохарканье, образование пузырей, полостные легочные поражения и фиброзная псевдоопухоль 5–9. Этот случай отличался тем, что все ранее зарегистрированные пациенты имели семейный анамнез, явно указывающий на EDS IV, физические данные, характерные для расстройства, или эпизоды разрыва артерии, кишечника или органа.

Сообщалось также о неврологических осложнениях, включая эпилепсию 13 и временный гемипарез 5, развивающихся у пациентов с EDS IV. Было высказано предположение, что в некоторых случаях EDS IV есть такие нейрососудистые заболевания, как микроангиопатия и различные врожденные пороки развития, включая кортикальную дисгенезию, которые трудно обнаружить с помощью современных традиционных методов нейровизуализации 13, 14. Онемение тела, испытываемое пациентом, изучаемым здесь. можно отнести к такому расстройству.

EDS IV является результатом мутаций в гене COL3A1, который кодирует проколлаген 1, 2 типа III, который является основным компонентом кровеносных сосудов, матки и кишечника 1,15. Фибробластические клетки кожи пораженных людей имеют расширенную грубую эндоплазматическую сеть (RER), содержащую аномальные молекулы проколлагена III типа; у таких пациентов диаметр коллагеновых фибрилл в коже небольшой 16. Проколлаген III типа является гомотримером трех идентичных α1-цепей. Следовательно, из-за гетерозиготной мутации гена COL3A1 гомотримеры дикого типа составляют только одну восьмую от продуцируемых молекул проколлагена III типа 1.

Пепин et al. 4 предположил, что не было очевидной связи между типом осложнения и локализацией мутаций. Однако также было высказано предположение, что природа мутации может относиться к фенотипу 16–23. Мутации на самом 3′-конце гена обычно вызывают тяжелую форму заболевания с разрывом артерии и заметно сокращением продолжительности жизни, а мутации, расположенные в средней части или на 5′-конце, вызывают более вариабельные фенотипы и более мягкие варианты 1, 17, 18.Smith et al. 16 отмечает, что дилатация RER и небольшие коллагеновые фибриллы в дерме чаще встречаются с мутациями около C-концевого конца тройной спирали, тогда как переменные диаметры фибрилл отражают мутации больше по направлению к N-концу в тройном спиральном домене. Однако мутация на самом N-конце может привести к серьезному поражению сосудов 1, 4. EDS IV почти всегда фатален, потому что даже одиночный разрыв артерии часто бывает летальным.

О многих типах мутаций в гене уже сообщалось 12, но настоящая мутация (Gly727Asp, средняя часть белковой молекулы) ранее не была задокументирована.На теоретическом уровне, если бы родители, чьи фенотипы явно нормальные, были доступны для обследования (их не было по этическим причинам) и не было обнаружено никаких мутаций, можно было бы сделать вывод, что клинические признаки, наблюдаемые в данном случае были обусловлены уникальностью мутации. Полная карта всех мутаций и анализ клинических особенностей этого заболевания будут необходимы для окончательного доказательства этой гипотезы.

Благодарности

Авторы выражают благодарность А.Сугито, Х. Кавана и А. Ватанабе.

• Получено 27 февраля 2001 г.
• Принято 3 июля 2001 г.

Ссылки

1. ↵

   De Paepe A. Синдром Элерса-Данлоса: наследственное нарушение коллагена как причина кровотечения. Thromb Haemost 1996; 75: 379–386.

2. ↵

   Prockop DJ, Kuivaniemi H, Tromp G. Унаследованные нарушения соединительной ткани. In : Fauci AS, Braunwald E, Isselbacher KJ, и др. .ред. Принципы внутренней медицины Харрисона, 14-е изд. Нью-Йорк, Макгроу-Хилл, 1998 г .; С. 2183––2194.

3. ↵

   Beighton P, De Paepe A, Steinmann B, Tsipouras P, Wenstrup RJ. Синдромы Элерса-Данлоса: пересмотренная нозология, Вильфранш, 1997. Национальный фонд Элерса-Данлоса (США) и Группа поддержки Элерса-Данлоса (Великобритания). Am J Med Genet 1998; 77: 31–37.

4. ↵

   Pepin M, Schwarze U, Superti-Furga A, Byers PH. Клинико-генетические особенности синдрома Элерса-Данлоса IV типа, сосудистого типа.N Engl J Med 2000; 342: 673–680.

5. ↵

   Yost BA, Vogelsang JP, Lie JT. Смертельное кровохарканье при синдроме Элерса-Данлоса. Старая болезнь с новым проклятием. Chest 1995; 107: 1465–1467.

6. ↵

   Даутон С.Б., Пинкотт С., Деммер Л. Респираторные осложнения синдрома Элерса-Данлоса типа IV. Clin Genet 1996; 50: 510–514.

7. Corrin B, Simpson CGB, Fisher C. Фиброзные псевдоопухоли и образование кист в легких при синдроме Элерса-Данлоса.Гистопатология 1990; 17: 478–479.

8. Герман Т.Е., Макалистер WH. Полостные поражения легких при синдроме Элерса-Данлоса IV типа. Педиатр Радиол 1994; 24: 263–265.

9. ↵

   Мюррей Р.А., Поултон ТБ, Saltarelli MG, et al. Редкое легочное проявление синдрома Элерса-Данлоса. J Thorac Imaging 1995; 10: 138–141.

10. ↵

    Хата Р., Курата С., Шинкай Х. Существование неисправных генов коллагена про α2 (I) у пациента с вариантом синдрома Элерса-Данлоса с дефектом про α2 (I) цепи.Eur J Biochem 1988; 174: 231–237.

11. ↵

    Tromp G, Wu Y, Prockop DJ, et al. Секвенирование кДНК от 50 неродственных пациентов показывает, что мутации в трехспиральном домене проколлагена типа III являются нечастой причиной аневризм аорты. Дж. Клин Инвест, 1993; 91: 2539–2545.

12. ↵

    Dalgleish R. База данных мутаций человеческого коллагена 1998 г. Nucleic Acids Res 1998; 26: 253–255.

13. ↵

    Jacome DE.Эпилепсия при синдроме Элерса-Данлоса. Эпилепсия 1999; 40: 467–473.

14. ↵

    Jacome DE. Головная боль при синдроме Элерса-Данлоса. Цефалгия 1999; 19: 791–796.

15. ↵

    Кларк Дж. Г., Кун С. III, Уитто Дж. Коллаген легких при синдроме Элерса-Данлоса IV типа: ультраструктурные и биохимические исследования. Am Rev Respir Dis 1980; 122: 971–978.

16. ↵

    Smith LT, Schwarze U, Goldstein J, Byers PH. Мутации в гене COL3A1 приводят к синдрому Элерса-Данлоса типа IV и изменениям размера и распределения основных коллагеновых фибрилл дермы.J Invest Dermatol 1997; 108: 241–247.

17. ↵

    Mackay K, Raghunath M, Superti-Furga A, Steinmann B, Dalgleish R. Синдром Элерса-Данлоса тип IV, вызванный заменами Gly400Glu, Gly595Cys и Gly1003Asp в коллагене III: клинические особенности, биохимический скрининг подтверждение. Clin Genet 1996; 49: 286–295.

18. ↵

    Pope FM, Narcisi P, Nicholls AC, Germaine D, Pals G, Richards AJ. Мутации COL3A1 вызывают различные клинические фенотипы, включая акрогерию и разрыв сосудов.Br J Dermatol 1996; 135: 163–181.

19. Tromp G, Kuivaniemi H, Stolle C, Pope FM, Prockop DJ. Одноосновная мутация в гене проколлагена III типа, которая превращает кодон глицина 883 в аспартат при легком варианте синдрома Элерса-Данлоса IV. J Biol Chem 1989; 264: 19313–19317.

20. Gilchrist D, Schwarze U, Shields K, MacLaren L, Bridge PJ, Byers PH. Большой родственник с синдромом Элерса-Данлоса типа IV из-за точечной мутации (G571S) в гене COL3A1 проколлагена типа III: низкий риск осложнений беременности и неожиданное долголетие у некоторых затронутых родственников.Am J Med Genet 1999; 82: 305–311.

21. Ричардс А.Дж., Ллойд Дж.С., Нарциси П., и др. Делеция 27 п.н. одного аллеля гена коллагена III типа (COL3A1) в большой семье с синдромом Элерса-Данлоса IV типа. Hum Genet 1992; 88: 325–330.

22. МакГрори Дж., Коста Т., Коул РГ. Новая замена G499D в цепи α1 (III) коллагена типа III дает вариабельные формы синдрома Элерса-Данло типа IV. Хум Мутат 1996; 7: 59–60.

23. ↵

    Nishiyama Y, Nejima J, Watanabe A, et al. Синдром Элерса-Данлоса тип IV с уникальной точечной мутацией в COL3A1 и семейным фенотипом инфаркта миокарда без органического коронарного стеноза. J Intern Med 2001; 249: 103–108.

Видеофлюороскопический осмотр глотания (VFSE)

Видеофлюороскопическое исследование глотания (VFSE) проверяет вашу способность безопасно и эффективно глотать.В этом неинвазивном обследовании используется рентгеноскопия, чтобы определить толщину жидкости и пищи, которую вы можете съесть наиболее безопасно.

Сообщите своему врачу, если вы беременны. Перечислите все недавние заболевания, состояния здоровья, принимаемые вами лекарства и аллергию, особенно на контрастные вещества. Эта процедура практически не требует специальной подготовки. Ваш врач может посоветовать вам не курить, не жевать жевательную резинку, не есть и не пить за несколько часов до обследования. Оставьте украшения дома и носите свободную удобную одежду.Возможно, вам понадобится платье.

Что такое видео-рентгеноскопический осмотр глотания (VFSE)?

Экзамен VFSE (глотание с модифицированным барием) изучает, как вы проглатываете различные жидкости и продукты. Он использует специальную форму рентгена в реальном времени, называемую рентгеноскопией. Врач наблюдает, как пациент проглатывает предметы разной толщины и текстуры. Эти предметы могут варьироваться от тонкого бария до печенья, покрытого барием. VFSE позволяет врачу проверить вашу способность безопасно и эффективно глотать.Также часто на экзамен приходит патолог.

Рентгеновское обследование помогает врачам диагностировать и лечить заболевания. Он подвергает вас небольшой дозе ионизирующего излучения для получения изображений изнутри тела. Рентген — самый старый и наиболее часто используемый вид медицинской визуализации.

Рентгеноскопия позволяет врачу в режиме реального времени наблюдать за тем, как выглядят и работают ваши ткани и органы.

Ваш врач может использовать VFSE только для того, чтобы посмотреть, как двигаются ваши мышцы при глотании.Или ваш врач может выполнить VFSE с эзофаграммой (исследование глотания бария. Эзофаграмма показывает, как выглядит пищевод и работает на уровне желудка. Эти два исследования имеют похожие названия. Иногда это может вызвать путаницу при назначении тестов. Таким образом, вы всегда должны уточнять, какое обследование хочет назначить ваш врач.

начало страницы

Каковы наиболее распространенные способы использования этой процедуры?

VFSE проводится пациентам с дисфагией, техническим термином, обозначающим затрудненное глотание.Экзамен используется в первую очередь для проверки того, как вы глотаете, и любых признаков стремления. Аспирация происходит, когда жидкость или пища попадает в дыхательные пути (трахею и бронхи) вместо того, чтобы оставаться в глотке (горле) и пищеводе.

Патолог речевого языка может посоветовать способы улучшить ваше глотание. Эти методы могут включать в себя подгибание или наклонение подбородка или поворот головы при глотании. Патолог может также порекомендовать жидкости для загустения, чтобы предотвратить аспирацию. Ваш врач также может использовать VFSE, чтобы узнать, насколько эффективны эти методы.

Ваш врач может использовать VFSE, потому что у вас есть известные или подозреваемые проблемы с глотанием. Или потому, что у вас состояние, которое сильно связано с проблемами глотания, например:

• кашель и / или удушье во время еды или питья
• кашель, удушье или слюнотечение при глотании
• голос с влажным звучанием
• Изменения дыхания во время еды или питья
• частые респираторные инфекции
• известная или подозреваемая аспирационная пневмония
• Образование на языке, горле или гортани
• мышечная слабость (миопатия) горла
• неврологические расстройства, которые могут повлиять на глотание.

начало страницы

Как мне подготовиться?

Расскажите своему врачу обо всех лекарствах, которые вы принимаете. Перечислите любые аллергические реакции, особенно на контрастные вещества с йодом. Расскажите своему врачу о недавних заболеваниях или других заболеваниях.

Кроме лекарств, врач может посоветовать вам ничего не есть и не пить за несколько часов до процедуры.

Ваш врач может также посоветовать вам не курить и не жевать жевательную резинку до обследования.

Возможно, вам придется снять одежду и / или переодеться в халат перед экзаменом.Снимите украшения, съемные стоматологические приспособления, очки и любые металлические предметы или одежду, которые могут мешать получению рентгеновских изображений.

Женщины всегда должны сообщать об этом своему врачу и технологу. если они беременны. Врачи не будут проводить много анализов во время беременности, чтобы не подвергать плод радиации. Если рентгеновский снимок необходим, врач примет меры, чтобы свести к минимуму радиационное воздействие на ребенка. См. Страницу «Безопасность при рентгенографии, интервенционной радиологии и процедурах ядерной медицины» для получения дополнительной информации о беременности и рентгеновских лучах.

Врачи часто используют VFSE для младенцев и детей. Ваш врач расскажет вам, как подготовить ребенка. Возможно, вам придется принести с собой небольшое количество продуктов и жидкостей, которые ребенок может есть и пить, а также тех, которые ему трудно глотать. Вам также может потребоваться принести с собой то, что ваш ребенок обычно использует, чтобы есть или пить. Это могут быть бутылочки и соски, которые вы используете дома, чашки-поилки и / или столовые приборы.

Пища, которую вы принесете, будет смешана с барием, чтобы ее можно было увидеть на рентгеновском снимке.Объясните ребенку, что барий может изменить внешний вид и вкус пищи.

начало страницы

Как выглядит оборудование?

В этом исследовании обычно используется рентгенографический стол, одна или две рентгеновские трубки и видеомонитор. Рентгеноскопия преобразует рентгеновские лучи в видеоизображения. Врачи используют его для наблюдения и руководства процедурами. Рентгеновский аппарат и детектор, подвешенный над столом для осмотра, производят видео.

Во время VFSE пациент обычно сидит или стоит прямо перед или сбоку от рентгеновской камеры.

начало страницы

Как работает процедура?

Рентгеновские лучи — это форма излучения, подобная свету или радиоволнам. Рентгеновские лучи проходят через большинство объектов, включая тело. Технолог осторожно направляет рентгеновский луч на интересующую область. Аппарат производит небольшой выброс радиации, который проходит через ваше тело. Излучение записывает изображение на фотопленку или специальный детектор.

Рентгеноскопия использует непрерывный или импульсный рентгеновский луч для создания изображений и проецирования их на видеомонитор.В вашем экзамене может использоваться контрастный материал, чтобы четко определить интересующую область. Рентгеноскопия позволяет врачу увидеть суставы или внутренние органы в движении. Экзамен также захватывает неподвижные изображения или фильмы и сохраняет их в электронном виде на компьютере.

Ваш врач может записать ваш осмотр, чтобы позже просмотреть изображения.

Большинство рентгеновских изображений — это электронные файлы, хранящиеся в цифровом формате. Ваш врач может легко получить доступ к этим сохраненным изображениям, чтобы диагностировать и управлять вашим состоянием.

начало страницы

Как проходит процедура?

Ваш врач и / или логопед изучит вашу историю болезни, включая любые жалобы на проблемы с глотанием.

Радиолог или технолог и патолог проведут вас через экзамен.

Вы можете сидеть прямо на стуле или табурете или стоять на платформе. При необходимости вы можете остаться в инвалидной коляске. Младенцы и дети сидят на безопасных сиденьях.

Вы будете есть и пить контролируемое количество продуктов и жидкостей разной толщины, смешанных с контрастным веществом с барием. Патолог может попытаться помочь вам лучше глотать, изменив чашки, посуду или положение вашего тела.

Когда вы едите и пьете, врач подносит рентгеновскую камеру к вашему горлу. Патолог и радиолог будут наблюдать за вашим глотанием в режиме реального времени с помощью флюороскопа. Изображения обычно записываются в цифровом виде, чтобы ваш врач мог просмотреть их позже.

Визуализирующая часть этой процедуры обычно занимает около 15 минут.

начало страницы

Что я испытаю во время и после процедуры?

Вы можете найти вкус и консистенцию бария неприятными.

После обследования вернитесь к своей обычной диете и примите пероральные препараты, если врач не назначил иное. Вы также можете вернуться к своей обычной деятельности.

Барий может сделать ваш кишечник белым в течение дня или двух после обследования. Это нормально. Иногда барий может вызвать временный запор. Вы можете лечить это слабительным, отпускаемым без рецепта.

Также может помочь употребление большего количества жидкости в течение нескольких дней после теста. Позвоните своему врачу, если у вас нет дефекации или если после обследования ваши привычки в работе кишечника значительно изменились.

начало страницы

Кто интерпретирует результаты и как их получить?

Патологоанатомы и рентгенологи пересмотрят ваш экзамен. Отчет о результатах также будет отправлен врачу, заказавшему тест. Патолог может встретиться с вами позже, чтобы обсудить ваши результаты.

Радиолог , врач, обученный руководить и интерпретировать результаты радиологических исследований, проанализирует изображения. Радиолог отправит подписанный отчет вашему лечащему врачу или лечащему врачу, который обсудит с вами результаты .

Вам может потребоваться повторное обследование. Если да, ваш врач объяснит, почему. Иногда последующее обследование позволяет дополнительно оценить потенциальную проблему с помощью большего количества просмотров или специальной техники визуализации. Он также может увидеть, изменилось ли какое-либо изменение проблемы с течением времени. Последующие осмотры часто являются лучшим способом узнать, работает ли лечение или требует внимания проблема.

начало страницы

Каковы преимущества по сравнению с рисками?

Преимущества

• VFSE неинвазивен.
• Аллергические реакции на барий крайне редки.
• VFSE может помочь определить консистенцию пищи, которую вы можете съесть наиболее безопасно. Это может снизить риск попадания жидкости и / или пищи в дыхательные пути и легкие (аспирация).
• После рентгеновского исследования в вашем теле не остается радиации.
• Рентгеновские лучи обычно не имеют побочных эффектов в типичном диагностическом диапазоне для этого исследования.

Риски

• Всегда есть небольшая вероятность рака из-за чрезмерного воздействия радиации.Однако, учитывая небольшое количество излучения, используемого при медицинской визуализации, польза от точного диагноза намного превышает связанный с этим риск.
• Доза облучения для этой процедуры варьируется. Дополнительную информацию см. На странице «Доза излучения при рентгеновских и КТ-исследованиях». .
• Иногда у пациентов бывает аллергия на ароматизатор, добавленный к барию. Сообщите своему врачу и технологу перед процедурой, если у вас аллергия на шоколад, некоторые ягоды или цитрусовые.
• Вы можете случайно всосать барий в легкие во время обследования. Это не приводит к необратимым повреждениям. Однако на будущих снимках можно будет увидеть барий.
• Есть небольшая вероятность, что барий может остаться в желудочно-кишечном тракте. Это может привести к засорению. Пациентам с известной закупоркой не следует проходить это обследование.
• Женщины должны всегда сообщать своему врачу и рентгенологу, если они беременны. См. Страницу «Безопасность при рентгенографии, интервенционной радиологии и процедурах ядерной медицины» для получения дополнительной информации о беременности и рентгеновских лучах.

Несколько слов о минимизации радиационного воздействия

Врачи проявляют особую осторожность во время рентгеновских обследований, чтобы использовать минимально возможную дозу облучения при получении наилучших изображений для оценки. Национальные и международные организации по радиологической защите постоянно пересматривают и обновляют стандарты техники, используемые профессионалами-радиологами.

Современные рентгеновские системы минимизируют паразитное (рассеянное) излучение за счет использования контролируемых рентгеновских лучей и методов контроля дозы. Это гарантирует, что области вашего тела, которые не визуализируются, будут подвергаться минимальному радиационному облучению.

начало страницы

Каковы ограничения VFSE?

VFSE оценивает только область от задней части рта через горло до верхней части груди. Иногда ваши симптомы возникают из-за проблем с пищеводом, который находится ниже в груди. В таком случае врач может выполнить эзофаграмму (исследование глотания бария).

начало страницы

Эта страница была просмотрена 15 ноября 2019 г.

Процедура рентгеноскопии

Рентгеноскопия — это диагностическое сканирование, используемое для изучения движения структур тела.В этой статье описывается медицинская процедура, которая проводится во время рентгеноскопии.

Рентгеновская клизма с барием, показывающая нормальную слизистую толстой кишки. Кредит изображения: Richman Photo / Shutterstock

Что такое рентгеноскопия?

Рентгеноскопия показывает непрерывное рентгеновское изображение на мониторе, очень похожее на рентгеновский фильм. Во время процедуры рентгеновский луч постоянно проходит через исследуемую конкретную часть тела. Изображения передаются на монитор для оценки движения органа.

Врачи могут визуализировать многие части тела, такие как пищеварительная, скелетная, дыхательная, мочевыделительная и репродуктивная системы. В некоторых случаях проводится интервенционная рентгеноскопия. Он использует ионизирующее излучение для направления небольших инструментов, таких как катетеры, через кровеносные сосуды.

Это многообещающая процедура, поскольку она менее инвазивна и требует лишь небольшого разреза. Это значительно снижает риск заражения и может ускорить восстановление по сравнению с обычными хирургическими процедурами.

Что такое рентгеноскопия? Играть

Какие показания к рентгеноскопии?

Рентгеноскопия используется при различных типах процедур и обследований, включая катетеризацию сердца, люмбальную пункцию, артрографию или визуализацию суставов, рентгеновские лучи с барием, установку внутривенных катетеров, биопсию, гистеросальпингограмму и внутривенную пиелограмму, среди прочего. Другие применения рентгеноскопии включают обнаружение инородных тел, введение анестезии под визуальным контролем в позвоночник или суставы, а также чрескожную вертебропластику.