Синбиотики последнего поколения: пробиотик нового поколения для восстановления микрофлоры кишечника

Развитие фундаментальных исследований симбиотических взаимодействий организма и его микробиоты получило новое направление в связи с появлением представлений о существовании бактерий в виде биопленок, что определило уточнение роли пробиотиков и особенно — кормового назначения. Кормовые пробиотические препараты находят широкое применение в практике животноводства, позволяют усовершенствовать существующие системы разведения и кормления сельскохозяйственных животных, становятся важным компонентом современного рационального кормления животных [21].

Цель настоящего обзора литературы состоит в рассмотрении данных, касающихся биологической эффективности нового поколения кормовых пробиотиков, механизмов их действия, а также возможностей использования результатов этих исследований в практике животноводства. Обсуждаются литературные сведения и собственные результаты, позволяющие предложить подходы к увеличению рентабельности животноводческого производства.

Современная концепция пробиотиков

Пробиотики — живые микробные добавки, которые оказывают благоприятное действие на организм человека и животного путем улучшения кишечного микробного баланса [46], стимулируют обменные и иммунные процессы [28]. Это объекты всесторонних научных исследований и важный товар на мировом рынке, объем продаж которых оценивается в миллиарды долларов в год. Широкому кругу потребителей доступны сотни пробиотических продуктов питания и пищевых добавок, а производители кормов для сельскохозяйственных и домашних животных, птицы и рыбы используют пробиотические препараты в составе кормов. Применение пробиотиков связано с решением различных проблем со здоровьем, повышением эффективности пищеварения, стимуляцией роста и развития. Пробиотики перспективны в качестве профилактических средств и сопутствующей терапии, но не являются основным средством для лечения заболеваний. На специальном коллоквиуме Американской Академии Микробиологии в ноябре 2005 г. обсуждались вопросы взаимосвязи между микроорганизмами, иммунитетом и болезнями, доказательные данные в отношении лечебных свойств пробиотиков и возможные перспективы их использования [56]. Установлено, что применение пробиотиков может оказывать противоинфекционное, иммунномодуляторное воздействие на организм, повышать барьерные функции (физиологические механизмы, защищающие организм от воздействия окружающей среды, препятствующие проникновению в него бактерий, вирусов и вредных веществ), стимулировать моторику и экскреторную функции кишечника.

Введенные с препаратами пробиотические штаммы взаимодействуют с сообществом бактерий кишечника, выделяют метаболиты, влияющие на активность иммунной, гормональной, пищеварительной систем организма-хозяина.

В последнее десятилетие концепция пробиотиков претерпела существенные изменения. Возросло внимание исследователей к структурным компонентам и продуктам метаболизма пробиотических микроорганизмов. Данные изменения связаны с расширением представлений о биологической эффективности пробиотиков и обнаружении того факта, что структурные элементы клеток и их метаболиты в ряде случаев оказываются не менее эффективными [37]. Выделяют 4 поколения пробиотиков [38] (табл. 1).

Таблица 1

Современные поколения пробиотиков

В настоящее время на рынке пробиотиков востребованы комбинированные препараты. Входящие в комплексный пробиотик штаммы бактерий объединяются по способности штаммов продуцировать различные ферменты, биологически активные вещества так, чтобы они дополняли друг друга по биологической активности. Кроме того, для получения новых поликомпонентных биологически активных препаратов комбинируют комплексы пробиотиков с пребиотическими веществами.

К прогрессивным формам препаратов нового поколения относятся сорбированные формы пробиотиков. Сорбированные пробиотики содержат бактерии, иммобилизованные на частицах твердого сорбента. За счет химических и электростатических сил взаимодействие таких форм со стенкой кишечника выше. Сорбент ускоряет дезинтоксикацию и репаративный процесс. Наиболее часто использующиеся природные сорбенты — угли, цеолиты и кремнеземы. Они обладают относительно хорошей сорбционной и ионообменной способностью, имеют сильно развитый поверхностный каркас, с порами разного диаметра, способными взаимодействовать с различными веществами и клетками пробиотика. Биологическая активность таких препаратов связана с тем, что микробная масса живых пробиотических бактерий иммобилизована на сорбенте, благодаря чему они лучше выживают и быстрее заселяют кишечник [15, 36]. Иммобилизованная форма пробиотического препарата позволяет существенно повысить защиту бифидо- и лактобактерий при прохождении через желудок, где обычные препараты, содержащие лиофильно высушенные клетки пробиотиков, теряют более 90 % активности. Композиции цеолиты + пробиотик обладают выраженными иммунокоррегирующими свойствами [12], нормализуют микробиоценоз желудочно-кишечного тракта, повышают неспецифическую резистентность организма, стимулируют функциональную деятельность пищеварительной системы, обладают, как правило, детоксикационными свойствами. Биологическая эффективность сорбированных пробиотиков позволяет применять уменьшенные дозы бактерий. В частности, одна доза Бифидумбактерин форте (пробиотик, сорбированный на косточковом активированном угле) содержит не менее 107 КОЕ/г бифидобактерий (количество колониеобразующих клеток бактерий (КОЕ) — указано в инструкции по применению), что сравнимо с содержанием бактерий в кисломолочных продуктах, и на два порядка меньше дозы, рекомендованной для обычных пробиотиков. Адсорбированные на нейтральном фито-носителе клетки пробиотических микроорганизмов содержатся в препаратах кормового назначения Целлобактерин и Целлобактерин-Т [13, 29], доза ввода которых в корма составляет 1 кг на тонну комбикорма. Учитывая, что в 1 т комбикорма с Целлобактерином Т содержится 104 КОЕ пробиотика [22], это составляет 107 КОЕ на 1 кг препарата.

В качестве сорбента эффективно использование пребиотиков. Пребиотики — это класс препаратов для регуляции кишечной микрофлоры, который приобретает все большую популярность. Пребиотики — субстраты, стимулирующие естественную микрофлору, не перевариваются и не всасываются в желудке и тонком отделе кишечника. Попадая в толстый отдел кишечника, пребиотики используются в качестве питательной среды для нормальной микробиоты [41, 43, 51]. У млекопитающих в первые дни после рождения основным пребиотическим субстратом является лактулоза, входящая в состав молока. С переходом на смешанное кормление субстратом, способствующим росту нормальной микробиоты, становятся структурные элементы растительных тканей, различные полисахариды (пектины, инулин и др.). Для разных видов животных предложен пробиотический препарат Зоонорм, который состоит из лиофилизированной микробной массы живых бактерий Bifidibacterium bifidum в виде микроколоний, сорбированных на частицах активированного угля и лактулозы [31].

Научное обоснование конструирования пробиотических препаратов основано на анализе взаимоотношений макро- и микроорганизма. В настоящее время активно развивается представление о кишечной микробиоте как о самостоятельном «органе», который в виде биопленки покрывает стенку кишечника [5, 19, 26, 27, 42, 44]. Сложившаяся в ходе развития организма биопленка — прочная система, препятствующая внедрению чужеродных штаммов. Коллективный иммунитет биопленки кишечника не позволяет в полной мере осуществлять коррекцию дисбактериозов с помощью препаратов живых культур пробиотиков — бифидобактерий, лактобацилл, энтеробактерий, поскольку промышленные штаммы микроорганизмов вследствие биологической несовместимости не могут войти компонентом в биопленку, и пополняют пул транзиторных бактерий. Тем не менее, пробиотические препараты применять следует. В содержимом кишечника присутствуют различные симбионты и паразиты — транзиторные бактерии, простейшие, гельминты, роль которых в нормальном функционировании животного организма нельзя недооценивать. Введенные с препаратами пробиотические штаммы, выделяя биологически активные метаболиты, сигнальные вещества, антибиотики, бактериоцины, вступают во взаимодействие с кишечной микрофлорой и оказывают воздействие на функционирование различных физиологических систем организма-хозяина.

Пробиотические препараты кормового назначения

Современная интенсивная индустрия животноводства, птицеводства и рыбоводства основывается на использовании в качестве обязательных компонентов комбикормов различных биологически активных стимуляторов обмена веществ, пищеварения, иммунитета животных. Для повышения перевариваемости и усвояемости кормов, стимуляции роста и развития животных, повышения неспецифического иммунитета применяются ферментные, пробиотические, пребиотические и комбинированные ферментно-пробиотические препараты, а также комплексные пробиотические препараты, обогащенные фитокомпонентами [8-11, 18, 25, 30, 39, 40, 47, 52, 53, 57]. Пробиотики положительно влияют на организм хозяина, способствуют восстановлению пищеварения, биологического статуса, иммунного ответа, повышают эффективность вакцинаций. Применение пробиотиков существенно уменьшает расходы на лечение заболеваний у животных, повышает продуктивность последних и улучшает качество продукции.

Аспекты использования пробиотиков затрагивают широкий круг проблем, связанных с коррекцией кишечного биоценоза, иммунной, гормональной и ферментной систем молодняка и взрослых животных. Кроме того, использование пробиотиков имеет актуальное значение не только для животноводства, но и для здравоохранения в целях: снижения риска заболеваемости людей и повышения экологической безопасности сельскохозяйственной продукции.

Несмотря на тот факт, что полезные свойства нормальной кишечной микробиоты известны уже более 100 лет, учение о пробиотиках только развивается, и история его становления охватывает не более чем 25-летний период, когда стало известно, что нормальная кишечная микрофлора участвует в поддержании колонизационной резистентности слизистой кишечника и играет немаловажную роль в предупреждении заболеваний человека и животных. Неинфекционные желудочно-кишечные заболевания молодняка животных и птицы распространены повсеместно, развиваются с первых часов жизни животного, сопровождаются тяжелыми токсическими явлениями, характеризуются высокой смертностью, нанося значительный экономический ущерб. Проблема профилактики и лечения желудочно-кишечной патологий у животных и птицы, возбудителями которых являются условно-патогенные кишечные микроорганизмы, имеет не только экономическое, но и социальное значение. Экономические убытки от сальмонелеза в США оцениваются в 2 млрд долларов, в Канаде 300 млн долларов. В странах СНГ за последние 15 лет заболеваемость людей и птицы сальмонелезом возросла в 7 раз, при этом этиологическое значение S.enteridis в заболевании людей возросло на 30 %, у животных и птицы на 75 %, а индикация возбудителя в продуктах питания увеличилась на 50 % [14]. Предотвратить развитие многих патологий у животных позволяет использование кормов, обогащенных биологически активными кормовыми пробиотическими добавками.

Развитие интенсивных форм животноводства, птицеводства, рыбоводства и последовательное повышение их эффективности требуют решения как технических проблем, так и вопросов кормления и использования полноценных и экономически выгодных кормов для всех видов разводимых животных. Важнейшей задачей является создание и применение в практике таких кормовых смесей, которые бы максимально усваивались организмом для обеспечения его жизненных функций и обладали профилактическими свойствами [3]. Пробиотики считаются эффективным элементом технологии производства безопасной продукции животноводства и птицеводства [16].

Пробиотики кормового назначения рассматриваются ведущими специалистами как «…часть рационального потенциала животных, поддержания их здоровья и получения продукции высокого качества, безопасной как в бактериальном, так и в химическом отношении» [21].

Получение пробиотических препаратов в виде биопленки — новое направление биотехнологии

В настоящее время существует широкий спектр пробиотических препаратов, предназначенных для коррекции кишечного биоценоза, повышения неспецифического иммунитета молодняка, стимуляции откорма, молочной продуктивности, яйценоскости. В Российской Федерации на 2006 год зарегистрировано около 80 наименований отечественных и импортных пробиотических препаратов [21]. Предлагаемые на рынке пробиотические препараты различаются не только по стоимости, но и по составу, качеству, способам и дозам применения.

Определяющим фактором эффективности пробиотиков во многом являются технологии получения этих препаратов. Современный подход к разработке пробиотических препаратов подразумевает, во-первых, применение различных видов микроорганизмов в определенных сочетаниях, во-вторых, выпуск их в форме, допускающей длительное хранение при обычной температуре, и в-третьих, не теряющих своих свойств при внесении их в процессе производства комбикормов и кормовых добавок. Клинико-экспериментальные исследования показали, что под действием желудочного сока и желчи пробиотики теряют почти 90 % своей активности к моменту попадания в кишечник. Разрабатываются различные способы повышения выживаемости бактерий, например, за счет их иммобилизации на пористых микроносителях, включения в состав препарата компонентов питательной среды. Однако даже в случае научного обоснования пробиотических препаратов, далеко не все из них оказываются эффективными на практике [35].

Поиск микроорганизмов, которые можно использовать в качестве пробиотиков, представляет собой основу для разработки пробиотических препаратов. Препараты с использованием лактобацилл и бифидобактерий хорошо известны положительным влиянием в поддержании микробного баланса кишечника [49, 50]. В последние годы установлено, что не менее важны в микробиоценозе желудочно-кишечного тракта животных и некоторые транзиторные бактерии, например, рода Bacillus, которые применяются во многих кормовых пробиотических препаратах, реально оказывая положительное влияние на здоровье и продуктивность животного [1, 2, 7, 23]. Оценивая перспективы использования бактерий рода Bacillus для создания биопрепаратов, можно отметить следующие их преимущества перед другими представителями экзогенной микрофлоры: безвредность подавляющего большинства представителей рода для макроорганизма даже в высоких концентрациях; способность повышать неспецифическую резистентность организма хозяина; антагонистическую активность к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов; высокую ферментативную активность; устойчивость к литическим ферментам и обусловленную этим высокую жизнеспособность на протяжении всего желудочно-кишечного тракта; технологичность в производстве; стабильность при хранении; экологическую безопасность. При обсуждении вопросов биологической активности бацилл можно отметить их способность выделять в культуральную жидкость сигнальные молекулы, иммуноактивные протеины [55] и биологически активные пептиды, в число которых входят не только пептидные антибиотики, но и гормоноподобные вещества. В экстрактах клеток и культуральной жидкости Bacillus subtilis показано присутствие соматостатин-подобных пептидов [34]. Ранее было обнаружено, что некоторые синтетические аналоги гормона соматостатина выступают опосредованными антагонистами по отношению к этому гормону, поскольку вызывают аутоиммунную нейтрализацию эндогенного соматостатина, в результате чего снижается его ингибирующее действие на гормон роста, инсулин и гастрин, и появляется ростостимулирующий эффект [45, 53]. Исследования показали, что пробиотические добавки на основе спорообразующих бактерий существенно улучшают переваримость корма у свиней. Результаты опытов подтверждают, что поросята, имеющие микробиоту, сбалансированную в результате применения термически стабильных пробиотиков, имеют лучшую конверсию корма и более высокие приросты живой массы [7].

Особенности физиологии и рационов сельскохозяйственных животных учтены в рецептуре биологически активного пробиотического препарата Ферм-КМ. Технология получения препарата включает неполное сбраживание свекловичного жома пробиотической ассоциацией; конечный продукт состоит из биомассы пробиотиков, продуктов их метаболизма, продуктов биотрансформации фитосубстрата и фитокомпонентов. В состав бактериальной композиции препарата Ферм-КМ включены живые клетки трех штаммов Bacillus subtillis, Bacillus licheniformis, а также комплекс молочнокислых бактерий. Оптимальной является композиция депонированных в ВКПМ штаммов: Bacillus subtillis В-8130, Bacillus subtillis 188, Bacillus subtillis 44-р, Bacillus licheniformis МС-12, демонстрирующих пробиотический эффект в сочетании с эндоглюканазной, протеолитической, и амилазной активностями. В препарате содержится набор важнейших ферментов: целлюлаза, эндоглюканаза, амилаза, комплекс протеаз, липаза, органические кислоты, биологически активные вещества, витамины и аминокислоты, иммуноактивные пептиды — продукты метаболизма пробиотиков. В препарат входят фиточастицы, являющиеся клетчатковым микросорбентом, пребиотики — пектины свеклы [33]. Ферм-КМ — это уникальный препарат, содержащий не только комплекс специально подобранных микроорганизмов, но также биотрансформированный фитосорбент и продукты твердофазного сбраживания растительного субстрата (в том числе, иммуноактивные пептиды [34], стимулирующие неспецифический иммунитет и процессы пищеварения). Пробиотические бактерии отличаются повышенной жизнеспособностью и устойчивостью к неблагоприятным условиям окружающей среды, поскольку находятся в виде биопленки на фитоносителе (рисунок).

Сброженный свекловичный жом с биопленкой бактерий B. subtilis В-8130. Вегетативные клетки бациллы на фитоносителе отмечены стрелками. Сканирующая электронная микроскопия, 10000×

Как уже отмечено выше, биологическая эффективность пробиотических препаратов определяется не только свойствами используемых штаммов микроорганизмов, но также технологией их получения. Новое перспективное направление, используемое в технологии производства препарата Ферм-КМ — получение биологически активной кормовой добавки, содержащей биопленку пробиотических бактерий на поверхности фитосубстрата, что позволяет микроорганизмам сохранять жизнеспособность при высушивании, при гранулировании комбикормов и выживать при комбинировании с некоторыми кормовыми антибиотиками. Исследования показали, что в биопленке по-иному, в сравнении с чистыми культурами бактерий, происходят их физиологические процессы, в том числе продукция метаболитов и биологически активных веществ [4, 19]. Особое значение имеют сигнальные вещества, обеспечивающие взаимодействие клеток в биопленке. По-видимому, такие вещества могут служить аналогами регуляторных молекул животного организма. Можно предположить, что соматостатин-подобный пептид, обнаруженный при развитии некоторых штаммов Bacillus subtilis, является фактором межклеточной коммуникации. Известно, что грамположительные бактерии осуществляют коммуникации, используя олигопептидные сигнальные молекулы [6]. Согласно симбиогенетической теории происхождения эукариот многие сигнальные молекулы, общие для бактерий и эукариот, у первых выполняли синэкологические функции (обеспечение взаимодействия клетки с другими членами прокариотного сообщества), а у вторых стали обеспечивать согласованную работу клеток многоклеточного организма [17]. Поэтому препараты, основанные на твердофазных процессах и получении биопленки пробиотиков, отличаются от препаратов-аналогов наличием сигнальных веществ бактериального происхождения, влияющих на гомеостаз многоклеточных организмов-хозяев. Получение пробиотических препаратов в виде биопленки — новое направление биотехнологии.

Препарат разработан специалистами ООО «НТЦ БИО» совместно с Институтом проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН [32]. ДБА Ферм-КМ позволяет на 50-70 % уменьшить применение распространенных импортных ферментных препаратов и антибиотиков, применяемых для лечения заболеваний ЖКТ. Ферм КМ отличается невысокой стоимостью и полностью ориентирован на зерновую специфику российских комбикормов. Препарат обеспечивает высокоэффективное использование имеющихся кормов, увеличивает конверсию корма, прирост живой массы, значительно улучшает переваривание животными, птицей и рыбами некрахмалистых полисахаридов из различных видов зерна, повышает резистентность организма к неблагоприятным факторам [20, 24]. Испытания препарата в ПФ «Приосколье» показали, что применение Ферм-КМ повышает сохранность цыплят-бройлеров на 0,7 %, увеличивает суточный привес живой массы тела на 2,6 %, увеличивает конверсию корма на 3 %. Влияние Ферм-КМ на яйценоскость продемонстрировано в птицекомплексе ЗАО «Реал-Инвест»; при этом отмечено, что одним из главных критериев улучшения производственных показателей было не только увеличение общего количества товарного яйца (табл. 2), но и его качество. Количество некондиционного яйца сократилось с 3500 до 430 штук в день. Куры-несушки стали вести себя более спокойно и почти не реагировали на присутствие людей (более 3-х человек). Патологоанатомическое вскрытие показало, что уже после 14 дней приема препарата с кормом полностью отсутствовали признаки катарального и геморрагического воспаления тонкого отдела кишечника, в 3 раза сократилось выпадение яйцеводов кур, сами яйцеводы были чистого белого цвета, что свидетельствует о положительном действии препарата Ферм-КМ на продуктивность птицы. Опыт проведен на 73000 несушек кросса Хайсекс коричневый в возрасте на старте — 329 дней (т.е. вторая фаза продуктивности).

Проведенная в условиях физиологического двора ГНУ ВИЖа и ООО «Вёрдазернопродукт» Рязанской области на доращиваемых поросятах-аналогах серия лабораторных и научно-хозяйственных опытов выявила перспективность применения Ферм-КМ в практике кормления свиней. Для определения приростов живой массы (абсолютного, среднесуточного) проводили ежедекадное индивидуальное взвешивание животных. Полученные в опыте материалы были обработаны биометрически с использованием t-критерия Стьюдента. Некоторые результаты представлены в табл. 3. Выявлено, что на фоне достоверного увеличения интенсивности роста поросят, выращиваемых с 36- до 75-дневного возраста, при включении в состав комбикорма ферментно-пробиотического препарата Ферм-КМ, были снижены затраты кормов и энергии на единицу прироста (на 4,9 % по сравнению с контролем). Включение в комбикорма Ферм-КМ обеспечило благоприятные кормовые условия для получения более высоких показателей продуктивности поросят за счет улучшения конверсии питательных веществ корма в прирост живой массы.

Таблица 2

Производственные показатели в опыте с Ферм-КМ в рационе кур-несушек

Таблица 3

Динамика роста подопытных поросят (M ± m, n = 75)

Достоверно при: * — р ≤ 0,05.

Выводы

Новое поколение кормовых пробиотических препаратов в виде биопленки на фито-носителе отличается высокой биологической активностью и перспективно для применения в рационах животных. Затраты, связанные с приобретением препаратов и их использованием, окупаются дополнительным приростом живой массы, лучшей сохранностью поголовья, лучшей конверсией корма, получением экологически чистой продукции животноводства.

При финансовой поддержке Минобрнауки РФ, ГК № 16.М04.11.0012.

Рецензенты:

Нетрусов А.И., д.б.н., профессор, зав. кафедрой микробиологии Биологического факультета МГУ им. В.М. Ломоносова, г. Москва;

Пономарев С.В., д.б.н.,, профессор, зав. кафедрой «Аквакультура и водные биоресурсы» ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет», г. Астрахань.

Работа поступила в редакцию 02.11.2011.

Библиографическая ссылка

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

Современные пробиотики: виды и польза

Роль пробиотиков для организма человека трудно переоценить. Современные препараты с живыми бифидо- и лактобактериями помогают восстановить баланс полезной и факультативной микрофлоры кишечника, избавиться от расстройств пищеварения, укрепить иммунитет. Узнайте, как выбрать подходящее средство, которое принесет максимум пользы.

Виды пробиотиков

В зависимости от времени создания и количества полезных бактерий в составе выделяют следующие современные пробиотики:

• первого поколения — классические средства с одним штаммом микроорганизмов;
• второго поколения — самоэлиминирующиеся антагонисты;
• третьего поколения — препараты с несколькими компонентами, включающие от 2 до 30 штаммов бактерий или разные виды микробов;
• четвертого поколения — синбиотики, которые дополнительно обогащены ингредиентами для стимуляции размножения и метаболической активности бифидо- и лактокультур;
• пятого поколения — поликомпонентные препараты с несколькими видами бактерий, обладающих высокой выживаемостью в кислой среде.

К мульти-пробиотикам последнего поколения относят препараты БАК-СЕТ беби и БАК-СЕТ форте. Они обладают сбалансированным составом и клинически доказанной эффективностью. Комплексы содержат живые бифидо- и лактобактерии, которые без труда выживают в кислой среде желудка и беспрепятственно проникают в кишечник. Современные пробиотики не требуют хранения в холодильнике и выпускаются в удобных упаковках.

Когда и как принимать пробиотики?

Прием пробиотиков показан при дисбактериозе, вызванном антибактериальной терапией. Полезные бактерии, входящие в состав препаратов, способны:

• тормозить рост вредных микробов,
• разрушать токсины,
• продуцировать витамины группы В,
• укреплять слизистую стенок кишечника,
• стимулировать синтез противовирусных антител.

Принимать современные пробиотики из линейки БАК-СЕТ необходимо в строгом соответствии с инструкцией. При регулярном применении комплексы помогут укрепить естественную иммунную защиту, предотвратить дисбактериоз и улучшить протекание обменных процессов в организме. Перед покупкой препарата проконсультируйтесь с врачом.

Дисбактериоз – несуществующий диагноз?

Бытует мнение, что дисбактериоз – несуществующее заболевание, за рубежом такого диагноза нет в-принципе, и непонятно, стоит ли его лечить вообще. Давайте разберемся.

Дисбактериоз

Синбиотики Immune care VISION

Синбиотики Immune care способствуют нормализации иммунных (в том числе и аллергических) реакций, обеспечивают созревание иммунных клеток и их способность распознавать патогены.

Продукт содержит набор из 9 наиболее эффективных бактериальных штаммов, направленных на оздоровление пищеварительного тракта.

Immune care повышает сопротивляемость организма простудным заболеваниям, защищает от инфекций верхних дыхательных путей и улучшает микрофлору кожи, сокращая вероятность появления акне. Он также восстанавливает естественный биологический барьер в кишечнике и снижает проницаемость аллергенов, патогенов и токсинов, уменьшая чувствительность иммунных клеток к аллергенам и аллергические реакции. 

Синбиотики нового поколения омолаживает организм на клеточном уровне, нормализует клеточный метаболизм, обеспечивает доставку питательных веществ к клеткам, восстанавливает здоровый баланс микрофлоры кишечника, способствует выведению побочных продуктов биохимических реакций.

Правильно подобранные компоненты Immune care помогают улучшить работу пищеварительной системы и обеспечивают выживаемость и активность живых пробиотических культур даже в самой неблагоприятной среде.

Применение Immune care дает превосходный результат – это сбалансированный микробиом, естественная защита желудочно-кишечного тракта, сильный иммунитет, здоровое пищеварение и отличное самочувствие.

Продукция разрабатывалась научно-исследовательской лабораторией DEM4, совместно с крупнейшим в Европе концерном Arkopharma (Франция) и BioCare Copenhagen (Дания).

Только общая работа ученых из разных стран была способна создать такую уникальную программу.

Синбиотики Immune care созданы на основе и в соответствии со стандартами GMP, ISO 9001, HACCP и ISO 22000, которым соответствуют все предприятия, задействованные в цепочке наших партнёров, создавших уникальный продукт.

* ЭПЦ: Эталонная пищевая ценность 
** КОЕ: колониеобразующие единицы 
 

• Поддерживает работу иммунной системы, уменьшает аллергические реакции, восстанавливает баланс микрофлоры
• Помогает нормализовать иммунные (в том числе аллергические) реакции
• Обеспечивает зрелость иммунных клеток и способность распознавать патогены
• Повышает сопротивляемость всем видам инфекций
• Облегчает аллергические реакции
• Улучшает микрофлору кожи и уменьшает вероятность акне
• Восстанавливает естественный биологический барьер в кишечнике и уменьшает возможность проникновения аллергенов, патогенных микроорганизмов, и токсинов
• Способствует здоровому балансу микрофлоры в кишечнике и во всем организме
• Нормализует функции желудочно-кишечного тракта и уменьшает симптомы аллергии

*Не является лекарственным средством
*Результат индивидуален и не может быть гарантирован в 100% случаев, так как зависит от личных особенностей организма

• Активизирует образование и созревание иммунных клеток (лимфоциты, макрофаги и др.) 
• Активизируют иммунные клетки-килеры которые непосредственно борются с патогенными бактериями. 

• Создают биопленку, то есть выделяют биосурфактанты, которые не позволяют закрепиться патогенным микроорганизма.
• Выделяют опасные для патогенов соединения.
• Побеждает их в борьбе за питание и пространство. 

• Выделяет белки которые продлевает срок жизни эпителиальных клеток.
• Укрепляют межклеточные соединения. 
• Подавляют воспалительные процессы и защищают от их распространения по организму. 

Продукты пробиотиков делятся на разные поколения по используемым технологиям производства, обеспечивающим жизнеспособность и действенность препаратов.

Крайне важна форма приема пробиотиков. Таблетки ― одна из худших форм доставки, поскольку бактерии прессуются под высоким давлением и теплом, которые могут их повредить. В жидкой форме бактерии находятся во влажной среде, то есть в активной форме, «бодрствуют». Такие условия стимулируют их рост и размножение даже до попадания в организм, поэтому их жизнеспособность для борьбы за выживание в организме стремительно падает.

Лучшая форма доставки пробиотиков в организм ― в виде порошка, произведенного с использованием технологии криозащиты, которая применяется при создании синбиотиков Immune care.

Криотехнология производства запатентована учеными из Висконсинского университета (США). Это наиболее прогрессивная и эффективная технология, обеспечивающая устойчивость бактерий к желудочной кислоте, пищеварительным и желчным солям (обычно в желудке погибают 99% всех бактерий). Это достигается за счет микрокапсулирования (бактерии покрываются защитным слоем полисахарида) и лиофилизации (бактерии замораживаются при низких температурах, помещаются в вакуум и из них удаляется влага), что обеспечивает 80-90%-ную их сохраняемость внутри организма. В результате они могут естественным путем «законсервироваться» и в таком «сонном состоянии» находиться в течение продолжительного времени, пока не попадут в организм. Дополнительная защита осуществляется благодаря саше, которое не пропускает ни воздух, ни влагу, ни свет и обеспечивает долговременное сохранение жизнеспособности бактерий. А упаковка продукта в азотной среде препятствует попаданию влаги внутрь саше и защищает бактерии от ее воздействия.

Фруктоолигосахариды (ФОС) – это сахара (фруктоза и глюкоза), связанные между собой в виде цепей (коротких и средних). Короткие цепи ФОС – это неразветвленные конструкции из 9 или меньше молекул фруктозы. Легко растворяются в воде (лучше, чем сахароза), не кристаллизуются.

В то время как простые углеводы быстро перевариваются человеческим организмом, с фруктоолигосахаридами не все так просто. В человеческих телах нет фермента, способного расщепить ФОС. Поэтому они, подобно клетчатке, нетронутыми проходят через верхнюю часть пищеварительного тракта. Переваривание олигофруктозы начинается только в толстой кишке, где бактерии и необходимые ферменты начинают расщеплять ФОС и использовать их в качестве корма для себя. Таким образом, фруктоолигосахариды служат «удобрением» для некоторых штаммов полезных бактерий, живущих в кишечнике.

Влияние полезной микрофлоры кишечника распространяется не только в пределах толстой кишки. От этих микроорганизмов зависит работоспособность иммунной системы, правильная работа пищеварительных органов, здоровье эпителия, контроль за плохими бактериями в организме.

Но помимо поддержания полезной микрофлоры, фруктоолигосахариды способствуют всасыванию кальция. Эта способность ФОС определенно важна для женщин после менопаузы, поскольку они находятся в зоне риска развития остеопороза и повышенной ломкости костей.

Регулярное потребление олигосахаридов важно для поддержания минерального баланса.

Польза от Фруктоолигосахаридов (ФОС):

• стимулирует рост полезных бактерий;
• предотвращает дисбактериоз;
• обогащает рацион клетчаткой;
• улучшает пищеварение;
• устраняет запоры и раздражение кишечника;
• защищает от рака;
• выводит из организма шлаки, токсины, тяжелые металлы, радионуклиды;
• укрепляет иммунитет;
• служит низкокалорийным дополнением к пище;
• улучшает усвоение магния и кальция;
• нормализирует гормональный баланс.

Бифидобактерии лактис в процессе жизнедеятельности вырабатывают ряд органических кислот. В основном, это уксусная и молочная кислоты (в молярном отношении 3:2), а также муравьиная и янтарная. Бифидобактерии синтезируют аминокислоты, белки, витамины В1, В2 (рибофлавин), В6 (пиридоксин), В12, викасол, никотиновую и фолиевую кислоты.

Бифидобактерии — важнейший представитель микрофлоры человека, как в количественном отношении — их удельный весу в составе микробиоценозов составляет от 85 до 98 %, так и в качественном, учитывая их роль в поддержании гомеостаза организма человека. Бифидобактериям принадлежит ведущая роль в нормализации микробиоценоза кишечника, поддержании неспецифической резистентности организма, улучшении процессов всасывания и гидролиза жиров, белкового и минерального обмена, синтезе биологически активных веществ, в том числе, витаминов. Дефицит бифидобактерий является одним из патогенетических факторов длительных кишечных нарушений у детей и взрослых, ведущий к формированию хронических расстройств пищеварения.

Они образуют большинство кишечной микрофлоры и обеспечивают колонизационную резистентность, ферментативную, антитоксическую, иммунную, метаболическую и другие функции толстой кишки. Непосредственно контактируя с энтероцитами, бифидобактерии (как и лактобактерии) стимулируют механизмы защиты организма человека, в том числе увеличение скорости регенерации слизистой оболочки, влияют на синтез антител к родственным, но обладающим патогенными свойствами микроорганизмам, активируют фагоцитоз, а также синтез лизоцима, интерферонов и цитокинов. 

Лактобактерии рамнозус ГГ (Lactobacillus GG) был выделен из кишечника здорового человека в 1983 и запатентован в 1985 году Шервудом Горбачом и Барри Голдиным. Символы «GG» в наименовании штамма взяты от первых букв их фамилий. В своём патенте, а также в позднейших публикациях, Горбач и Голдин отмечают, что данный штамм является устойчивым к воздействию кислоты желудочного сока и желчи и, поэтому, после перорального введения бактерии достигают толстой кишки живыми.

L. rhamnosus может лечить и предотвращать диарею, вызванную антибиотиками, используемыми для лечения H.pylori — бактерий, ответственных за язву желудка — у детей и взрослых. Lactobacillus rhamnosus GG может помочь предотвратить иммунологические заболевания, такие как рассеянный склероз, ревматоидный артрит , диабет типа 2, волчанка, псориаз и болезнь Крона. Также может улучшить иммунную систему слизистой оболочки кишечника за счет увеличения антитела IgA (+), которое играет значительную роль в поддержании иммунитета слизистой кишечника. Кроме того, L rhamnosus GG  увеличивает клетки, продуцирующие цитокины, которые также улучшают иммунную систему.

Лактобактерии казеи – Lactobacillus casei (L.casei) – вид грамположительных молочнокислых палочкообразных анаэробных неспорообразующих бактерий, которые являются нормальными представителями ротовой полости, кишечника, вульвы и влагалища человека и в норме присутствуют в ЖКТ человека. В толстом кишечнике здоровых взрослых людей молочнокислые палочки L.casei составляет в среднем 9,5%. L.casei, L.acidophilus, L.plantarum, L.brevis в сочетании с бифидобактериями составляют основное звено микрофлоры кишечника, коррелирующее с феноменом долгожительства у одной из этнических групп населения Кавказа. В этом случае количество лактобацилл с возрастом не уменьшается и сохраняется на высоком уровне даже у лиц старше 95 лет.

L.casei продуцируют молочную кислоту, которая позволяет снижать уровень кислотности в пищеварительной системе и подавляет рост условно-патогенных микроорганизмов. Лактобактерии казеи улучшают регулярность дефекации (стула), поддерживают уровень кислотности желудка, предупреждают развитие диареи и воспалительных заболеваний кишечника, уменьшают аллергические проявления при непереносимости лактозы, облегчают запоры, обладают модулирующим действием на иммунную систему, уменьшают риск развития диареи, вызванной антибиотиками. Прием L.casei показан и особенно полезен при лечении диареи у младенцев и маленьких детей, вызванной ротавирусной инфекцией.

Lactobacillus Reuteri является одной из самых наиболее хорошо изученных пробиотических лактобактерий в мире. Проведено более 150 клинических исследований с этими бактериями, где доказана их эффективность и безопасность. Это единственный вид Lactobacillus, который синтезирует противомикробное вещество Реутерин, обладающий широким спектром активности в отношении патогенных бактерий, в том числе клостридий, грибов и простейших.

Лактобактерии реутери – уникальные микроорганизмы, для которых желудочно-кишечный тракт человека является естественной средой обитания. Доказано положительное влияние этого пробиотика на пищеварительную и иммунную систему. Лактобактерии Lactobacillus Reuteri продемонстрировали благотворное влияние при общих нарушениях пищеварения, таких как диарея, запоры, газообразование и, как следствие, вздутие живота.

Кроме того, лактобактерии Lactobacillus Reuteri оказывают иммуномодулирующий эффект, поддерживая иммунитет на высоком уровне.

Лактобактерии параказеи стимулируют механизмы защиты организма человека, в том числе увеличение скорости регенерации слизистой оболочки, влияют на синтез антител к родственным, но обладающим патогенными свойствами микроорганизмам, активируют фагоцитоз, а также синтез лизоцима, интерферонов и цитокинов. Лактобактерии продуцируют ряд гидролитических ферментов, в частности, лактазу, расщепляющую лактозу (молочный сахар) и препятствующую развитию лактазной недостаточности. Лактобактерии поддерживают кислотность толстой кишки на уровне 5,5–5,6 рН. 

Лактобактерии параказеи являются превалирующим типом нормальной микрофлоры вульвы и влагалища (106- 109  КОЕ/мл отделяемого). Главные функции лактобактерий во влагалище — поддерживать кислую среду и подавлять рост условно-патогенных микроорганизмов.

Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий широким спектром антагонистической активности по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам, в том числе по отношению к дрожжевым грибам рода Candida.

Противомикробные вещества, которые вырабатывают лактобактерии плантарум подавляют широкий спектр грамположительных и грамотрицательных бактерий. Они даже предложены в качестве средства устранения неприятного запаха ног, поскольку подавляют развитие бактерий, которые вызывают этот неприятных запах.

Лактобактерии плантарум обладают высокой антиоксидантной активностью, а также помогает поддерживать проницаемость кишечника. Они способны подавлять рост газообразующих бактерий в кишечнике и могут принести пользу лицам, страдающим от синдрома раздраженного кишечника. При употреблении лактобактерий плантарум в кишечнике увеличивается численность другого вида полезных и необходимых для здоровья бактерий – бифидобактерий.

Кроме того, было обнаружено, что лактобактерии плантарум могут быть важным вспомогательным элементом в терапии депрессии, стрессовых и тревожных состояний, поскольку оказалось, что их применение повышает уровень дофамина (гормон удовольствия) и серотонина (гормон счастья).

Lactobacillus salivarius способствуют укреплению иммунитета, снижению риска развития простуды и гриппа, увеличению адаптационных возможностей при стрессе, нерациональном питании. Кроме того бактерии нормализуют состав микрофлоры кишечника, способствуют снижению риска развития кишечных расстройств (диарея, запоры, вздутие живота и др.). В период эпидемий, при ослабленном иммунитете позволяет нормализовать баланс микрофлоры кишечника и укрепить иммунитет.

Lactobacillus acidophilus – ацидофильная палочка, лактобактерия, которая довольно широко используется не только в пищевой промышленности, но и в фармакологии. Попадая в организм человека, ацидофильная палочка хорошо приживается в кишечнике, в процессе ферментации лактозы, она вырабатывает большое количество молочной кислоты (считается одной из сильнейших кислотообразователей), продуцирует естественные антибиотические вещества (безвредные для человека, в том числе и для детей), создает условия, в которых не могут выживать большинство видов патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Сама же бактерия ацидофильной палочки является очень жизнестойкой, она способна выживать в более кислых средах, чем другие полезные бактерии, она устойчива ко многим лекарственным антибиотикам. Данное свойство очень ценно для человека, поскольку ацидофильные продукты способны сохранять микрофлору кишечника во время и после приёма антибиотиков и радиотерапии.

Bifidobacterium breve поддерживает функцию толстой кишки, облегчает запор и уменьшает метеоризм, вздутие живота и диарею. Штамм B. breve способствует улучшению состояния иммунной системы. Bifidobacterium breve также оказалась эффективной в борьбе с кандидозом в кишечнике у пожилых людей, ведь помогает предотвратить распространение кандидоза на другие участки тела и органы. Исследователи предполагают, что много случаев синдрома раздраженного кишечника могут быть результатом заражения грибом Candida. Основная работа Bifidobacterium breve заключается в ферментации олигосахаридов и производстве уксусной и молочной кислоты, которые имеют переваривать растительные волокна, трудно перевариваются в верхних отделах ЖКТ. Это главное преимущество Bifidobacterium breve.

Витамин B5 (пантотеновая кислота или пантотенат кальция) относится к водорастворимым витаминам, его основные полезные свойства – помощь в выработке клеточной энергии.

Витамин B5 принимает участие в формировании антител, улучшает усвояемость других витаминов организмом, стимулирует выработку гормонов надпочечников, благодаря чему соединение применяется для лечения и профилактики колитов, артритов, аллергических состояний и заболеваний сердечно-сосудистой системы. Витамин B5 способствует синтезу в коре надпочечников важных веществ глюкокортикоидов, которые помогают ликвидировать любые воспалительные процессы, отвечают за выработку антител и психо-эмоциональное состояние. Кора надпочечников является наиболее работоспособной из всех желез организма. Для полноценной работы ей необходимы большие запасы витамина B5, чтобы успешно справляться со всеми проблемами: стрессами, воспалительными процессами и патогенными микроорганизмами.

Рекомендации по применению: Взрослым принимать 1-2 пакета-саше в сутки во время еды, запивая стаканом воды. Продолжительность приема 1 месяц. При необходимости прием можно повторить. 

Условия хранения: Хранить в сухом, защищенном от света и недоступном для детей месте, при температуре не выше 25°С.

Бессережнов А. С. «Унибактер» БАД Синбиотик (пробиотик+пребиотик) нового поколения. Желудок. Кишечник. Дисбактериоз. Иммунитет. 60 кап. 500 мг., производитель , описание

Проверить поступление новых отзывов

Татьяна Б.

12 Января 2021 г. (вторник)

Плюсы: Принимаю не первый раз. Покупала у Соколинского. Работает.

Варго Светлана

10 Января 2021 г. (воскресенье)

Комментарий: заходила на сайт производителя. прочитала много полезного про этот препарат. Практически все отзывы хорошие. По составу бактерий уникальный.
Плюсы: содержит 13 видов живых бактерий, для восстановления микрофлоры кишечника очень хорошо. Можно применять детям с 5 лет.
Минусы: высокая цена

Пользователь предпочёл скрыть свои данные

7 Января 2021 г. (четверг)

Комментарий: идеальный, широчайший набор штаммов и дополняющих веществ. просто лучший препарат, особенно на фоне Линекса с его скупыми тремя штаммами.
Плюсы: лучший набор штаммов
Минусы: таблетки непросто проглотить если без воды

Алла Г.

1 Января 2021 г. (пятница)

Плюсы: очень действенный препарат, я осталась довольна. после антибиотиков были прблемы, с ним почувствовала облегчение
Минусы: не заметила

Пользователь предпочёл скрыть свои данные

31 Декабря 2020 г. (четверг)

Комментарий: Мой организм плохо воспринял данный препарат
Плюсы: Положительных изменений не заметил
Минусы: Постоянные газы и бурление в животе

Евгения

27 Декабря 2020 г. (воскресенье)

Комментарий: Улучшилась работа ЖКТ после нескольких курсов
Плюсы: Есть Пребиотик
Минусы: Нет

Валерий

26 Декабря 2020 г. (суббота)

Комментарий: Чудес не жду, но посмотрим…
Плюсы: В капсулах, удобно принимать
Минусы: Пока не понял

Павел В.

24 Декабря 2020 г. (четверг)

Комментарий: неделю попил появились улучшение
Плюсы: хорошее средство

Татьяна В.

23 Декабря 2020 г. (среда)

Комментарий: В первый раз я узнала об этом препарате, когда мне удалили желчный пузырь, в котором были камни. Я увидела его на сайте, но он был достаточно дорогой и платная доставка, я не стала его покупать, а потом, я увидела его на Озоне и цена была на 500 руб меньше, я сразу купила на курс 3 баночки. Во первых, конечно, нужно держать диету и не употреблять алкоголь, иначе все будет без толку. Я ем много чего, диета, это не означает, исключить абсолютно все, я ем просто маленькими порциями и конечно не переедаю. Чувствую себя на все 100%. Рекомендую хотя-бы раз в год проводить такой курс из бифидо бактерий.
Плюсы: Содержит 13 видов живых полезных бактерий для микрофлоры кишечника
Минусы: Нет

Елена Ж.

23 Декабря 2020 г. (среда)

Комментарий: заказываю сыну не первый раз,ему нравится больше всех других производителей.
Плюсы: очень хорошие ощущения в кишечнике
Минусы: нет

Препарат Унибактер – изобретение известного отечественного микробиолога А.С.Бессерженова – является ведущим представителем группы биодобавок под названием синбиотики. Он содержит набор естественных полезных бактерий в строго сбалансированном составе. Благодаря этому препарат не только восстанавливает нарушенную микрофлору, но и активно защищает организм человека от атак вредных микробов и демонстрирует общеоздоровительные эффекты.Показания:Дисбактериозы различной этиологии;Хронические заболевания желудочно-кишечного тракта: гастриты, колиты, язва желудка и двенадцатиперстной кишки, СРК – синдром раздражённого кишечника, а также панкреатит, холецистит и гепатиты;Хронические запоры различной этиологии;Острые кишечные инфекции (шигеллез, сальмонеллез, стафилококковый энтероколит, ротовирусная инфекция и др.), синдром мальабсорбции;Нормализация функций кишечника у лиц пожилого и старческого возраста;В качестве профилактики госпитальной инфекции;Коррекция микрофлоры перед операциями на кишечнике, печени, поджелудочной железе;Профилактика послеоперационных инфекционных осложнений;Поддержка иммунитета и восстановление микрофлоры, в том числе, после радио- и химиотерапии;В сочетанной терапии острых и хронических воспалительных заболеваний урогенитального трактаХронические воспалительные заболевания кожи;Атопический дерматит, диатез, крапивница, пищевые и другие виды аллергии;При назначении противомикробных лекарственных средств, гормонов и НПВП.Способ применения и дозы:При приеме детьми в возрасте 6-14 лет рекомендовано соблюдать схему «по 2 капсулы 2 раза в день». Принимать перед едой.Пациентам старше 14 лет следует увеличить дозу до 2 капсул 3 раза в день. При нормальной или сниженной секреции желудочного сока прием проводить до еды, при  повышенной – после (это необходимо, чтобы максимальное количество полезных микробов препарата прошли через кислотный барьер желудка и не погибли). Курс длится 1 месяц, в год надо проводить по 2-3 курса. Если Унибактер принимается на фоне приема антибиотиков, его нужно пить через 2-4 часа после приема таблетки антибактериального препарата. Можно применять во время беременности и лактации.Противопоказания: Индивидуальная непереносимость компонентов продукта. Форма выпуска: 60 капсул весом 500 мг.Содержит не менее 5 млрд. бактерий в 1 капсуле.Условия хранения: Хранение Унибактера должно проводиться в достаточно строгих условиях. Вскрытая баночка хранится в течение не более 20 суток в условиях холодильника. Не вскрытая упаковка годна в течение 24 месяцев с даты изготовления, ее можно хранить при температуре до 18 градусов. 

• Категория: Дисбактериоз, Препараты для ЖКТ
• Форма выпуска: Капсулы
• Страна-изготовитель: Россия
• Вид БАД: Пробиотики и пребиотики
• Назначение БАД: Для желудка и кишечника, Иммунитет

Пять признаков современного синбиотика для детей » Фармвестник

1. Сочетание пробиотиков и пребиотиков

По определению ВОЗ, пробиотиками называются живые микроорганизмы, применение которых в адекватных количествах оказывает оздоравливающий эффект на организм человека. Наиболее значимыми пробиотиками считаются лакто- и бифидобактерии, играющие основную роль в поддержании нормальной кишечной флоры.

Пребиотики — это своеобразная пища для полезных бактерий, представляющая собой невсасывающиеся вещества, которые стимулируют необходимый рост и активность кишечной микрофлоры. К пребиотикам относятся фруктоолигосахариды, лактулоза, инулин и др.

Продукты, содержащие комбинацию пробиотиков и пребиотиков, взаимно усиливающих воздействие на физиологические функции организма и процессы обмена веществ, называют синбиотиками. Именно синбиотикам педиатры сейчас отдают предпочтение при восстановлении нарушенной микрофлоры у ребенка.

2. Максимальное разнообразие полезных бактерий и их оптимальная концентрация

В состав синбиотиков может входить от 2 до 9 различных штаммов бифидо- и лактобактерий, свойственных нормальной микрофлоре кишечника человека. Синбиотик, содержащий максимальное количество микроорганизмов, наиболее эффективно обеспечивает нормализацию микрофлоры как в тонком, так и в толстом кишечнике.

Другой важный показатель — концентрация бифидо- и лактобактерий. Она должна быть оптимальной, так как, к примеру, бифидобактерии в высоких концентрациях в ряде случаев могут провоцировать запор у детей младшего возраста.

Среди синбиотиков, предназначенных для детей, оптимальный состав как в количественном, так и в видовом плане имеет новый препарат, содержащий 9 специально подобранных штаммов полезных бактерий, в том числе L.rhamnosus GG, в концентрации 1 млрд КОЕ (колониеобразующих единиц бактерий) и пребиотический компонент — фруктоолигосахариды.

3. Инновационные технологии защиты компонентов

Для восстановления микрофлоры важно, чтобы полезные бактерии попадали точно к очагу дисбиотических изменений, а именно — в толстый кишечник. Однако лишь небольшое число лакто- и бифидобактерий обладают кислотоустойчивостью. Большинство микроорганизмов погибают под действием кислой среды желудка, солей желчных кислот и ферментов поджелудочной железы, что заметно уменьшает эффективность действия синбиотика.

В этой связи особый интерес представляет инновационная технология MICRO MURE®, которая обеспечивает двойную защиту гранул от разрушительного воздействия внутренних и внешних факторов. Оболочка из коллоидных полисахаридов предохраняет пробиотический компонент от воздействия влаги и высоких температур, а белковая оболочка позволяет без потери качественного и количественного состава пройти три естественных барьера: кислую среду желудка, соли желчных кислот, пищеварительные ферменты.

4. Высокий профиль безопасности

Использование синбиотиков в настоящее время можно считать наиболее изученным направлением в коррекции микрофлоры кишечника у детей. Преимуществом обладают препараты, которые имеют безопасный состав, разработанный в соответствии с возрастом ребенка, высокие органолептические свойства и удобную для применения форму (например, саше с микроскопическими гранулами). Желательно также, чтобы препарат имел короткий лечебный курс (10 дней) и низкую частоту приема (1—2 раза в день). Детям с лактазной недостаточностью требуются продукты, не содержащие лактозу. Содержание казеина и консервантов не допускается.

5. Возможность хранения без холодильника

Некоторые препараты из последнего поколения синбиотиков благодаря современным технологиям можно хранить при комнатной температуре. Это гарантирует сохранность полезных бактерий как при транспортировке и хранении в аптеке, так и при использовании дома или в поездке.

Пробиофлор комплекс, №30 | FBS

«Пробиофлор Комплекс» — это инновационный синбиотик нового поколения в капсулах для многофакторной коррекции нарушений микрофлоры кишечника.

В состав препарата входит 10 эффективных штаммов-пробиотиков бифидобактерий Bifidobacterium и лактобактерий Lactobacillus, которые усиливают и дополняют действие друг друга, а также целый комплекс пребиотиков – аскорбиновая кислота (витамин С), лактулоза и микрокристаллическая целлюлоза.

В каждом грамме синбиотика «Пробифлор Комплекс» содержится миллиард полезных бактерий. Все штаммы, входящие в состав микробиологического консорциума в Пробифлоре, обладают кислотоустойчивостью, стойкостью к воздействию антибиотиков и способствуют эффективному восстановлению микрофлоры кишечника у детей (с 3х лет) и взрослых.

Не требует хранения в холодильнике!!!

Эффекты от приема синбиотика «Пробифлор Комплекс»

• Восполнение дефицита представителей полезной микрофлоры в кишечнике — бифидобактерий, лактобактерий, пропионовокислых бактерий
• Восстановление баланса в микробных сообществах, благодаря чему усиливаются полезные свойства защитных бактерий
• Вытеснение из кишечника условно-патогенных и болезнетворных бактерий
• Очищение кишечника от токсических веществ, аллергенов, канцерогенов
• Улучшение процессов пищеварения, работы ферментных систем, усвоения питательных веществ, витаминов
• Нормализация стула
• Стимуляция иммунитета

Показания к применению синбиотика «Пробифлор Комплекс»

• Дисбактериозы различного происхождения (в т.ч. после лечения антибиотиками, лучевой терапии, химиотерапии и пр.)
• В комплексном лечении кишечных инфекций
• Пищевые отравления
• Производственные интоксикации и отравления различного происхождения
• Хронические заболевания желудочно-кишечного тракта
• Болезни печени и желчевыводящих путей
• В комплексном лечении аллергий
• В комплексном лечении иммунодефицитных состояний
• Авитаминозы
• Нарушения работы кишечника (особенно, запоры)
• Для улучшения работы ферментов
• Для нормализации липидного обмена

Дозировка: Взрослым и детям старше 3 лет по 1 капсуле 1 раз в день во время еды. Детям младше 5 лет содержимое капсулы высыпать в воду или молоко с температурой не выше +40ºС, перемешать и сразу выпить.

Курс: 1 месяц. При необходимости прием повторять 2-3 раза в год.

Условия хранения: в сухом, защищенном от солнечных лучей, недоступном для детей месте, при температуре не выше 25ºС.

Взаимодействие с другими препаратами: при антибактериальной терапии можно применять с первого дня лечения спусть 2-3 часа после приема антибиотиков.

Противопоказания: индивидуальная непереносимость компонентов продукта.

Срок годности — 1 год.

Не содержит гормональных, психотропных и ГМО компонентов.

Пребиотики, синбиотики дают преимущества для напитков

Здоровье кишечника — главная забота потребителей: с 2016 года количество поисковых запросов «микробиом» в Google увеличилось почти вдвое. По мере появления новых исследований роли микробиома в поддержании не только здоровья пищеварительной системы, но также иммунитета, когнитивных функций и метаболизма, интерес будет продолжать расти. .

Продукты с пробиотическими свойствами, такие как кефир и чайный гриб, в настоящее время доминируют на рынке напитков для здоровья кишечника.Бренды выпускают новое поколение готовых к употреблению напитков (RTD) с пребиотиками, а также синбиотиками (как пробиотиками, так и пребиотиками) для удовлетворения потребностей потребителей в области здоровья пищеварительной системы. Однако, прежде чем пребиотики или синбиотики станут столь же повсеместными, как пробиотики, производители напитков должны решить важные проблемы с рецептурой и пищеварением.

Пребиотики: подпитка микробиома

Пребиотики и пробиотики легко спутать, но они играют разные роли в поддержании хорошего пищеварения.Пробиотики — это хорошие бактерии, которые вытесняют вредные бактерии в кишечнике и помогают создать здоровый микробиом. Наиболее распространенными штаммами пробиотических бактерий, используемых в производстве продуктов питания и напитков, являются Lactobacillus и Bifidobacterium .

Пребиотики — это важнейшие неперевариваемые волокна, которые способствуют росту здоровых бактерий, включая пробиотики. К сожалению, иногда популярные пребиотические волокна, такие как инулин, могут вызывать расстройство желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и вздутие живота, из-за чего потребителям сложно включать их в свой здоровый рацион.

Одним из ингредиентов, показанных в неопубликованном исследовании для поддержания здорового микробиома и поддержания здорового уровня глюкозы в крови, является арабиноксилан, пребиотическое пищевое волокно на растительной основе, извлекаемое из клеточных стенок стеблей, листьев и шелухи. Результаты клинического испытания показали, что потребители могут принимать до 12 г / день арабиноксилана (как аррабина от Comet Bio) без отрицательной реакции кишечника или кишечника. Несмотря на свои пребиотические свойства и пользу для здоровья, арабиноксилан ранее не был широко доступен для использования из-за неэффективной технологии экстракции.Благодаря его растворимости, стабильности в растворе и аромату производители напитков могут использовать его для создания продуктов, укрепляя свои требования к пищевой ценности.

Осведомленность потребителей о роли пребиотиков в микробиоме растет, и производители напитков RTD быстро внедряют новые продукты для удовлетворения этого спроса. Бренд функциональных напитков REBBL предлагает линейку игристых тоников с пребиотиками с 6 г пребиотической клетчатки на порцию. Шипучие напитки REBBL могут похвастаться такими вкусовыми профилями, как кола и имбирь куркума, при этом в каждой бутылке содержится всего от 6 до 8 г сахара.Olipop предлагает линейку напитков RTD, содержащих восемь растительных ингредиентов и ингредиентов с клетчаткой, таких как корень лопуха естественного происхождения. LION Dandelion Tea использует корень и лист одуванчика в качестве источника пребиотиков в своей линии детоксикационных и пищеварительных чаев.

Synbiotics: в поисках идеального сочетания

Учитывая симбиотические отношения между пробиотиками и пребиотиками, неудивительно, что синбиотические напитки, содержащие оба ингредиента, становятся следующей большой тенденцией.Считается, что помимо предоставления потребителям более полного варианта режима здоровья кишечника, поставка пребиотиков и пробиотиков в тандеме помогает улучшить активность полезных микроорганизмов в кишечнике. Проще говоря, обеспечение пробиотических бактерий пребиотиком дает бактериям больше шансов на выживание и, таким образом, положительно влияет на микробиом.

Синбиотические напитки представляют собой сложную задачу по составлению рецептур. Производители должны быть осторожны при выборе правильных пробиотических штаммов и пребиотиков для комбинирования.Чтобы действительно быть синбиотическим продуктом, присутствие пребиотика должно улучшать выживаемость пробиотика и его способность колонизировать микробиом. Простое сочетание любого пребиотика и пробиотика не обязательно создает настоящий синбиотический напиток. К счастью для производителей, доступно множество вариантов пребиотических волокон.

Несмотря на трудности с составлением рецептур, несколько компаний, производящих напитки RTD, теперь предлагают на рынке синбиотические напитки. Wonder Drink Kombucha имеет линейку пребиотических чайных грибов, которые включают в себя его запатентованную культуру и органические пребиотические кукурузные волокна.Wonder Drink утверждает, что его пребиотик питает пробиотические бактерии, «увеличивая количество полезных бактерий и заряжая их энергией». Он также утверждает, что нормализует работу кишечника, восстанавливая баланс между хорошими и плохими бактериями, что дает хорошим бактериям «конкурентное преимущество» перед плохими бактериями в кишечнике.

Golive предлагает линейку пробиотических и пребиотических вод RTD, которые включают «сложную смесь пребиотиков для питания и поддержки здоровья и роста пробиотиков». Он отмечает, что его набор разнообразных и сложных пребиотиков был клинически протестирован с его пробиотическими штаммами, чтобы обеспечить максимальное положительное влияние на пищеварительную, метаболическую и иммунную функции организма.

Ветеранский бренд по здоровью кишечника Activia недавно обновил свою линию Probiotic Dailies, добавив разновидности пребиотической клетчатки со вкусами лимона и имбиря и меда и имбиря. В продуктах на основе йогурта используется формат ежедневных выстрелов, и они обещают «доставлять миллиарды живых и активных пробиотиков с пребиотической клетчаткой для оптимальной эффективности».

Необходимо больше времени, чтобы увидеть, как потребители реагируют на напитки с пребиотиками и синбиотиками, полезными для пищеварения. Оба имеют потенциал быть столь же успешными, как пробиотики, если производители решат проблемы с пищеварением и составлением рецептур.

Лула Меркель — вице-президент Comet Bio и имеет более чем 15-летний опыт работы в агробизнесе и энергетике. Ранее она была директором по развитию проектов в Coskata, она отвечала за разработку и финансирование коммерческих проектов. Она также проработала восемь лет в McKinsey & Co., обслуживая клиентов на стыке химической и агробизнеса, включая транснациональные компании по производству удобрений, агрохимические и пищевые компании.

Пребиотики и синбиотики: к следующему поколению

Мировой рынок овечьего молока и продуктов из него растет из-за более высокого спроса на сыр и традиционные молочные продукты, и в качестве новинки овечье молоко является ингредиентом детских смесей и нутрицевтиков.Целью этого исследования было определение свойств ферментированного овечьего молока, которое сочетает в себе полезные свойства пробиотиков с повышенным содержанием пищевых волокон. Также оценивали влияние применяемой дозы клетчатки черноплодной рябины на рост живых клеток Lactobacillus acidophilus и Lactobacillus rhamnosus в ферментированном овечьем молоке. Овечье молоко с добавлением 0% (контрольный образец), 1,5% и 3,0% волокна аронии ферментировали двумя разными пробиотическими монокультурами L. acidophilus и L.рамнозус. В ферментированном молоке определяли значение pH, синерезис (%), цвет и консистенцию. Кроме того, были выполнены микробиологический анализ и органолептическая оценка. При увеличении дозы клетчатки аронии значение pH снижалось еще до процесса ферментации. После ферментации значения pH молока с клетчаткой были все еще ниже, чем в контрольном образце. Предположительно, L. acidophilus продуцирует больше кислых метаболитов, вызывая более сильное снижение значения pH, чем L.rhamnosus как в контрольном молоке, так и в молоке с добавлением клетчатки. Добавление клетчатки аронии повлияло на стимуляцию роста обоих типов бактерий. В образце молока без добавления клетчатки более значительное количество жизнеспособных клеток было подсчитано для L. acidophilus на 0,5 log КОЕ г⁻¹ больше, чем в молоке, ферментированном L. rhamnosus. Кроме того, в молоке, ферментированном L. acidophilus с 1,5% клетчатки черноплодной рябины (LA1), количество жизнеспособных бактериальных клеток было выше, чем в молоке, ферментированном L.rhamnosus с таким же добавлением клетчатки (LR1). Однако в образце LA3 количество жизнеспособных бактериальных клеток было меньше, чем в образце LR3. Протестированное ферментированное овечье молоко соответствует требованиям Международной молочной федерации относительно количества живых бактериальных клеток для молочных пробиотиков. Добавление волокон черноплодной рябины увеличивало синерезис в каждой группе кисломолочных продуктов, независимо от бактерий, используемых для ферментации. Кроме того, использование волокна привело к значительному снижению яркости, усилению красного цвета и уменьшению желтого цвета.Молоко, ферментированное L. acidophilus, характеризовалось более твердым гелем по сравнению с их аналогами, ферментированными L. rhamnosus. Добавление клетчатки усилило кислый вкус и вкус добавки в обоих типах ферментированного овечьего молока. 1. Введение Спрос на овечье молоко на мировом рынке растет из-за его ценных свойств, таких как более высокое содержание белка, благоприятное содержание жира и лучший источник функциональных биоактивных пептидов, чем коровье молоко. В настоящее время Китай является крупнейшим в мире производителем овечьего молока.В работе Claeys et al. [1], молоко лошади, осла и овцы сравнивалось с грудным молоком, и было показано, что овечье молоко является подходящей альтернативой грудному молоку и детской смеси. Производство овечьего молока в мире составляет около 10,4 млн т [2]. Потребление овечьего молока во всем мире за последние годы выросло и, как ожидается, к 2030 году достигнет уровня 2,7 млн ​​тонн [2]. Быстрое распространение овечьего молока вызвано повышенным интересом к сыру и традиционным молочным продуктам, а также его недавним использованием в качестве ингредиента в детских смесях и нутрицевтических продуктах [3].Мировой рынок функциональных продуктов питания стремительно развивается, и пробиотические продукты представляют собой потенциальную область роста во всем мире. Более того, пробиотики, пребиотики и синбиотики (комбинация пробиотиков и пребиотиков) становятся все более популярными [4]. К перспективным пробиотическим штаммам относятся бактерии рода Lactobacillus, Bifidobacterium и Enterococcus. Lactobacillus GG и вариант L. casei ssp. rhamnosus являются наиболее изученными пробиотиками и показали свою эффективность в снижении тяжести и продолжительности диареи [5].Использование фруктовых волокон или их мякоти также может улучшить выживаемость пробиотических бактерий при хранении в холодильнике благодаря их защитному эффекту и положительному изменению буферной способности [6]. Однако добавление фруктовой мякоти или фруктовых волокон во время производства пробиотического йогурта может быть проблемой, в основном из-за кислотности фруктов и возможного присутствия антимикробных компонентов, а также изменений органолептических свойств и текстуры, и это следует учитывать при производственный процесс [7].В свою очередь, использование волокон черноплодной рябины в качестве пребиотика при производстве молока, ферментированного пробиотическими монокультурами, может способствовать стимуляции или ограничению их роста. Более того, черноплодная рябина является богатым источником полифенольных соединений, каротиноидов, витаминов и биоэлементов. Эти соединения отвечают за антиоксидантные, противораковые, улучшающие кровообращение, радиозащитные и противовоспалительные эффекты аронии [8–11]. Предыдущие исследования показали, что к ферментированному молоку можно добавить 1-3% клетчатки, а при использовании инулина может быть и больше.Настаж и Густав [12] использовали 1%, 2% и 3% пребиотика в йогурте. Sah et al. [13] добавляли 1% клетчатки в виде порошка кожуры ананаса к пробиотическому йогурту. Capela et al. [14] сообщили, что пребиотик «Рафтилоза® Р95», добавленный в количестве 1,5% () к ферментированному молоку, улучшил жизнеспособность комбинированных отобранных организмов (Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus и Bifidobacterium ssp.) На 1,42 log в течение четырех недель. хранение при 4 ° C. Напротив, Guven et al.[15] обнаружили, что добавление 1% инулина улучшило свойства обезжиренного йогурта из обезжиренного молока, которые были сопоставимы с йогуртом из цельного молока. Аналогичное исследование показало, что твердость и яркость обезжиренного йогурта улучшились при добавлении 2% инулина [16]. Oliveira et al. [17] обнаружили, что твердость йогурта увеличивается при добавлении 4% инулина в качестве пребиотика в йогурт. Кроме того, Helal et al. [18] также описали, что кажущаяся вязкость йогурта увеличивается при добавлении инулина в йогурт до 2%.Поэтому целью этого исследования было изучить свойства ферментированного овечьего молока, которое сочетает в себе полезные свойства пробиотиков с повышенным содержанием пищевых волокон. Также оценивали влияние применяемой дозы волокна аронии на рост живых клеток L. acidophilus и L. rhamnosus в ферментированном овечьем молоке. 2. Материалы и методы 2.1. Материалы Сырое овечье молоко (порода овец Лакауне, Seweryn’s Farm, Подкарпатское воеводство, Польша) с химическим составом, включающим белок, жир, лактозу, общее содержание твердых веществ и pH, было получено с местной фермы в Подкарпатском воеводстве, Польша.Волокно черноплодной рябины было закуплено у Natura Wita sp. z o.o. (Пиньчув, Польша). Коммерческие закваски с пробиотиками L. rhamnosus Pen E / N Oxy® и L. acidophilus LA-5® были получены от Chr. Хансен, Дания. Производство кисломолочного производства готовили по методу Каваза и Бакирджи [19] с модификациями. Овечье молоко было разделено на шесть партий, в которые добавляли клетчатку аронии в различных количествах, и группы кодировались: LA: контрольное молоко, ферментированное L. acidophilus LA1: молоко с 1,5% клетчатки черноплодной рябины, ферментированное L.ацидофильный LA3: молоко с 3,0% клетчатки черноплодной рябины, ферментированное L. acidophilus LR: контрольное молоко, ферментированное L. rhamnosus. LR1: молоко с 1,5% клетчатки черноплодной рябины, ферментированное L. rhamnosus. LR3: молоко с 3,0% клетчатки черноплодной рябины, ферментированное L. rhamnosus. Молоко с клетчаткой черноплодной рябины гомогенизировали в гомогенизаторе (Nuoni GJJ-0,06 / 40, Чжэцзян, Китай) при давлении 20 МПа при 60 ° C. Затем молоко пастеризовали при 85 ° C в течение 30 минут и охлаждали до 37 ° C. После пастеризации и охлаждения пробы молока были разделены на две партии.Первую партию молока с клетчаткой аронии инокулировали одной заквасочной культурой L. acidophilus LA-5®. Контрольным образцом для этой группы было молоко без добавления клетчатки. Вторую партию молока с клетчаткой аронии инокулировали L. rhamnosus Pen E / N Oxy®, и контрольным образцом для этой группы было молоко без добавления клетчатки. Каждую партию молока инокулировали ранее активированной заквасочной культурой согласно Szajnar et al. [20] (в виде насыпи, активированной при 40 ° С в течение 5 ч; через 5 ч инокулят состоял из log 9 КОЕ / г бактерий, добавленных в молоко в количестве 5%).Инокулированное молоко перемешивали и разливали в пластиковые стаканчики на 100 мл. Пакеты закрывали на настольной полуавтоматической запечатывающей машине (Китай), запаивали термосвариваемой фольгой и ферментировали при 37 ° C в течение 10 часов. Инокулированное молоко перемешивали и разливали в пластиковые стаканчики на 100 мл и ферментировали при 37 ° C в течение 10 часов. Конечные продукты охлаждали до (охлаждаемый инкубатор ILW 115, POL-EKO Aparatura, Польша). Эксперимент был повторен три раза. Ферментированное молоко оценивали после первого дня хранения в холодильнике (). 2.2.Физико-химические свойства 2.2.1. pH Определение pH проводили с помощью pH-метра (FiveEasy, Mettler Toledo, 105, Швейцария) с использованием электрода InLab®Solids Pro-ISM (Mettler Toledo, Швейцария). В молоке после добавления клетчатки перед ферментацией было проведено три измерения значений pH для каждой группы, тогда как в ферментированном молоке pH был протестирован в общей сложности в 90 образцах (). 2.2.2. Синерезис (%) Синерезис определяли центробежным методом по количеству высвобожденной сыворотки, превышающей исходную массу в соответствии с Santillán-Urquiza et al.[21] с модификациями метода с использованием лабораторной охлаждаемой центрифуги LMC-4200R (Biosan SIA, Латвия) (10 г ферментированного молока переносили в пластиковую пробирку на 50 мл и центрифугировали 10 мин при 5 ° C). В ферментированном молоке синерезис был проанализирован в 90 образцах (). 2.2.3. Цвет Цвет анализировали колориметром (прецизионный колориметр, модель NR 145, Китай) с использованием системы CIELAB. Яркость изображения определялась параметром, а цветность — с помощью. Перед тестированием прибор был откалиброван по белому эталону [22].В ферментированном молоке цвет был измерен всего в 90 образцах (). 2.3. Анализ текстуры Тест TPA определял текстурометрический профиль с помощью анализатора текстуры CT3 (Brookfield, США) с программным обеспечением TexturePro CT (Brookfield, США). Размеры образца — цилиндр, температура — 8 ° C. Испытание проводилось с использованием акрилового зонда TA 3/100 и следующих настроек: расстояние 15 мм, контактная нагрузка 0,1 Н и скорость измерения 1 мм / с [23]. В ферментированном молоке консистенция была исследована в 90 образцах ().2.4. Органолептические параметры Органолептические свойства кисломолочного молока, потенциально пробиотического, оценивали по линейной шкале 9 см, неструктурированной. Изучались следующие дескрипторы: консистенция, молочно-сливочный вкус, кислый вкус, вкус добавок, сладкий вкус, привкус, кислый запах, запах добавок и посторонний запах [14]. Органолептические параметры оценивала обученная бригада: 10 женщин и 10 мужчин (возраст 20-40 лет). Образцы ферментированного молока оценивались по 9-балльной шкале с отметками на обоих концах.Левый конец обозначал наименее интенсивный и наименее характерный признак: песчано-зернистую консистенцию, самый яркий цвет и неощутимый молочно-сливочный вкус, кислый вкус, сладкий вкус, привкус и добавочный вкус, а правый конец обозначал наиболее характерный особенность: гладкая текстура, наиболее темный цвет и наиболее насыщенный молочно-сливочный вкус, кисловатый вкус, сладкий привкус, привкус волокон черноплодной рябины [24]. 2.5. Микробиологический анализ Количество микроорганизмов L. acidophilus и L. rhamnosus оценивали по методу Lima et al.[25], а описание метода частично воспроизводит их формулировки. Количество жизнеспособных L. acidophilus и L. rhamnosus оценивали с использованием агара MRS (Biocorp, Польша) и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение 72 часов. Результаты выражали в виде log КОЕ г⁻¹. 2.6. Статистический анализ Полученные результаты представлены в виде среднего и стандартного отклонения и рассчитаны статистически с использованием программы Statistica v. 13.1 (StatSoft, США). Двусторонний дисперсионный анализ был использован для исследования общего типа эффекта на свойства ферментированного молока.Достоверность различий между средними значениями оценивали с помощью теста Тьюки (). 3. Результаты и их обсуждение 3.1. Физико-химические свойства: pH. На рисунке 1 показано значение pH контрольной пробы молока после добавления клетчатки черноплодной рябины.

Ведущие международные ученые предлагают новое определение синбиотиков

Слово «синбиотик» появляется во все большем числе пищевых продуктов и пищевых добавок, при этом синбиотические ингредиенты обещают модулировать сообщество микробов, живущих в кишечнике человека, обеспечивая при этом пользу для здоровья.Под синбиотиками обычно понимают комбинацию пробиотика и пребиотика, но эксперты сочли это описание слишком ограничивающим для инноваций в этой области и слишком двусмысленным, чтобы дать четкое представление о пользе синбиотиков для здоровья.

Чтобы устранить научную неоднозначность в отношении синбиотиков, группа из 11 ведущих международных ученых сформировала комиссию для выработки согласованного определения и уточнения доказательств, необходимых для демонстрации безопасности и эффективности синбиотиков.

В статье, опубликованной в журнале « Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology », авторы предлагают новое определение синбиотиков, основанное на последних научных разработках в этой области: «смесь, состоящая из живых микроорганизмов и субстрата (субстратов), избирательно используемого хозяином. микроорганизмы, приносящие пользу здоровью хозяина «.

Эксперты в группе подчеркивают, что это определение должно быть всеобъемлющим — многие различные комбинации живых микроорганизмов и выборочно используемых субстратов могут квалифицироваться как синбиотики, если исследование на людях демонстрирует пользу для здоровья любой конкретной комбинации. Более того, синбиотики не должны ограничиваться кишечником; они потенциально могут быть нацелены на любую часть человеческого тела, в которой обитает сообщество микроорганизмов.

Мы надеемся, что публикация этого определения ознаменует сдвиг в понимании людьми синбиотиков.Мы можем начать обсуждение синбиотиков более точным с научной точки зрения способом, давая каждому общий словарь для понимания того, что они делают, как работают и какие доказательства необходимы для соответствия определению ».

Келли Суонсон, первый автор, профессор кафедры наук о животных и отдела диетологии, Иллинойсский университет в Урбана-Шампейн

В публикации группа также проводит различие между «дополнительными синбиотиками», в которых пробиотик и пребиотик объединены, но работают отдельно, и «синергическими синбиотиками», в которых избирательно используемый субстрат специально питает микроорганизмы, которые его сопровождают.

Группа экспертов была созвана Международной научной ассоциацией пробиотиков и пребиотиков (ISAPP), некоммерческой организацией, которая ранее руководила научным консенсусом в определении пробиотиков и пребиотиков.

«Создание определения синбиотика — это первый шаг», — говорит Мэри Эллен Сандерс, научный сотрудник ISAPP. «Отсюда научное сообщество может сосредоточиться на разработке и проведении исследований для проверки воздействия этих продуктов на здоровье.«

Опросы показывают, что потребители все чаще ищут доказательства того, что продукты на рынке обеспечивают те преимущества, которые, как они утверждают, предоставляют. Сандерс говорит: «Мы ожидаем, что научные данные о пользе синбиотиков для здоровья со временем будут расти, наряду с повышением общей осведомленности о синбиотиках».

Источник:

Международная научная ассоциация пробиотиков и пребиотиков

Ссылка на журнал:

Swanson, K.S., et al. (2020) Консенсусное заявление Международной научной ассоциации пробиотиков и пребиотиков (ISAPP) по определению и сфере применения синбиотиков. Nature Reviews Гастроэнтерология и гепатология. doi.org/10.1038/s41575-020-0344-2.

симбиотиков | Biocodex Microbiote Institute

Синбиотики состоят из комбинации пребиотиков и пробиотиков ¹ , ² . Последние помогают восстановить баланс микробиоты в случае дисбактериоза, а первые обеспечивают энергию, необходимую для развития бактерий.Сочетание этих двух факторов важно для поддержки распространения бактерий, которые способствуют поддержанию здорового равновесия в микробиоте.
Таким образом, возможны многочисленные комбинации пребиотиков / пробиотиков. Например, можно комбинировать лактобациллы или бифидобактерии (пробиотики) с олигосахаридами или инулином. Комбинация пребиотиков и пробиотиков также, по-видимому, улучшает выживаемость пробиотических бактерий, которые в этом случае становятся более эффективными, потому что они могут достичь большей вероятности выживания в кишечном тракте, где они действуют.

Разработка синбиотиков — это путь, который необходимо изучить для лечения некоторых заболеваний и восстановления микробиоты здоровым образом. С этой целью исследование показало, что при использовании синбиотиков (в данном случае комбинации Bifidobacterium breve и галактоолигосахаридов) на мышиной модели мыши быстрее восстанавливали нормальную микробиоту после заражения сальмонеллой, обработанной стрептомицином, что уменьшало бактериальную нагрузку. в стуле животного до неопределяемого уровня.Результаты были даже лучше, чем при использовании одного пробиотика. ³ Более того, комбинация пре- и пробиотиков имеет преимущества для лечения запоров при синдроме раздраженного кишечника. ⁴ .

Источники:

1. Bengmark S. et al. Пребиотики и синбиотики в клинической медицине. Nutr Clin Pract. 2005; 20 (2): 244-61. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16207660

2. Schrezenmeir J et al. Пробиотики, пребиотики и синбиотики — приближается к определению.Am J Clin Nutr. 2001; 73 (2 доп.): 361С-364С. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11157342

3. Расталл Р.А. и др. Пребиотики и синбиотики: к следующему поколению. Curr Opin Biotechnol. 2002; 13 (5): 490-6. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12459343

4. Dughera L et al. Влияние симбиотических препаратов на симптомы синдрома раздраженного кишечника при запоре. Acta Biomed. 2007; 78 (2): 111-6. http: // www.mattioli1885journals.com/index.php/actabiomedica/article/viewFile/1912/1433

Стартап под руководством преподавателей стремится улучшить здоровье кишечника | Небраска Сегодня

Преподаватели штата Небраска основали дочернюю университетскую компанию Synbiotic Health с целью разработки комбинации полезных кишечных бактерий и топлива, которое их питает.

Синбиотик, тезка компании, относится к смеси полезных бактерий и волоконоподобного топлива, которые могут быть более эффективными для улучшения здоровья в сочетании друг с другом.Работая с NUtech Ventures, филиалом университета по коммерциализации технологий, стартап лицензировал свои первые штаммы синбиотиков и планирует начать клинические испытания на людях в следующем году.

Среди учредителей компании — Боб Хаткинс, Энди Бенсон и Том Берки из Небраски, а также Йенс Уолтерс из Университета Альберты и генеральный директор Тим Браммелс. Команда сформировала Synbiotic Health с целью коммерциализации комбинаций синбиотиков в качестве ингредиентов для компаний, производящих продукты питания и напитки.

Исследователи из Небраски уже давно изучают, как пребиотики, подобные клетчатке, могут поддерживать рост пробиотиков, полезных бактерий, обитающих в желудочно-кишечном тракте. Их исследования также сосредоточены на сочетании правильного пребиотика с правильным пробиотиком, который может помочь полезным бактериям оставаться в организме достаточно долго, чтобы приносить пользу для здоровья.

«Мы рады предоставить научную основу, которая поддерживает коммерциализацию безопасных и эффективных синбиотиков», — сказал Браммелс.«Микробиом кишечника и его влияние на здоровье человека являются ключевой платформой для разработки продуктов для ряда ведущих компаний, производящих пищевые продукты».

По словам специалиста по питанию Энди Бенсона, партнерство с Synbiotic Health также является важным достижением для центра Nebraska Food for Health. Центр занимается разработкой продуктов с доказанной пользой для здоровья, особенно тех, которые влияют на микробиом кишечника человека.

«Это партнерство демонстрирует стремление центра переводить и коммерциализировать продукты, основанные на исследованиях», — сказал Бенсон, председатель правления и директор центра.«Эти синбиотики представляют собой быстро развивающийся класс пробиотиков« следующего поколения », которые в конечном итоге могут улучшить здоровье человека и животных».

синбиотиков для цыплят-бройлеров — разработка in vitro и оценка влияния на популяции хозяев и отдельные популяции микробиоты после доставки in Ovo

Abstract

Синбиотики — это синергетические комбинации пребиотиков и пробиотиков. У кур синбиотики могут быть доставлены in ovo для ускорения колонизации кишечника полезными бактериями.Поэтому мы стремились разработать синбиотики in vitro и проверить их на цыплятах-бройлерах после доставки in ovo . Пробиотическими компонентами синбиотиков были Lactobacillus salivarius и Lactobacillus plantarum . Их рост оценивали на среде MRS с добавлением различных пребиотиков. На основании результатов in vitro (кривая выводимости и роста) были разработаны два синбиотика: S1 — Lactobacillus salivarius с галактоолигосахаридами (GOS) и S2 — Lactobacillus plantarum с олигосахаридами семейства рафинозы (RFO).Эти синбиотики вводили эмбрионам цыплят-бройлеров Cobb на 12-й день инкубации в оптимизированных дозах (10 ⁵ КОЕ яйцо ^-1 пробиотика, 2 мг яйца ^-1 пребиотика). После вылупления было выращено 2400 петухов (группа из 600 особей ^-1 , разделенная на восемь повторных загонов). Микробные сообщества анализировали в пищеварительном тракте подвздошной и слепой кишки на 21 день с использованием FISH. Анализ экспрессии генов ( IL1β , IL4 , IL6 , IL8 , IL12 , IL18 , IFNβ и IFNγ ) проводили на 7, 14, 21 и 42 дни для селезенку и миндалины слепой кишки с помощью RT-qPCR.Масса тела и потребление корма петухов не различались в зависимости от обработок. Микробные популяции Lactobacillus spp. и Enterococcus spp. в подвздошной кишке были выше в S1 и S2, чем в контроле. В слепой кишке у контроля было наибольшее количество бактерий. S1 вызвал значительную активацию IL6 , IL18 , IL1β , IFNγ и IFNβ в селезенке на 21 день и IL1β на 7 день ( P <0.05). В миндалинах слепой кишки S1 вызывал значительное подавление IL12 , IL8 и IL1β на 42 день и IFNβ на 14 день ( P <0,05). S2 не выявил таких паттернов ни в каких исследованных тканях. Таким образом, мы демонстрируем, что различные эффекты синбиотиков у цыплят-бройлеров были отражены в тестах in vitro .

Образец цитирования: Dunislawska A, Slawinska A, Stadnicka K, Bednarczyk M, Gulewicz P, Jozefiak D, et al.(2017) Синбиотики для цыплят-бройлеров — Дизайн In vitro и оценка влияния на популяции хозяев и отдельные популяции микробиоты после доставки In Ovo . PLoS ONE 12 (1): e0168587. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587

Редактор: Бренда А. Уилсон, Иллинойсский университет в Урбана-Шампейн, США

Поступила: 12 июля 2016 г .; Одобрена: 2 декабря 2016 г .; Опубликован: 3 января 2017 г.

Авторские права: © 2017 Dunislawska et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Этот проект (ECO-FCE) получил финансирование от Седьмой рамочной программы Европейского Союза по исследованиям, технологическому развитию и демонстрации в соответствии с соглашением о гранте No.311794.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Микробиота желудочно-кишечного тракта птиц (ЖКТ) является ключевым фактором в развитии и регуляции иммунитета, пищеварения, усвоения питательных веществ и их метаболизма [1,2]. Микробиота ЖКТ может регулироваться биологически активными веществами, такими как пребиотики, пробиотики или синбиотики [3]. Эти биоактивные соединения могут напрямую модулировать микробиом хозяина и, следовательно, косвенно влиять на организмы хозяина.Термин «синбиотик» используется для описания синергических комбинаций пребиотиков и пробиотиков [4]. Были определены два типа синергизма между пребиотиком и пробиотиком. Оба соединения могут действовать синергично друг с другом или, альтернативно, с хозяином [5,6]. В первом случае пребиотик стимулирует рост пробиотических бактерий. Второй механизм предполагает, что пребиотик и пробиотик действуют независимо в ЖКТ, где они стимулируют развитие микробиоты хозяина. Неперевариваемые олигосахариды (пребиотики) ферментируются в ЖКТ, в то время как полезные живые микроорганизмы (пробиотики) колонизируют ЖКТ [7].

Самая большая группа микроорганизмов, классифицируемых как пробиотики, — это молочнокислые бактерии (ЛАБ). Они предотвращают прикрепление и размножение болезнетворных микроорганизмов на слизистой оболочке кишечника. LAB также выделяют ферменты в просвет кишечника [8]. Лактобациллы являются преобладающими членами микрофлоры ЖКТ у различных видов домашнего скота [9]. Чтобы использовать их в качестве пробиотиков, эти бактерии должны уметь выжить в кишечнике и проявлять антагонистические свойства против вредных бактерий. Следовательно, наиболее важной особенностью пробиотических штаммов является их способность прикрепляться к эпителиальным клеткам кишечника [10].Пребиотики, такие как инулин, галактоолигосахариды (GOS), фруктоолигосахариды (FOS), маннанолигосахариды (MOS) и олигосахариды семейства рафинозы (RFO), используются для улучшения и поддержания оптимальной функциональности кишечника путем стимулирования роста и биоразнообразия полезных микробиота и снижение распространения патогенных штаммов [11]. Разовая доза пребиотика увеличивает уровень полезных бактерий в кишечном тракте взрослых организмов [12]. И пребиотики, и синбиотики положительно влияют на лимфоидную ткань кишечника (GALT).Было продемонстрировано, что оба вещества, введенные in ovo , стимулировали развитие GALT после вылупления. Синбиотики оказывают сильное стимулирующее действие на колонизацию GALT Т- и В-клетками [13]. Также документально подтверждено, что у кур, как и у других животных, эффективность пребиотиков возрастает, когда они используются в составе синбиотика [14].

Эффективная модуляция микробиоты ЖКТ зависит от метода и времени доставки биологически активного соединения [3].Обычно пребиотики, пробиотики или синбиотики вводят в корм или воду сразу после вылупления [15]. Эффективность добавления биоактивных соединений на раннем этапе после вылупления высока, потому что это период (от вылупления до второй недели), когда ЖКТ впервые заселяется микробиотой и когда GALT становится функционально зрелым [16,17]. В качестве альтернативы пребиотики, пробиотики или синбиотики могут быть доставлены в куриный эмбрион in ovo , что продлевает эффективное время действия до периода до вылупления.Метод in ovo доставки биоактивных соединений, стимулирующих микрофлору, который был разработан нашей группой, основан на однократной дозе пребиотиков или синбиотиков, вводимых в воздушную камеру точно на 12-й день инкубации яиц [18–20]. Последующие эффекты инъекции in ovo зависят от правильного времени введения, а также от типа и дозы биологически активного соединения; поэтому крайне важно проверить биологические свойства этих соединений и подтвердить их эффективность для доставки in ovo [11,12,14,15].

Влияние доставки in ovo на биоактивные соединения, стимулирующие микрофлору, выявляются в течение всей жизни цыплят [18,21]. В наших предыдущих экспериментах мы продемонстрировали, что однократная инъекция пребиотика или синбиотика в ovo может изменить весь спектр фенотипических признаков у растущих цыплят-бройлеров, включая признаки роста [22], структуру и развитие иммунных органов [13,18,21] ], гистологический состав кишечной ткани [23,24], параметры качества мяса [25], пищеварительная способность поджелудочной железы [26] и молекулярные изменения в миндалинах слепой кишки, селезенке [17,18] и печени (A .Дуниславская, личное сообщение). Однако сообщаемое влияние лечения in ovo на животное сильно зависело от свойств данного пребиотика (например, инулина, GOS, RFO или бета-глюканов). Эти эффекты более сложны для синбиотиков, содержащих по крайней мере два биологически активных соединения, которые оказывают различное воздействие на организм, когда они доставляются по отдельности, чем когда они доставляются вместе. Основываясь на многочисленных исследованиях, крайне важен тщательный предварительный выбор синбиотика и его проверка для исследований на животных.Поскольку исследование in vivo на биоактивные свойства пребиотиков, пробиотиков и синбиотиков занимает много времени, трудоемко и требует большого количества животных, предпочтительно использовать тесты in vitro [27].

В этом исследовании мы предположили, что скрининг синбиотиков in vitro до исследования in vivo может указывать на биологические свойства синбиотиков и их влияние на хозяина. Целью этого исследования было разработать синбиотиков Lactobacillus на основе тестирования in vitro и подтвердить их влияние на цыплят-бройлеров после инъекции in ovo 12-дневным эмбрионам.В нашем эксперименте мы оценили влияние лечения специфическими синбиотиками на микробиом и хозяина. Животных изучали от вылупления до товарного возраста в коммерческих условиях, используя характеристики и молекулярные реакции в качестве индикаторов эффективности обработок.

Материалы и методы

Испытательное испытание

Селекция синбиотиков лактобацилл

Для испытаний in vitro были выбраны два штамма Lactobacillus на основе доказанной пробиотической активности у кур: Lactobacillus (L .) salivarius IBB3154 ​​и L . plantarum IBB3036. Оба штамма были получены из коллекции Института биохимии и биофизики (IBB) Польской академии наук (PAS) в Варшаве, Польша. Для создания синбиотиков были протестированы несколько пребиотиков: инулин (Sigma-Aldrich GmbH, Шнельдорф, Германия), RFO [28], GOS (торговое название: Bi ² tos; Clasado Biosciences, Ltd., Джерси, Великобритания) и бета-версия. -глюканы (торговое название: LactoShield; BioAtlantis, Ltd., Трали, Ирландия).Кривые роста этих бактерий в присутствии различных пребиотиков оценивали с помощью автоматического анализатора роста Bioscreen C (Oy Growth Curves Ab Ltd). Общий объем лунки планшета Bioscreen составлял 400 мкл и был заполнен тестовым раствором, содержащим 360 мкл среды MRS [29] и 40 мкл посевного материала каждой бактерий Lactobacillus . Использовали несколько вариантов среды MRS. Они состояли из стандарта с глюкозой и одной из четырех модифицированных сред MRS, в которых глюкоза была заменена на инулин, RFO, GOS или бета-глюканы [30,31].Инокулят готовили следующим образом: тестируемые штаммы ( L , salivarius IBB3154 ​​и L . plantarum IBB3036) инокулировали в пробирки со стандартной средой MRS с глюкозой и инкубировали в течение 16 ч при 37 ° C [32,33 ]. Затем их центрифугировали (4000 × г, в течение 15 мин) и суспендировали в пептонной воде. Суспензии тщательно перемешивали и разбавляли для получения OD 1 при 600 нм, что соответствует 10 ⁶ КОЕ на см ^-3 . Рост тестируемых штаммов, л . salivarius IBB3154 ​​и L . plantarum IBB3036, измеряли турбидиметрически ежечасно в течение 72 часов с использованием широкодиапазонного фильтра (420–580 нм) при 10-секундном перемешивании перед каждым измерением. Все измерения были выполнены в трех экземплярах.

Оптимизация доз

Для оценки доз синбиотиков для исследования in vivo были проведены испытания, в которых было определено влияние синбиотиков, доставленных in ovo , на выводимость яиц для л . salivarius IBB3154 ​​с GOS (S1) и L . plantarum IBB3036 в сочетании с RFO (S2). Выборка из 4200 яиц Cobb500FF была случайным образом распределена на 14 экспериментальных групп. На 12 день развития эмбриона контрольной группе имитировали инъекцию in ovo 0,2 мМ физиологического раствора (0,9%). Другую группу использовали в качестве отрицательного контроля без инъекции in ovo . Остальные 12 экспериментальных групп использовали для инъекции синбиотика in ovo с шестью различными дозами каждого синбиотика.Дозы готовили путем объединения трех уровней подсчета бактерий (10 ³ , 10 ⁴ , 10 ⁵ КОЕ, яйцо ^-1 ) с двумя уровнями концентраций пребиотиков (2 или 5 мг яйца ^-1 ). Экспериментальная установка представлена ​​на вкладке A в файле S1. Нанесение 0,2 мл водного раствора в воздушную камеру каждого яйца производилось шприцем и иглой длиной 4 мм. После инъекции отверстие заклеивали нетоксичным клеем, чтобы избежать заражения эмбриона и предотвратить потерю влаги.После инъекции in ovo яйца дополнительно инкубировали до вылупления. Анализ выводимости был проведен в коммерческом инкубатории (DrobexAgro, Solec Kujawski, Польша). Статистический анализ выводимости был проведен с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) и апостериорного критерия Дункана для сравнения средних значений между экспериментальными группами.

Полевые испытания

Для полевых испытаний с оптимизированными дозами синбиотиков 5850 яиц Cobb500FF инкубировали в коммерческом инкубатории с использованием автоматического инкубатора при 37.8 ° C и относительная влажность 61–63%. Вес яйца составлял примерно 65 граммов. Яйца, использованные в эксперименте, были получены из стада в возрасте 42 недель. На 12-й день инкубации яйца случайным образом распределяли на две экспериментальные группы: S1, S2 и контрольную группу. Яйца вводили in ovo с 0,2 мл водного раствора S1 или S2. Синбиотики состояли из 10 ⁵ бактерий КОЕ яйца ^-1 и 2 мг яйца ^-1 пребиотика. Контрольной группе (C) имитировали инъекцию 0.2 мМ физиологического раствора (0,9%). Кроме того, параллельно инкубировали неинъектированный контроль (U). Яйца инкубировали до вылупления. При вылуплении оценивали выводимость для определения смертности эмбрионов в результате инъекции in ovo . В общей сложности 2400 петухов было перевезено на коммерческую ферму (Пяст, Ольшова экспериментальная установка 0161, Польша) для выращивания. Животные из каждой экспериментальной группы (600 особей, группа ^-1 ) были разделены на 8 загонов (75 особей загона ^-1 ).Каждое перо считалось копией.

В течение всего периода выращивания цыплята имели свободный доступ к корму и свежей питьевой воде. Смертность, живая масса, потребление корма и коэффициент конверсии корма (FCE) регистрировались на регулярной основе. FCE определяли с использованием остаточного потребления корма (RFI) и остаточного роста (RIG). RFI был определен как разница между наблюдаемым и прогнозируемым потреблением корма. На 7, 14, 21 и 42 дни после вылупления пять случайно выбранных особей (по одному из каждой экспериментальной группы) были усыплены.Ткани (селезенка, миндалины слепой кишки и тощая кишка) собирали и стабилизировали в растворе fix RNA (EURx, Гданьск, Польша). Всего для анализа экспрессии генов использовали 60 цыплят-бройлеров (4 сбора × 3 группы × 5 особей в группе). Остальные 1 980 петухов были использованы для оценки производственных параметров. Для анализа микробных сообществ желудочно-кишечного тракта содержимое подвздошной кишки и слепой кишки, собранное у двух птиц на загон, объединяли (восемь повторов примерно по 10 г) на 21 день жизни.Образцы немедленно замораживали и хранили при -80 ° C для анализа состава микробиоты с помощью флуоресцентной гибридизации in situ единичных бактериальных клеток (FISH).

В течение всего периода выращивания все подопытные бройлеры находились под ветеринарным наблюдением. Цыплята, проявлявшие какие-либо признаки тяжелого заболевания или смерти, подвергались эвтаназии. Использование на животных было одобрено Местным этическим комитетом по экспериментам на животных, Университет наук и технологий, Быдгощ, Польша, 36/2012 12 июля 2012 г.

Анализ микробного сообщества методом флуоресцентной гибридизации in situ (FISH).

Из всех обработок 2 птицы из 9 загонов были умерщвлены (n = 18) шейным вывихом. Образцы перевариваемого вещества из различных сегментов желудочно-кишечного тракта (подвздошная кишка, слепая кишка) собирали и случайным образом объединяли в шесть повторов на обработку, по три птицы на образец. Для анализа FISH 100 мкл перевариваемой подвздошной кишки разводили в PBS и наносили пипеткой на поликарбонатные фильтры 0,22 мкм (Frisenette, Knebel, Дания) и вакуумировали с помощью вакуумного насоса (KNF Neuberger GmbH, Фрайбург, Германия).После вакуумирования фильтры переносили на целлюлозные диски для обезвоживания в растущих разведениях этанола (50, 80 и 96%, по 3 минуты каждый). Для каждого образца была приготовлена ​​серия идентичных фильтров для определения оптимальной гибридизации. Олигонуклеотидные зонды, использованные в этом исследовании (вкладка B в файле S1), были выбраны на основании результатов предыдущих исследований [69–72]. Гибридизацию проводили в 50 мкл гибридизационного буфера (0,9 М NaCl; 20 мМ Трис / HCl, pH 7,2; 0,01% SDS), содержащего олигонуклеотидные зонды.После гибридизации фильтры промывали промывочным буфером (20 мМ Трис / HCl, pH 7,2; 0,01% SDS; 5 мМ EDTA) в течение 20 мин при 48 ° C. После промывки фильтры осторожно промывали в дистиллированной воде, сушили на воздухе и помещали на предметные стекла с помощью VectaShield (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA, US), агента против выцветания, содержащего DAPI (4 ‘, 6-диамидино-2 -фенилиндол). Чтобы отличить бактерии от других частиц в образцах подвздошной кишки (DAPI), фильтры оставляли при 4 ° C на 1 час в темноте до визуализации с помощью микроскопа Carl Zeiss Axio Imager M2 (Carl Zeiss Jena GmbH, Йена, Германия), как описано в другом месте [34,35].Подробный протокол FISH представлен на рис. A в файле S1. В одном экземпляре (поликарбонатный фильтр) было измерено 50 площадей, которые использовались в качестве среднего значения в расчетах. Статистический анализ выбранных популяций микробиоты представляет собой 6 объединенных повторов от 18 птиц на группу; каждая визуализирована флуоресцентной микроскопией 50 раз.

Выделение РНК и количественная ПЦР с обратной транскрипцией (RT-qPCR).

Перед выделением тотальной РНК ткани гомогенизировали с помощью гомогенизатора TissueRuptor (Qiagen GmbH, Hilden, Германия) в реагенте TRIzol® LS (Ambion / Thermo Fisher Scientific, Valtham, США).Дальнейшие этапы выделения были выполнены с использованием коммерческого набора (Universal RNA Purification Kit, EURx, Gdansk, Poland). Качество и количество РНК контролировали электрофорезом в 2% агарозном геле и NanoDrop 2000 (Scientific Nanodrop Products, Уилмингтон, США). Кроме того, 10% образцов использовали для контроля целостности РНК при автоматическом электрофорезе с помощью автоматизированной системы электрофореза Experion (BioRad, Hercules, Калифорния, США).

синтезировали с использованием набора Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit для RT-qPCR (Thermo Scientific / Fermentas, Вильнюс, Литва), следуя рекомендациям производителя.Полученную кДНК разводили до 70 нг мкл ^-1 и хранили при -20 ° C. Реакции RT-qPCR проводили с общим объемом 10 мкл. Реакционная смесь включала Maxima SYBR Green qPCR Master Mix (Thermo Scientific / Fermentas, Вильнюс, Литва), 1 мкМ каждого праймера и 2 мкл разведенной кДНК (140 нг). Термоциклирование выполняли в LightCycler II 480 (Roche Diagnostics, Базель, Швейцария). Каждую реакцию RT-qPCR проводили в двух технических повторностях. Анализ экспрессии генов был проведен для выбранной панели цитокинов: Th2 ( IFNγ , IL12 ), Th3 ( IL4 ), провоспалительный ( IL6 , IL18 и IL1β ), противовирусный ( IFNβ). ) и хемокин ( IL8 ).Последовательности праймеров были основаны на литературе [19,73–76] или созданы на основе нуклеотидной последовательности кДНК с использованием NCBI Primer Blast [36] (вкладка C в файле S1).

Относительная количественная оценка экспрессии генов и статистический анализ.

Анализ относительной экспрессии генов проводили отдельно для каждой экспериментальной группы методом ΔΔCt [37] с использованием UB и G6PD в качестве эталонных генов. При анализе использовались геометрические средние значения Ct (порог цикла) референсных генов.Для каждого образца рассчитывались различия Ct между генами-мишенями и генами сравнения. В качестве калибраторов использовались контрольные (В) образцы. ΔΔCt рассчитывали путем вычитания значения ΔCt калибратора из ΔCt неизвестного образца. Для расчета нормализованного уровня экспрессии гена использовалась следующая формула: R = 2 — ^ΔΔCt [37]. Статистический анализ проводился путем сравнения значения Ct каждой экспериментальной группы с контрольной группой с помощью теста Стьюдента t ( P <0.05). Стандартные ошибки среднего (SEM) применялись в качестве параметра вариации внутри групп.

Результаты

Лактобациллы – отбор синбиотиков

Результаты турбидиметрических измерений тестируемых бактерий в присутствии пяти пребиотиков представлены на рис. 1A ( L , salivarius ) и рис. 1B ( L . plantarum ). Для L . salivarius оптимальная кривая роста наблюдалась в присутствии GOS и стандартной среды MRS с глюкозой.Рост бактерий в стандартной среде MRS с добавлением RFO был намного слабее, чем в среде MRS с глюкозой. Максимальная оптическая плотность была достигнута в л . salivarius культур с GOS и была на 0,06 OD выше, чем в культуре MRS с глюкозой. Оптимальная кривая роста л . plantarum был обнаружен на стандартной среде MRS с глюкозой. Сравнительно высокие кривые роста L . plantarum наблюдали в присутствии GOS и RFO в среде MRS.Рост л . plantarum в стандартной среде MRS с глюкозой была на 0,74 OD выше, чем в среде MRS с RFO. Рост бактерий в стандартной среде MRS с добавлением инулина или бета-глюканов был намного слабее, чем в стандартной среде MRS с глюкозой.

Рис. 1. Изменения оптической плотности (ОП) питательной среды во время инкубации бактерий Lactobacillus с пребиотиками.

Инкубацию проводили с глюкозой в качестве контроля для (A) Lactobacillus salivarius и (B) Lactobacillus plantarum в присутствии пребиотиков RFO, инулина, GOS или бета-глюкана.Рост бактерий в среде MRS с добавлением пребиотиков глюкозы, GOS, RFO, инулина или бета-глюкана измеряли с помощью автоматического анализатора роста Bioscreen C (Oy Growth Curves Ab, Ltd.) в течение 72 часов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587.g001

Оптимизация дозы при испытании

Значительные различия в выводимости яиц in ovo наблюдались между двумя дозами пребиотиков: 2 мг яичного ^-1 и 5 мг яичного ^-1 .В этом эксперименте 4200 яиц были распределены по 14 группам. Выводимость была значительно выше после введения 2 мг яйца ^-1 GOS (рис. 2A) или RFO (рис. 2B). Более высокая концентрация пребиотика (5 мг) вызвала значительное снижение выводимости яиц. После инъекции S1, содержащего 10 ⁵ из L , наблюдалась выводимость примерно 90%. salivarius и 2 мг GOS и после инъекции S2 10 ³ или 10 ⁵ из л . plantarum и 2 мг RFO. Выводимость в контрольной группе (C) составляла 90%, тогда как в группе без инъекций (U) — 89%. На основании этих результатов оптимизированная доза синбиотиков S1 и S2 составила 2 мг пребиотика и 10 ⁵ бактерий. Целью процесса отбора было определение наивысшего уровня биологически активного соединения, не препятствующего выводимости.

Рис. 2.

Выводимость цыплят в ответ на введение различных доз синбиотиков in ovo для (A) L . salivarius + GOS (S1) и (B) L . plantarum + RFO (S2). Шесть доз двух синбиотиков были доставлены на 12 день инкубации. Комбинация трех доз пробиотиков (10 ³ , 10 ⁴ , 10 ⁵ КОЕ, яйцо ^-1 ) с двумя дозами пребиотиков (2 мг яйца ^-1 или 5 мг яйца ^-1 ) были протестированы. Для полевых испытаний была выбрана самая высокая доза, которая не снижала выводимость (10 ⁵ КОЕ для яиц, ^-1 пребиотика и 2 мг яичного пробиотика).Был проведен односторонний дисперсионный анализ (ANOVA). Апостериорный тест Дункана применялся для сравнения средних значений между парами в экспериментальных группах (a, b: P <0,05).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587.g002

Производительность цыплят-бройлеров в полевых условиях

Для полевых испытаний, исходя из 5850 яиц, выводимость составила 89,1%, 91,6% и 91,9% в группах S1, S2 и C соответственно. Масса тела различалась только в первые сутки после вылупления.Цыплята из группы S2 (41,6 г) были значительно тяжелее цыплят из групп S1 (40,3 г) и C (40,7 г) ( P <0,05). Мы не обнаружили различий в приросте живой массы (BWG) между группами за весь период выращивания. Самое низкое потребление корма (FI) между 1 и 10 днями наблюдалось в группе S1 (247 г) и значительно отличалось от групп C (254 г) и S2 (258 г). За весь период выращивания FI в группе S1 (4930 г) был сопоставим с группой C (4940 г).Самый низкий расход корма (4898 г) наблюдался в группе S2. Эффективность конверсии корма (FCE), рассчитанная для всего периода выращивания (дни с 1 по 42), была почти идентична для всех групп и равнялась 1,60 г ^-1 в группах, получавших синбиотики, и 1,59 г ^-1 в группе C . Смертность была численно ниже в группах, получавших синбиотики, и составляла 0,83% (S1) и 1,17% (S2). Численно самая высокая смертность цыплят была обнаружена в группе C (1,83%). Показатели продуктивности цыплят (BWG, FI, FCE и смертность), проведенные на 1980 бройлерах для оценки параметров продуктивности в ответ на доставку различных синбиотиков in ovo , представлены на вкладке D в файле S1.

Анализ микробного сообщества методом флуоресцентной гибридизации in situ (FISH)

В пищеварительном тракте подвздошной кишки, независимо от лечения, применение синбиотиков снизило Lactobacillus sp. / Enterococcus sp. Другие популяции микробиоты показали разные ответы. S1 (рис. 3A) уменьшил общее количество бактерий, а также кластер Bacteroides- Prevotella, Clostridium leptum подгруппу и кластер Eubacterium rectale (P = 0.0001). Напротив, в группе S2 были определены более высокие количества кластера Bacteroides- Prevotella, Clostridium leptum подгруппы и кластера Eubacterium rectale (P = 0,001). В пищеварительном тракте слепой кишки (рис. 3B) наибольшее количество бактерий было обнаружено в группе C (P = 0,0001). Оба синбиотика снижали кластер Bacteroides- Prevotella и увеличивали кластер Eubacterium rectale . Более того, в группе S1 большее количество Lactobacillus sp. / Enterococcus sp. наблюдались (P = 0,0001).

Рис. 3. Количество выбранных бактерий (log КОЕ / мл переваривания) в переваривании, определенное окрашиванием DAPI (общее количество бактерий) и флуоресцентной гибридизацией in situ (FISH).

Гибридизацию проводили с олигонуклеотидами, последовательность которых была основана на литературе. Для определения количества бактерий использовали микроскоп Axio Imager M2 компании Carl Zeiss (Carl Zeiss Jena GmbH, Йена, Германия).

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0168587.g003

Сигнатуры экспрессии генов, связанных с иммунитетом

На основании биологического материала, собранного у 60 бройлеров для анализа экспрессии, мы можем сделать вывод, что in ovo стимуляция с помощью S1 вызвала значительную повышающую регуляцию IL6 , IL18 , IL1β , IFNγ и IFNβ в селезенка на 21 день и IL1β на 7 день ( P <0,05) (рис. 4A). Стимуляция S1 вызывала паттерн повышающей регуляции экспрессии генов в селезенке для панели генов в четырех временных точках: 7, 14, 21 и 42 дня жизни.Введение S2 не вызывало какого-либо значимого паттерна модуляции связанных с иммунитетом генов в селезенке (фиг. 4B). Существенная повышающая регуляция была обнаружена для IL8 на 14 день и понижающая регуляция для IL12 на 42 день ( P <0,05). Анализ проводился на основе 5 биологических повторов и каждого из 2 технических повторов.

Рис. 4.

Изменения относительной экспрессии иммунной панели генов в селезенке цыплят-бройлеров, которым вводили in ovo с синбиотиками (A) Lactobacillus salivarius с GOS и (B) Lactobacillus plantarum с RFO. Анализ выполняли с использованием метода ^ΔΔ Ct для определения кратности индукции. Синбиотики вводили на 12-й день эмбрионального развития. Дни отбора проб составляли 7, 14, 21 и 42 дня после вылупления. Статистический анализ заключался в сравнении экспериментальных групп с контрольной группой по критерию Стьюдента t ; * для P <0,05. Каждая полоса представляет собой среднее значение ( n = 5) ± стандартная ошибка среднего (SEM).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587.g004

В миндалинах слепой кишки S1 вызывал значительное подавление IL12 , IL8 и IL1β на 42 день и IFNβ на 14 день ( P <0,05) ( Рис 5A). В этой ткани наблюдался четкий паттерн подавления экспрессии гена, индуцированный обработкой S1. Напротив, S2 не вызывал паттерна экспрессии связанных с иммунитетом генов в миндалинах слепой кишки. Повышение регуляции экспрессии генов было обнаружено на 7 день для генов IL12 и IL18 и на 42 день для генов IL8 и IL18 .Уровень IL12 был понижен на 14 и 21 день ( P <0,05) (рис. 5B). Экспрессия связанных с иммунитетом генов в тощей кишке в группах S1 и S2 существенно не отличалась от таковой в группе C.

Рис. 5.

Изменения относительной экспрессии иммунной панели генов в миндалинах слепой кишки цыплят-бройлеров, которым вводили in ovo с синбиотиками (A) Lactobacillus salivarius с GOS и (B) Lactobacillus plantarum с RFO. Анализ выполняли с использованием метода ^ΔΔ Ct для определения кратности индукции. Синбиотики вводили на 12-й день эмбрионального развития. Дни отбора проб составляли 7, 14, 21 и 42 дня после вылупления. Статистический анализ заключался в сравнении экспериментальных групп с контрольной группой по критерию Стьюдента t ; * для P <0,05. Каждая полоса представляет собой среднее значение ( n = 5) ± стандартная ошибка среднего (SEM).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587.g005

Обсуждение

Лактобациллы – отбор синбиотиков

Во время отбора in vitro различных композиций лактобацилл и пребиотиков были оценены кривые роста для определения способности данного штамма LAB метаболизировать пребиотические олигосахариды. Рост двух протестированных штаммов LAB в присутствии четырех пребиотиков сравнивали с эталонной средой, стандартной средой MRS с глюкозой. Бактериальный рост в эталонной среде определяли как имеющий оптимальную логарифмическую кривую роста, и, как таковой, он рассматривался как эталонная кривая роста для дальнейших сравнений.В нашем анализе логарифмическая кривая роста была построена для обоих штаммов LAB ( L , salivarius и L , plantarum ) в присутствии GOS и RFO. Кривая роста L . salivarius в среде MRS с GOS демонстрирует наклон и высоту, сравнимые с наклоном и высотой кривой роста в среде MRS с глюкозой. Это подтвердило, что L . salivarius использует GOS так же эффективно, как и глюкозу. И наоборот рост л . plantarum в среде MRS с RFO был ниже, чем в среде MRS с глюкозой, хотя наклон кривой был аналогичным. Это можно объяснить более сложной структурой сахаридов, присутствующих в RFO (т.е. трисахарид-рафиноза, тетрасахарид-стахиоза и пентасахарид-вербаскоза [22,28]. Эти результаты согласуются с выводами Gulewicz et al. [31] ], который сообщил, что рост LAB в среде MRS с RFO был менее интенсивным, чем в среде MRS с глюкозой.Есть и другие сообщения, подтверждающие вариабельность использования пребиотиков бактериями, которая во многом зависит от штамма LAB [38,39]. Можно сделать вывод, что L . salivarius метаболизм GOS почти так же эффективен, как и основной источник углерода (т.е. глюкоза), но L . plantarum RFO пребиотик обеспечивает менее эффективно метаболизируемый источник углерода.

Наилучшее сочетание пребиотика и пробиотика (т.е. синбиотика) для инъекции in ovo можно рассматривать с двух разных точек зрения.Во-первых, наиболее подходящим пребиотиком для пробиотических бактерий, вводимых in ovo , является тот, который поддерживает рост пробиотического компонента. В этом случае оптимально комбинированный синбиотик позволяет более эффективно использовать оба компонента, поскольку жизнеспособность пробиотических бактерий повышается за счет использования пребиотика в качестве субстрата для ферментации [40]. Мы определяем такой синбиотик как оказывающий синергетический эффект по отношению к пробиотику. Во-вторых, если пребиотик менее эффективно используется пробиотическими бактериями, он остается доступным для других местных красителей кишечной микробиоты.В этой ситуации пребиотик оказывает положительное влияние на организм хозяина за счет улучшения микробного баланса в кишечнике [41]. На наш взгляд, такой синбиотик можно определить как синергетический по отношению к хозяину. На следующих этапах экспериментов in vivo были разработаны два синбиотика (т.е. L , salivarius + GOS и L , plantarum + RFO) на основе результатов in vitro . Ожидалось, что эти синбиотики представят два типа синергизма, описанные выше (т.е. синергизм между пребиотическим и пробиотическим компонентами [S1] и синергизм между двумя независимыми биологически активными соединениями и хозяином [S2].

Оптимизация дозы

Использование технологии in ovo для доставки биоактивных соединений, стимулирующих микробиоту, в цыплят имеет несколько преимуществ по сравнению с добавками в корм, включая однородность и точность доставки биоактивных соединений каждому эмбриону, низкое использование этих соединений, оптимальное время для стимуляции колонизации кишечника с полезными бактериями, а также способствует созреванию иммунной системы.Однако связанные с этим риски включают потенциальное нарушение жизнеспособности и выводимости эмбрионов из-за неправильной техники инъекции или дозы биологически активных соединений. В нашем случае техника инъекции была оптимизирована, и во всех исследованиях, проведенных на сегодняшний день, включая текущее, показатель выводимости был более 90%. Место инъекции представляет собой воздушную ячейку внутри яйца, и время было на 12-й день инкубации. Этот подход наименее инвазивен для эмбриона и позволяет легко автоматизировать процесс без ущерба для выводимости яиц.Другой компонент, который влияет на выводимость (т.е. дозы биологически активных соединений для инъекции in ovo ), необходимо оптимизировать до полевых испытаний. В наших исследованиях мы приняли критерий выводимости как основной показатель оптимальной дозировки [42]. По определению мы выбрали самую высокую дозу данного биологически активного соединения, которая не вызывала значительного снижения выводимости. В нашем случае увеличение количества бактерий в синбиотике не повлияло на показатель выводимости.Однако наблюдалось значительное снижение выводимости яиц, которым вводили in ovo синбиотиками, содержащими 2 мг, по сравнению с яйцами, которым вводили 5 мг пребиотика GOS или RFO. Такое различие можно объяснить чрезмерной стимуляцией бактериальной популяции в кишечнике эмбриона, которая мешала развитию эмбриона.

Производительность цыплят-бройлеров в полевых условиях

В текущем эксперименте синбиотики, состоящие из видов Lactobacillus LAB в сочетании с GOS (S1) или RFO (S2), введенными in ovo , не влияли на конечные BWG и FCE.В предыдущих испытаниях мы наблюдали изменения показателей продуктивности бройлеров (BWG и FCE), вызванные обработкой in ovo пребиотиками и синбиотиками. Например, доставка in ovo двух синбиотиков, состоящих из инулина + Lactococcus lactis subsp. lactis или GOS + Lactococcus lactis subsp. cremoris , значительно увеличился конечный BWG при неизменном FCE [21]. В другом эксперименте введение in ovo только пребиотиков GOS и RFO также увеличивало BWG, но с более высокими значениями FI и FCE [42].Изменения BWG и FCE у животных, получавших добавки ( in ovo или в корме), вполне естественны и являются результатом конкуренции за питательные вещества между хозяином и его кишечной микробиотой, что обычно приводит к более высокому потреблению энергии [43]. Отсутствие изменений в характеристиках, наблюдаемых в этом исследовании, было сочтено полезным, учитывая, что синбиотики, доставляемые in ovo , не увеличивали FCE с неизменно высокой конечной массой тела. Отсутствие значительного влияния обработки на продуктивность можно объяснить тем фактом, что текущий эксперимент проводился с самцами, происходящими от тщательно отобранной линии бройлеров.Эти куры были предварительно отобраны генетически для получения наилучших результатов в полевых испытаниях. Целью инъекции синбиотика in ovo является поддержание здоровья организма, а не значительное повышение его работоспособности. Таким образом, численно улучшена выживаемость цыплят в обеих экспериментальных группах (S1, S2).

На сегодняшний день проведено лишь несколько исследований эффективности и иммуномодулирующих эффектов синбиотиков, вводимых in ovo [19,20].Большинство исследований по применению синбиотиков изучали классический путь введения — с кормом или в воде. Mookiah и др. . [44] показали, что добавление в корм бройлерного рациона пребиотика изомальтоолигосахаридов, коммерческого пробиотика лактобацилл или их комбинации в качестве синбиотика привело к значительному улучшению BWG, FI и FCE. Гасеми и др. . [45] наблюдали аналогичный эффект улучшения FCE после введения синбиотиков в рационы цыплят-бройлеров.Напротив, Murshed и Abudabos [46] сообщили о более низком уровне FCE у кур, получавших рационы синбиотиков, состоящих из MOS, бета-глюканов и высокоактивного штамма Bacillus subtilis (DM17299). Более того, высокие дозы диетических пробиотиков имели тенденцию увеличивать FCE на более поздних стадиях выращивания бройлеров [47]. Mousavi et al. сообщили, что добавление в корм цыплят-бройлеров синбиотика ( Enterococcus faecium и олигосахариды) улучшило FCE в фазе начала и роста, но не в фазе завершения [48].Можно сделать вывод, что, несмотря на способ доставки в корм, в воду или in ovo , наблюдаемые эффекты синбиотиков различаются из-за биологических свойств используемых биоактивных соединений.

Анализ микробного сообщества методом флуоресцентной гибридизации in situ (FISH)

Хорошо задокументировано, что все сегменты ЖКТ птицы заселяются различными популяциями микробиоты [49,50]. Например, слепые кишки — главные бродильные камеры с наибольшей активностью и плотностью строгих анаэробов.Для повышения продуктивности цыплят-бройлеров плотность и активность микробиоты (т. Е. Ферментация) должны быть минимизированы в верхних частях ЖКТ (т. Е. Подвздошной кишке) и увеличены в нижних сегментах ЖКТ (т. Е. Слепой кишке). В текущем исследовании in ovo синбиотиков S1 и S2 вызвали колонизацию различных микробов в подвздошной кишке и слепой кишке, а S1 оказался более эффективным в модулировании положительного сдвига в микробиоте ЖКТ. Добавление S1 уменьшило общее содержание микробиоты в подвздошной кишке, включая Bacteroides- Prevotella, Clostridium leptum , Eubacterium rectale cluster, а также Lactobacillus spp. / Enterococcus spp. Такая же обработка увеличила подгруппу Clostridium leptum , кластера Eubacterium rectale и Lactobacillus spp. / Enterococcus spp. в слепой кишке. Подгруппа Clostridium leptum включает множество видов, принадлежащих к родам Clostridium , Eubacterium и Ruminococcus . В основном это бутират-продуцирующие и фибролитические вещества, которые оказывают значительное влияние на здоровье кишечника.Изменения в подгруппе Clostridium leptum указывают на состояние здоровья кишечника. Меньшее количество подгруппы Clostridium leptum в подвздошной кишке и повышенное количество в слепой кишке также может играть полезную роль в микроэкологии ЖКТ из-за более высокой продукции короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке и меньшей конкуренции за питательные вещества с хозяином в слепой кишке. подвздошная кишка. Для S1 аналогичные эффекты наблюдались также в кластере Eubacterium rectale . Виды этого рода производят органические кислоты, включая бутират, ацетат, лактат или формиат, но не пропионовую и янтарную кислоты, в качестве основных продуктов ферментации пищевых волокон [51,52].Филогенетический анализ на основе последовательностей 16S рРНК подтвердил, что E . rectale принадлежит клостридиальному кластеру XIVa, как определено Collins et al. [53] внутри филума Firmicutes [54,55]. Следовательно, аналогично подгруппе Clostridium leptum , численность E . rectale является хорошим индикатором микробиоты, продуцирующей бутират, которая косвенно влияет на структуру и функцию эпителиальных клеток, особенно в нижних отделах ЖКТ.

, относящаяся к кластеру Bacteroides- Prevotella, является одним из наиболее часто выделяемых патогенов из клинических образцов практически из всех анатомических участков [56]. Более того, было продемонстрировано, что кластер Bacteroides — Prevotella может использоваться для обнаружения фекального загрязнения в водной среде [57]. В настоящем исследовании применение синбиотика S1 уменьшило количество подгруппы Bacteroides-Prevotella как в подвздошной, так и в слепой кишке, а S2 — только в подвздошной кишке.

Lactobacilli — одна из наиболее распространенных групп бактерий в ЖКТ цыплят-бройлеров. Лу и др. [58] сообщили, что примерно 70% последовательностей в библиотеке гена 16S рРНК, полученной из подвздошной кишки, принадлежат к роду Lactobacillus . Однако в слепой кишке, населенной в основном строгими анаэробами, лактобациллы составляли только 8% последовательностей библиотеки [35,58]. В питании человека и животных LAB, включая Lactobacillus , обычно считаются полезными для хозяина, главным образом потому, что они производят молочную и уксусную кислоты, что приводит к снижению pH [59,60], и некоторые бактериоцины, которые помогают бороться с патогенными бактериями [61 , 62].С другой стороны, есть также свидетельства того, что некоторые LAB тонкого кишечника, например л . salivarius или Enterococcus faecium могут оказывать негативное влияние на продуктивность бройлеров [63,64] из-за деконъюгации солей желчных кислот [65]. Таким образом, более низкие количества Lactobacillus sp. / Enterococcus spp. определенное в текущем исследовании, может объяснить отсутствие неблагоприятного воздействия синбиотиков на продуктивность цыплят-бройлеров, особенно FCE.

Экспрессия гена.

Модуляция микрофлоры кишечника косвенно влияет на иммунную систему. В этом исследовании мы продемонстрировали, что S1 запускает активацию иммунных генов в селезенке и их подавление в миндалинах слепой кишки. Наши предыдущие эксперименты с in vivo и показали, что синбиотики применяли in ovo , значительно регулируя иммунные гены ( IL-1β , IL-12p40 , IFN-γ и IL-18 ) в селезенке и слепой кишке. миндалины взрослых цыплят-бройлеров [19,20].Было показано, что уровень экспрессии генов зависит от времени и ткани [19,20]. Slawinska et al. определили аналогичную тенденцию к усилению экспрессии связанных с иммунитетом генов в селезенке с последующим явным понижением регуляции в миндалинах слепой кишки после инъекции in ovo синбиотиков [19]. Эта противоположная тенденция может быть связана с разным уровнем воздействия люминальных антигенов на обе ткани [20]. Миндалины слепой кишки являются частью GALT, поэтому они находятся в непосредственной близости от микрофлоры кишечника и постоянно подвергаются воздействию молекулярных структур, связанных с микробами (MAMP).GALT специализируется на противовоспалительных механизмах, используемых для устранения или противодействия микробиоте [66]. Этот механизм контролирует ответы хозяина и развивает толерантность к патогенам, что приводит к распознаванию комменсальных бактерий и активации временного и невоспалительного иммунного ответа [67]. In ovo введение синбиотиков обеспечивает ранний контакт между GALT и полезными бактериями, что способствует развитию механизмов толерантности [19]. Этот феномен объясняет подавление иммунных генов в миндалинах слепой кишки, которое мы определили в этом исследовании.

S1 и S2, доставляемые in ovo. проявляли другой паттерн экспрессии генов, связанных с иммунитетом. Это различие можно объяснить различным составом обоих биологически активных соединений (S1 и S2). Пребиотическое соединение в S1 было определено как синергетическое с пробиотиком, в то время как S2 было определено как синергическое по отношению к хозяину. Другое объяснение может заключаться в следующем: биоактивные соединения (например, пребиотики или пробиотики) различаются по своему сродству к мембранным рецепторам и, как таковые, вызывают разный уровень последующих реакций в клетках-хозяевах.В этом исследовании S1 (содержащий L , salivarius, IBB3154 ​​и GOS) и S2 (содержащий L , plantarum IBB3036 и RFO) проявляли различные иммуномодулирующие эффекты у цыплят, измеренные по уровню мРНК иммуно-связанных генов. Для оценки специфических свойств лактобацилл стимулировать иммунные ответы был проведен тест in vitro с использованием куриных макрофагоподобных клеток HD11. Он подтвердил более высокий стимулирующий потенциал фунтов . salivarius IBB3154 ​​(~ 3000 DEG) по сравнению с L . plantarum IBB3036 (~ 500o) в активации экспрессии генов при прямом взаимодействии между макрофагами и бактериями (A. Slawinska, личное сообщение). Синергетические эффекты различных комбинаций пребиотиков и пробиотиков также оценивались in vitro с использованием клеточной линии DT40. Результаты этого исследования показали, что один и тот же штамм бактерий в сочетании с другим пребиотиком запускал различные уровни экспрессии связанных с иммунитетом генов в клетках-хозяевах [68].Это подтверждает, что для проявления надлежащего иммуномодулирующего действия на хозяина необходим не только более мощный пробиотик, но и его следует сочетать с пребиотиком.

Выводы

Ожидаемая роль биоактивных соединений, стимулирующих микрофлору, таких как пребиотики, пробиотики или синбиотики, заключается в модулировании полезных изменений кишечной микробиоты хозяина. У домашней птицы эти биоактивные соединения можно добавлять в корм / воду или вводить путем инъекции in ovo .Биологические эффекты синбиотиков, независимо от пути доставки, зависят исключительно от тщательного выбора биологически активных соединений (пребиотиков и пробиотиков). В этом исследовании мы представили рабочий процесс, связанный с выбором in vitro синбиотиков и его последствия для последующих исследований на животных, включая численность кишечных микробных сообществ, параметры производительности и молекулярные ответы иммунной системы. Отбор синбиотиков in vitro дает некоторое представление об их биологическом потенциале in vivo .Оба синбиотика оказали благотворное влияние на общий статус организмов, определяемый низкой смертностью и высокими производственными параметрами. Однако мы показали, что состав синбиотиков влияет на экспрессию генов в миндалинах слепой кишки и селезенке, а также на микрофлору ЖКТ. Из двух синбиотиков, испытанных в этом эксперименте, S1 состоит из L . salivarius и GOS оказались более эффективными в установлении паттерна подавления регуляции экспрессии иммунных генов в GALT и благоприятного сдвига в составе микробиоты в GIT.

Вспомогательная информация

Файл S1.

Tab A. Проверенные уровни пробиотиков и пребиотиков для in ovo в качестве синбиотика на 12-й день инкубации. Вкладка B. Зонды, используемые для определения кишечной микробиоты с помощью in situ флуоресцентной гибридизации (FISH) Рис. A. Флуоресцентная in situ гибридизации (FISH) отдельных бактериальных клеток, протокол. Таблица C. Последовательности праймеров, используемые в реакции RT-qPCR. Tab D. Производительность цыплят в ответ на различные синбиотики доставила in ovo .

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0168587.s001

(DOCX)

Благодарности

Авторы благодарят Мариану Нарцисо за помощь с лабораторным анализом и Яцека Бардовски и Романа Кшиштофа Горецкого из IBB PAS в Варшаве за предоставленные штаммы бактерий.

Вклад авторов

1. Концептуализация: MS MB AS.
2. курирование данных: AD DJ PG.
3. Формальный анализ: г. н.э.
4. Получение финансирования: МБ.
5. Расследование: PG AD.
6. Методология: MS MB AS DJ PG.
7. Администрация проекта: МБ КС.
8. Кураторство: МС.
9. Визуализация: г. н.э.
10. Написание — первоначальный черновик: AD MS KS DJ PG.
11. Написание — просмотр и редактирование: MS AS AD.

Ссылки

1. 1.Паттерсон Дж. А., Буркхолдер К. М.. Применение пребиотиков и пробиотиков в птицеводстве. Poult Sci. 2003. 82: 627–631. pmid: 12710484
2. 2. Хаджати Х., Резаи М. Применение пребиотиков в птицеводстве. Int J Poult Sci. 2010; 9: 298–304.
3. 3. Ян Й, Иджи П.А., Чокт М. Диетическая модуляция микрофлоры кишечника у цыплят-бройлеров: обзор роли шести видов альтернатив кормящим антибиотикам. World Poultry Sci J. 2009; 65: 97.
4. 4. Де Врезе М., Шрезенмейр Дж. Пробиотики, пребиотики и синбиотики. Adv Biochem Eng Biotechnol. 2008; 111: 1–66. pmid: 18461293
5. 5. Шрезенмейр Дж., Де Врезе М. Пробиотики, пребиотики и синбиотики — приближаясь к определению. Am J Clin Nutr. 2001; 73: 361–364S.
6. 6. Роберфроид М. Пребиотики: новая концепция. J Nutr. 2007; 137: 830S – 837S. pmid: 17311983
7. 7. Гибсон Г. Р., Роберфроид МБ. Диетическая модуляция микробиоты толстой кишки человека: введение в понятие пребиотиков.J Nutr. 1995; 125: 1401–1412. pmid: 7782892
8. 8. Найду А.С., Бидлак В.Р., Клеменс Р.А. Спектры пробиотиков молочнокислых бактерий (ЛАБ). Crit Rev Food Sci Nutr. 1999; 39: 13–126. pmid: 10028126
9. 9. Гиллиланд С.Е., Спек М.Л., Морган К.Г. Обнаружение Lactobacillus acidophilus в кале людей, свиней и кур. Appl Microbiol. 1975; 30: 541–5. pmid: 811162
10. 10. Сорнпланг П., Лилаватчарамас В., Сойкум С. Фагоцитарная активность гетерофилов, стимулированная добавками Lactobacillus salivarius L61 и L55, у бройлеров с инфекцией Salmonella .Азиатско-Австралийский J Anim Sci. 2015; 28: 1657–1661. pmid: 26580288
11. 11. Бодера П. Влияние пребиотиков на иммунную систему человека (GALT). Недавние открытия Pat Inflamm Allergy Drug. 2008. 2: 149–153. pmid: 104
12. 12. Пиларски Р., Беднарчик М., Лисовски М., Рутковски А., Бернацкий З., Варденска М. и др. Оценка влияния вводимых во время эмбриогенеза альфа-галактозидов на отдельные признаки цыплят. Folia Biol (Краков). 2005; 53: 13–20.
13. 13.Мадей Дж. П., Беднарчик М. Влияние пребиотиков и синбиотиков, доставляемых in ovo, на морфологию и специфический состав иммунных клеток в лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечником. Poult Sci. 2015; 95: 19–29. pmid: 26527705
14. 14. Авад В.А., Гариб К., Абдель-Рахим С., Бем Дж. Влияние включения в рацион пробиотика и синбиотика на показатели роста, вес органов и гистоморфологию кишечника цыплят-бройлеров. Poult Sci. 2009. 88: 49–56. pmid: 156
15. 15.Alloui MN, Szczurek W, Science F. Полезность пребиотиков и пробиотиков в современном питании домашней птицы: обзор. Ann Anim Sci. 2013; 13: 17–32.
16. 16. Sansonetti PJ, Di Santo JP. Отладка того, как бактерии манипулируют иммунным ответом. Иммунитет. 2007. 26: 149–61. pmid: 17307704
17. 17. Бар-Шира Э., Склан Д., Фридман А. Установление иммунной компетентности в птичьем GALT в период сразу после вылупления. Dev Comp Immunol. 2003. 27: 147–57.pmid: 12543128
18. 18. Sławińska A, Siwek M, Zylińska J, Bardowski J, Brzezińska J, Gulewicz KA, et al. Влияние синбиотиков, вводимых in ovo, на развитие и структуру иммунных органов. Folia Biol (Краков). 2014; 62: 277–85.
19. 19. Славинская А, Сивек М.З., Беднарчик М.Ф. Влияние синбиотиков, вводимых in ovo, на регуляцию экспрессии иммунных генов у взрослых цыплят. Am J Vet Res. 2014; 75: 997–1003. pmid: 25350090
20. 20. Płowiec A, Sławińska A, Siwek MZ, Bednarczyk MF.Влияние in ovo введения инулина и Lactococcus lactis на экспрессию иммунных генов у цыплят-бройлеров. Am J Vet Res. 2015; 76: 975–82. pmid: 26512543
21. 21. Мадей Дж. П., Стефаниак Т., Беднарчик М. Влияние пребиотиков и синбиотиков, доставленных in ovo, на морфологию лимфоидных органов у кур. Poult Sci. 2015; 94: 1209–19. pmid: 25877410
22. 22. Беднарчик М., Урбановски М., Гулевич П., Касперчик К., Майорано Г., Швачковски Т. Филд и in vitro Исследование пребиотического действия олигосахаридов семейства рафинозы у кур.Bull Vet Inst Pulawy. 2011; 55: 465–469.
23. 23. Bogucka J, Dankowiakowska A, Elminowska-Wenda G, Sobolewska A, Szczerba A, Bednarczyk M. Влияние пребиотиков и синбиотиков, вводимых in ovo, на гистоморфологию тонкой кишки бройлеров в первые дни после вылупления. Folia Biologica (Краков). 2016; 64: 131–134.
24. 24. Miśta D, Króliczewska B, Pecka-Kiełb E, Kapuśniak V, Zawadzki W., Graczyk S, et al. Влияние введенных пребиотиков и синбиотиков in ovo на слепую брожение и морфологию кишечника цыплят-бройлеров.Anim Prod Sci. 2016; под давлением.
25. 25. Майорано Г., Соболевска А., Чианчулло Д., Валасик К., Эльминовска-Венда Г., Славинска А. и др. Влияние введения пребиотика и синбиотика in ovo на качество мяса цыплят-бройлеров. Poult Sci. 2012; 91: 2963–2969. pmid: 230
26. 26. Прушинска-Осмалек Э., Колодзейски П.А., Стадницка К., Сассек М., Чалупка Д., Кустон Б. и др. In ovo Инъекция пребиотиков и синбиотиков влияет на пищеварительную активность поджелудочной железы у растущих цыплят.Poult Sci. 2015; 94: 1909–16. pmid: 26112038
27. 27. Коенен М.Э., Ван Дер Хюльст Р., Леринг М., Еуриссен ШМ, Боерсма WJA. Разработка и валидация нового анализа in vitro для отбора пробиотических бактерий, которые проявляют иммуностимулирующие свойства у цыплят in vivo. FEMS Immunol Med Microbiol. 2004. 40: 119–127. pmid: 14987730
28. 28. Gulewicz P, Ciesiołka D, Frias J, Vidal-Valverde C, Frejnagel S, Trojanowska K, et al. Простой метод выделения и очистки альфа-галактозидов из бобовых.J. Agric Food Chem. 2000. 48: 3120–3123. pmid: 10956079
29. 29. де Ман Дж.С., Рогоза М., Шарп МЭ. Среда для культивирования лактобацилл. J Appl Bacteriol. 1960. 23: 130–135.
30. 30. Chlebowska-migiel A, Gniewocz M. Próba zastosowania pullulanu jako stymulatora wzrostu wybranych bakterii probiotycznych i Potencjalnie probiotycznych. ŻYWNOŚĆ Nauk Technol Jakość. 2013; 3: 111–124.
31. 31. Gulewicz P, Szymaniec S, Bubak B, Frias J, Vidal-Valverde C, Trojanowska K, et al.Биологическая активность препаратов альфа-галактозидов из семян Lupinus angustifolius L. и Pisum sativum L. J. Agric Food Chem. 2002; 50: 384–389. pmid: 11782212
32. 32. Салих Н.К.М., Хутари А., Гасим В.С., Юсофф WMW. Максимальное увеличение роста и хранения локально изолированных Lactobacillus salivarius subsp. salivarius с высокой стабильностью и функциональностью. 25-я Южная конференция по биомедицинской инженерии, 2009 г., 15–17 мая 2009 г., Майами, Флорида, США. IFMBE Proceedings 24: 175–178.
33. 33. Айед Л., Хамди М. Условия культивирования танназы Lactobacillus plantarum. Biotechnol Lett. 2002; 24: 1763–1765.
34. 34. Rawski M, Kierończyk B, Długosz J, witkiewicz S., Józefiak D. Диетические пробиотики влияют на микробиоту желудочно-кишечного тракта, гистологическую структуру и минерализацию панциря черепах. PLoS One. 2016; 11: e0147859. pmid: 26828367
35. 35. Ptak A, Bedford MR, witkiewicz S, yła K, Józefiak D. Фитаза модулирует микробиоту подвздошной кишки и улучшает показатели роста цыплят-бройлеров.PLoS One. 2015; 10: e0119770. pmid: 25781608
36. 36. Йе Дж., Кулурис Дж., Зарецкая И., Каткуташ И., Розен С., Мэдден Т.Л. Primer-BLAST: инструмент для разработки целевых праймеров для полимеразной цепной реакции. BMC Bioinformatics. 2012; 13: 134. pmid: 22708584
37. 37. Ливак К.Дж., Шмитген Т.Д. Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-Delta Delta C (T)). Методы. 2001; 25: 402–408. pmid: 11846609
38. 38.Годерска К., Новак Дж., Чарнецки З. Сравнение роста видов Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium bifidum в средах, дополненных выбранными сахаридами, включая пребиотики. Acta Sci Pol Technol Aliment. 2008; 7: 5–20.
39. 39. Kneifel W, Rajal A, Kulbe KD. In vitro Ростовые характеристики пробиотических бактерий в питательной среде с углеводами, имеющими пребиотическое значение. Microb Ecol Health Dis. 2000; 12: 27–34.
40. 40. Каммингс Дж. Х., Макфарлейн ГТ, Энглист ХН. Пребиотическое пищеварение и ферментация. Am J Clin Nutr. 2001. 73: 415–420.
41. 41. Фуллер Р. Пробиотики у человека и животных. J Appl Bacteriol. 1989. 66: 365–378. pmid: 2666378
42. 42. Bednarczyk M, Stadnicka K, Kozłowska I, Abiuso C, Tavaniello S, Dankowiakowska A, et al. Влияние различных пребиотиков и способа их введения на продуктивность цыплят-бройлеров. Животное. 2016; 1271–9.pmid: 26936310
43. 43. Фурузе М., Йокота Х. Влияние микрофлоры кишечника на рост цыплят и использование белка и энергии при различных концентрациях диетического белка. Br Poult Sci. 1985; 26: 97–104. pmid: 3971197
44. 44. Мукиа С., Сио С.К., Рамасами К., Абдулла Н., Хо Ю.В. Влияние диетических пребиотиков, пробиотиков и синбиотиков на продуктивность, популяцию бактерий в слепой кишке и концентрацию ферментации в слепой кишке цыплят-бройлеров. J Sci Food Agric.2014; 94: 341–348. pmid: 24037967
45. 45. Гасеми Х.А., Шивазад М., Мирзапур Резаи С.С., Торшизи МАК. Влияние синбиотических добавок и источников пищевых жиров на продуктивность бройлеров, липиды сыворотки крови, профиль жирных кислот в мышцах и качество мяса. Br Poult Sci. 2015;
46. 46. Муршед М., Абудабос А. Влияние диетического включения пробиотика, пребиотика или их комбинаций на показатели роста цыплят-бройлеров. Rev Bras Ciência Avícola. 2015; 17: 99–103.
47. 47. Mountzouris KC, Tsitrsikos P, Palamidi I, Arvaniti A, Mohnl M, Schatzmayr G, et al. Влияние уровней включения пробиотиков в питание бройлеров на показатели роста, усвояемость питательных веществ, иммуноглобулины плазмы и состав микрофлоры слепой кишки. Poult Sci. 2010. 89: 58–67. pmid: 20008803
48. 48. Мусави SMAA, Сейдави А., Дадашбейки М., Килонзо-Нтенге А., Нахашон С.Н., Лаудадио В. и др. Влияние синбиотика (Биомин®ИМБО) на показатели роста цыплят-бройлеров.Europ Poult Sci 2015; 79.
49. 49. Саланитро Дж. П., Блейк И. Г., Мюирхед ПА, Маглио М., Гудман-младший. Бактерии, выделенные из двенадцатиперстной, подвздошной и слепой кишки молодых цыплят. Appl Environ Microbiol. 1978; 35: 782–90. pmid: 646359
50. 50. Пан Д., Ю. З. Микробиом кишечника домашней птицы и его взаимодействие с хозяином и диетой. Кишечные микробы. 2014; 5: 108–19. pmid: 24256702
51. 51. Крумхольц Л.Р., Брайант М.П. Syntrophococcus Sucromutans sp. нояген. ноя использует углеводы в качестве доноров электронов и формиат, метоксимонобензоиды или Methanobrevibacter в качестве систем акцептора электронов. Arch Microbiol. 1986; 143: 313–318.
52. 52. Andreesen JR. Род Eubacterium . В: Balows A, Trüper HG, Dworkin M, Harder W, Schleifer KH, редакторы. Прокариоты. 2-е редактирование. Нью-Йорк: Springer Verlag; 1992. С. 1914–1924.
53. 53. Коллинз, доктор медицины, Лоусон П.А., Виллемс А., Кордова Дж. Дж., Фернандес-Гарайзабал Дж., Гарсия П. и др.Филогения рода Clostridium : предложение пяти новых родов и одиннадцати новых комбинаций видов. Int J Syst Bacteriol. 1994; 44: 812–826. pmid: 7981107
54. 54. Barcenilla A, Pryde SE, Martin JC, Duncan SH, Stewart CS, Henderson C, et al. Филогенетические отношения бактерий, продуцирующих бутират, из кишечника человека. Appl Environ Microbiol. 2000; 66: 1654–1661. pmid: 10742256
55. 55. Аминов Р.И., Уокер А.В., Дункан С.Х., Хармсен Х.И.М., Веллинг Г.В., Флинт Х.Дж.Молекулярное разнообразие, культивирование и улучшенное обнаружение с помощью флуоресцентной гибридизации in situ доминантной группы кишечных бактерий человека, родственных Roseburia spp. или Eubacterium rectale . Appl Environ Microbiol. 2006. 72: 6371–6376. pmid: 16957265
56. 56. Falagas ME, Siakavellas E. Bacteroides , Prevotella и Porphyromonas видов: обзор устойчивости к антибиотикам и терапевтических возможностей. Int J Antimicrob Agents.2000; 15: 1–9. pmid: 10856670
57. 57. Кобаяси А., Сано Д., Хатори Дж., Исии С., Окабе С. Генетические маркеры Bacteroides-Prevotella , связанные с курицей и уткой, для обнаружения фекального загрязнения в окружающей воде. Appl Microbiol Biotechnol. 2013; 97: 7427–7437. pmid: 23053113
58. 58. Лу Дж., Идрис Ю, Хармон Б., Хофакр С., Маурер Дж. Дж., Ли MD. Разнообразие и преемственность кишечного бактериального сообщества созревающих цыплят-бройлеров. Appl Environ Microbiol.2003. 69: 6816–6824. pmid: 14602645
59. 59. Энгберг Р.М., Хедеманн М.С., Стинфельдт С., Йенсен ББ. Влияние цельной пшеницы и ксиланазы на продуктивность бройлеров, микробный состав и активность в пищеварительном тракте. Poult Sci. 2004; 83: 925–938. pmid: 15206619
60. 60. Józefiak D, Sip A, Rutkowski A, Rawski M, Kaczmarek S, Wołuń-Cholewa M, et al. Лиофилизированный препарат бактериоцина Carnobacterium divergens AS7 улучшает продуктивность цыплят-бройлеров, зараженных Clostridium perfringens .Poult Sci. 2012; 91: 1899–1907. pmid: 22802184
61. 61. Назеф Л., Белгуэсмия Ю., Тани А., Превост Х., Драйдер Д. Идентификация молочнокислых бактерий в фекалиях домашней птицы: данные об активности против кампилобактерий и листерий. Poult Sci. 2008. 87: 329–334. pmid: 18212377
62. 62. Юзефяк Д., Глоток А. Бактериоцины в питании птицы — обзор / Бактериоцины с живеню дробью – артыкул пржеглдовы. Ann Anim Sci. 2013; 13: 449–462.
63. 63. Энгберг Р.М., Хедеманн М.С., Лезер Т.Д., Йенсен ББ.Влияние бацитрацина цинка и салиномицина на микрофлору кишечника и продуктивность бройлеров. Poult Sci. 2000. 79: 1311–1319. pmid: 11020077
64. 64. Губан Дж., Корвер Д.Р., Эллисон Г.Е., Таннок Г.В. Связь диетического приема противомикробных препаратов с производительностью бройлеров, сниженным уровнем популяции Lactobacillus salivarius и пониженной деконъюгацией желчной соли в подвздошной кишке цыплят-бройлеров. Poult Sci. 2006. 85: 2186–2194. pmid: 17135676
65. 65.Knarreborg A, Engberg RM, Jensen SK, Jensen BB. Количественное определение активности гидролаз желчных солей у бактерий, выделенных из тонкого кишечника цыплят. Appl Environ Microbiol. 2002; 68: 6425–6428. pmid: 12450872
66. 66. Брисбин Дж. Т., Гонг Дж., Шариф С. Взаимодействие между комменсальными бактериями и кишечной иммунной системой курицы. Anim Health Res Rev.2008; 9: 101–110. pmid: 18541076
67. 67. Гальдеано С.М., де Морено де Леблан А, Виндерола Дж., Бонет МЭБ, Пердигон Дж.Предлагаемая модель: механизмы иммуномодуляции, индуцированные пробиотическими бактериями. Clin Vaccine Immunol. 2007; 14: 485–92. pmid: 17360855
68. 68. Славиньска А., Сивек М., Беднарчик М. Скрининг иммуномодулирующих свойств синбиотиков в линии клеток куриного DT40 in vitro. Anim Sci Pap Rep. 2016; 34: 81–93.
69. 69. Franks AH, Harmsen HJM, Raangs GC, Jansen GJ, Schut F, Welling GW. Вариации бактериальных популяций в фекалиях человека, количественно оцененные с помощью флуоресцентной гибридизации in situ с группоспецифичными олигонуклеотидными зондами, нацеленными на 16S рРНК.Appl Environ Microbiol 1998; 64: 3336–3345. pmid: 9726880
70. 70. Сгир А., Антонопулос Д., Маки Р.И. Разработка и оценка зонда для гибридизации Lactobacillus , специфичного для группы рибосомных РНК, и его применение для изучения микроэкологии кишечника у свиней. Syst Appl Microbiol. 1998. 21: 291–296. pmid: 9704114
71. 71. Harmsen HJM, Elfferich P, Schut F, Welling GW. Зонд, нацеленный на 16S рРНК, для обнаружения лактобацилл и энтерококков в образцах фекалий с помощью флуоресцентной гибридизации in situ.Microb Ecol Health Dis. 1999; 11: 3–12.
72. 72. Манц В., Шевзик Ю., Эрикссон П., Аманн Р. И., Шлейфер К. Х., Стенстрём Т. А.. Идентификация in situ бактерий в питьевой воде и прилегающих биопленках путем гибридизации с флуоресцентными олигонуклеотидными зондами, направленными на 16S рибосомную РНК и 23S рибосомную РНК. Appl Environ Microbiol. 1993; 59: 2293–2298. pmid: 8357261
73. 73. Chiang HI, Berghman LR, Zhou H. Ингибирование NF-kB 1 (NF-kBp50) посредством РНК-интерференции в клеточной линии куриных макрофагов HD11, зараженной Salmonella enteritidis.Genet Mol Biol. 2009. 32: 507–515. pmid: 21637513
74. 74. Брисбин Дж. Т., Гонг Дж., Парвизи П., Шариф С. Влияние лактобацилл на экспрессию цитокинов клетками куриной селезенки и миндалин слепой кишки. Clin Vaccine Immunol. 2010; 17: 1337–1343. pmid: 20668142
75. 75. Де Боевер С., Вангестель С., Де Бакер П., Кроубелс С., Sys SU. Идентификация и валидация генов домашнего хозяйства в качестве внутреннего контроля экспрессии генов в модели внутривенного LPS воспаления у кур.Vet Immunol Immunopathol. 2008. 122: 312–317. pmid: 18272235
76. 76. Севане Н., Биаладе Ф, Веласко С., Реболе А., Родригес М.Л., Ортис Л.Т. и др. Добавка инулина в рацион значительно изменяет транскриптомный профиль печени цыплят-бройлеров. PLoS One. 2014; 9.

Измените здоровье кишечника с помощью пробиотиков нового поколения от Seed

Я рад представить вам Seed Daily Synbiotic — пробиотик нового поколения, который может изменить здоровье кишечника

Этот пост спонсируется Seed

Эти Куда бы вы ни повернулись, вы читаете что-то о важности здоровья кишечника, и я здесь, чтобы сказать вам, что за последний год я отправился в путешествие, чтобы изменить здоровье своего кишечника, и чувствую себя лучше, чем за последние годы! Есть две вещи, которые я приписываю этой здоровой трансформации: одна — убирать еду и сводить к минимуму переработанную пищу, а другая — принимать ежедневные пробиотики.

Но вот в чем дело, не все пробиотики созданы одинаково, и поэтому я рад представить вам мое последнее достойное RAVE открытие Seed Daily Synbiotic . Seed — это пробиотическая и пребиотическая добавка нового поколения, разработанная для оптимального здоровья пищеварительной системы, здоровья кожи, сердца, иммунной функции кишечника, целостности кишечного барьера и синтеза питательных микроэлементов.

Вот что отличает синбиотик Seed Daily Synbiotic от других пробиотиков:

• Он состоит из 24 высокоактивных штаммов пробиотиков, которые, как было клинически доказано, способствуют здоровому уровню холестерина
• Поскольку бактерии хрупкие и чувствительны к элементам , этот пробиотик сделан с использованием невероятно инновационной технологии вложенных капсул, которая гарантирует, что бактерии остаются живыми и жизнеспособными на протяжении всего пищеварительного цикла и в толстую кишку, где начинается их работа.
  
• Капсулы изготовлены с использованием запатентованной системы доставки водорослей, которая обеспечивает дополнительную защита наиболее чувствительных штаммов бактерий, чтобы они оставались активными и стабильными при хранении в течение 18 месяцев.Кроме того, эти пробиотики не требуют охлаждения, как обычно это делают другие сильнодействующие пробиотики.

Seed Daily Synbiotic — безусловно, ЛУЧШИЙ пробиотик, который я когда-либо принимал. Мне нравятся инновации, лежащие в основе этого, и то, что он поддерживается большим количеством исследований, науки, клинических исследований и множеством медицинских экспертов! Мне нравится, что упаковка является экологически чистой и пригодной для вторичной переработки, и что они представляют собой шикарную темно-зеленую банку многоразового использования, в которой можно хранить ваши добавки и наполнять эту же банку каждый месяц с помощью ежемесячного пополняемого пакета.Я также обожаю привлекательный дорожный флакон «I Got My Bac», который вы получите вместе с вашей первой партией.

Однако больше всего мне нравится в Seed то, что я чувствую себя намного лучше, когда принимаю его каждый день! С тех пор, как я начал его использовать, мое пищеварение, выведение и здоровье кишечника никогда не были лучше, и у меня больше не было вздутия живота, болей в животе или кислотного рефлюкса. Если вы когда-либо боролись с такими проблемами желудка, вы понимаете, какое огромное облегчение — не иметь дело с этими продолжающимися симптомами! Я также хотел упомянуть, что может потребоваться всего 24-48 часов, чтобы почувствовать первоначальную пользу от приема Seed’s Daily Synbiotic, и со временем некоторые из долгосрочных преимуществ, которые вы можете испытать, включают здоровье сердечно-сосудистой системы и иммунную функцию кишечника.